Abstract

Tragiskt nog är infektioner i könsorganen fortfarande ett stort folkhälsoproblem i många regioner. Denna studie genomfördes för att fastställa prevalensen av livmoderhalsinfektion med Herpes simplex virus (HSV), Chlamydia trachomatis (CT) och Neisseria gonorrhoeae (NG) bland gifta kvinnor som hänvisar till Iranian Hospital, Dubai, UAE. I en retrospektiv tvärsnittsundersökning deltog 201 kvinnliga patienter i åldern 16-80 år som hänvisades till obstetrik- och gynekologiavdelningen vid Iranian Hospital, Dubai, Förenade Arabemiraten, under 2010. Patienterna kategoriserades i tre åldersgrupper: 15-30 år (grupp I), 31-40 år (grupp II) och 41 år (grupp III). Ett svabbprov från livmoderhalsen togs från varje kvinna och prevalensen av livmoderhalsinfektion med HSV, CT och NG bestämdes med PCR-metoden. HSV, CT och NG påvisades i 6,5 %, 10,4 % respektive 5,5 % av svabbproverna. När det gäller ålder noterades en signifikant skillnad för prevalensen av NG och HSV mellan grupperna I och III. På grund av de sexuellt överförbara sjukdomarnas (STD) betydelse för folkhälsan, deras långvariga inverkan på livskvaliteten och deras ekonomiska börda verkar det nödvändigt med förebyggande åtgärder och utbildning av kvinnor.

1. Introduktion

Tragiskt nog är infektioner i könsorganen fortfarande ett stort folkhälsoproblem i många regioner . Årligen rapporteras mer än 15 miljoner nya fall av sexuellt överförbara sjukdomar (STD) i USA . Bland kvinnor kan vissa av dem leda till långvariga bäckeninflammatoriska sjukdomar, infertilitet, utomkvedshavandeskap, dyspareuni och livmoderhalscancer . Varje år inträffar mer än hälften av alla nya fall av könssjukdomar hos unga personer mellan 15 och 24 år . Dessutom kan de hos unga och tonåriga kvinnor leda till depression, lågt socialt stöd och framträdande stress .

Majoriteten av sexuellt överförbara sjukdomar som Herpes simplex-virus (HSV), Chlamydia trachomatis (CT) och Neisseria gonorrhoeae (NG) har visat sig vara asymtomatiska hos kvinnor . Genital herpes betraktas allmänt som en vanlig kronisk könssjukdom i både utvecklade länder och utvecklingsländer med betydande sjuklighet . Infektionen orsakas av två typer av virus, däribland HSV-2 (huvudsakligen) och HSV-1 (ibland), och deras prevalens och incidens har ökat under de senaste tre decennierna.

CT-infektion är den vanligaste orsaken till bakteriell könssjukdom i världen, särskilt hos unga kvinnor . Infektionen är asymtomatisk i de flesta fall och kan överföras vid vaginal, oral eller anal sexuell kontakt och kan även överföras av modern till det nyfödda barnet .

Gonorré orsakas av NG och denna patogen har visat sig ha potential att utveckla resistens mot ofta använda antimikrobiella medel, särskilt hos obehandlade patienter. Dessa fall kan fortsätta att överföra och underlätta den snabba uppkomsten av antimikrobiell resistens . Incidensen av sjukdomen är hög; därför är diagnostik av både symtomatiska och asymtomatiska infektioner av stor betydelse .

Under de senaste åren har snabbdetekteringskit och dipstickor använts som vanliga, bekväma och snabba metoder för screening av sexuellt överförbara sjukdomar. Nya molekylära metoder som PCR, kvalitativ och kvantitativ realtids-PCR och DNA-hybridisering har dock introducerats som mer tillförlitliga tekniker för diagnostik av ett stort antal STD i jämförelse med serologiska metoder. Dessutom kan övervakning av DNA-nivån av en patogen i kroppsvätskor avslöja sjukdomens status, dess svar på medicinering och dess resistensmönster .

I Dubai, Förenade Arabemiraten, har individernas livsstil förändrats. Dessutom lockades många migrantarbetare eller investerare från mer än 100 länder från Asien, Afrika, Europa och så vidare till denna stad. Eftersom Dubai är den åttonde mest besökta staden i världen av turister och det visades att den attraherade mer än 15 miljoner turister från olika länder fram till 2015, kan könssjukdomar därför vara ett nytt folkhälsoproblem i Dubai, Förenade Arabemiraten. Screening av könssjukdomar hos befolkningen i Dubai kan vara det första och mycket viktiga steget i hanteringen av ett folkhälsoproblem. Syftet med denna studie var att fastställa prevalensen av livmoderhalsinfektion med HSV, CT och NG bland gifta kvinnor som hänvisar till Iranian Hospital, Dubai, Förenade Arabemiraten.

2. Ämnen och metoder

2.1. Studiepopulation

Studien omfattade 201 kvinnliga patienter i åldern 16-80 år ( år) som hänvisade till obstetrik och gynekologiavdelningen på Iranian Hospital, Dubai, 2010 med symtom som klåda i genitalområdet, dyspareuni, dysuri eller onormala vaginala flytningar. Patienterna var av olika nationaliteter (tabell 1) och alla var gifta. Patienterna kategoriserades i tre åldersgrupper: 15-30 år (grupp I), 31-40 år (grupp II) och ≥41 år (grupp III). Ett prov från ett cervikalt svabbprov samlades in med sterila svabbar från alla patienter och överfördes i ett viralt transportmedium till Professor Alborzi Clinical Microbiology Research Center, Nemazee Hospital, Shiraz, Iran, för vidare undersökning. Studien godkändes av Office of Education and Research of Iranian Hospital, Dubai.

2.2. DNA-extraktion

DNA extraherades från svabbprover i 200 μL viralt transportmedium med Invisorb spin virus DNA Mini Kit (Invitek, Berlin, Tyskland) enligt tillverkarens protokoll. För detektion av CT tillsattes en standardiserad mängd internt kontroll-DNA, som levererades med realtids-PCR-kitet, till lysisbufferkitet för att övervaka extraktionens effektivitet. Negativa och positiva kontroller ingick i extraktionsprocessen.

2.3. Kvantitativ PCR i realtid för detektion av HSV och CT

Den kvantitativa PCR i realtid utfördes med hjälp av oligonukleotidprimerpar och prober som är specifika för regionen för HSV1 och HSV2 glykoprotein B (gB), som tidigare rapporterats . De primers som användes var HSVFP (5′TCC CGG TAC GAA GAC CAG3′) och HSVRP (5′AGC AGG CCG CTG CTG TCC TTG3′), och sonden var HSVTCP (5′FAMTGG TCC TCC TCC AGC ATG GTG ATG TTG TTG/C AGG TCGTAMRA3′). Reaktionen utfördes enligt följande protokoll: 2 minuters inkubation vid 50 °C för AmpErase-aktivering, 10 minuter vid 95 °C för polymerasaktivering och för 45 cykler, 15 sekunder vid 94 °C för denaturering och 60 sekunder vid 58 °C för glödgning, förlängning och datainsamling. Varje 50 μL PCR-blandning innehöll 10 μL renat DNA, 840 nM koncentration av varje primer och 100 nM sond i 1x TaqMan universal PCR master mix (Applied Biosystems, Branchburg, New Jersey, USA).

För att detektera CT utfördes en kvantitativ PCR i realtid med oligonukleotidprimerpar och sonder som är specifika för CT-genom med hjälp av Advanced Kit (PrimerDesign Ltd., Millbrook Technology Campus, South Hampton, UK). Amplifikationen utfördes med hjälp av TaqMan universal real time PCR master mix-reagenser (Roche, Branchburg, New Jersey, USA). Den utfördes med följande protokoll i fyra steg: 2 minuters inkubation vid 50 °C för AmpErase-aktivering, 10 minuter vid 95 °C för polymerasaktivering och för 45 cykler, 10 sekunder vid 95 °C för denaturering och 60 sekunder vid 60 °C för glödgning, förlängning och datainsamling.

Alla amplifieringar utfördes i en Applied Biosystem Sequence Detector 7500-maskin (Applied Biosystems, USA). Negativa kontroller ingick i extraktionsprocessen mellan varje 20 kliniska prover. Alla negativa prover testades två gånger.

2.4. Detektion av NG

NG detekterades med ett PCR-detektionskit (CinnaGen Inc., Iran) enligt tillverkarens protokoll. Reaktionsblandningen värmdes vid 94 °C i 3 minuter och inkuberades sedan i 35 cykler av 94 °C i 45 sekunder, 50 °C i 20 sekunder och 72 °C i 30 sekunder och i 5 minuter vid 72 °C för en ytterligare förlängning. PCR-produkterna analyserades på 1 % agarosgel.

2.5. Statistisk analys

Differenser i prevalens av HSV, CT och NG mellan åldersgrupper analyserades med chi-square-test. Dessutom analyserades sambandet mellan HSV, CT och NG och förekomsten av svamp-bakteriell livmoderhalsinfektion med chi-square-test. Alla data analyserades med hjälp av SPSS-programvaran (SPSS för Windows, version 16, SPSS Inc., Chicago, IL, USA). Alla värden av ansågs statistiskt signifikanta.

3. Resultat

Candida spp. och Coccobacilli cervikal infektion betraktades som svamp-bakteriell infektion med en prevalens på 45,3 % och icke-svamp-bakteriell infektion med en prevalens på 54,7 %. HSV och CT var positiva i 13 (6,5 %) respektive 21 (10,4 %) svabbprover. Kopieringsantalet av HSV-DNA mätt med realtids-PCR-analysen varierade från 3,11 × 103 till 7,18 × 105 kopior/mL i viraltransportmediet (medianvärdet 4 × 104 kopior/mL) och CT-DNA-kopieringsantalet varierade från 3,48 × 103 till 7,11 × 106 kopior/mL i viraltransportmediet (medianvärdet 3,33 × 105 kopior/mL). NG påvisades hos 11 (5,5 %) patienter.

Tabell 2 visar sjukdomarnas prevalens i olika åldersgrupper. Ingen av patienterna hade blandade infektioner. Det fanns inga signifikanta skillnader i prevalensen av CT mellan olika åldersgrupper (). Prevalensen av NG och HSV skilde sig inte signifikant mellan grupperna I och II samt II och III (); det fanns dock signifikanta skillnader mellan grupperna I och III (). Dessutom var skillnaderna i prevalens av HSV-, CT- och NG-infektioner inte statistiskt signifikanta mellan gruppen med svampbakteriell livmoderhalsinfektion och gruppen med icke-svampbakteriell infektion (). I tabell 3 jämförs våra uppgifter i Dubai, Förenade Arabemiraten, för prevalens av HSV, CT och NG med olika studier.

4. Diskussion

I den aktuella studien var av 201 kvinnor 6,5 %, 10,4 % och 5,5 % infekterade med HSV, CT respektive NG. Våra nuvarande resultat om HSV-, CT- och NG-infektion stämmer överens med tidigare undersökningar om prevalensen av sexuellt överförbara sjukdomar. Nyligen fann man i en liknande undersökning HSV-2-DNA hos 7 % av 509 kvinnor i USA . En tidigare studie i Turkiet visade att 12,7 % av lågriskkvinnorna var infekterade med CT . Gaydos et al. rapporterade att 3,8 % av deras undersökta kvinnliga populationer var infekterade med NG .

Förra litteratur tyder på att majoriteten av HSV-, CT- och NG-infektionerna kan vara asymtomatiska och långvariga . I den aktuella studien var ingen av kvinnorna medveten om sin infektion innan de genomgick screening, men vissa kliniska symtom var synliga. Prevalensen av sexuellt överförbara sjukdomar var genomgående högre i högriskpopulationer jämfört med dem som anses ha en lägre risk. Vanligt förekommande riskfaktorer förknippade med sexuellt överförbara sjukdomar är bland annat ogifta och många sexpartners . I Amsterdam, Nederländerna, noterades den högsta prevalensen av HSV-1 eller HSV-2 i de yngsta åldersgrupperna, medan tonåringar och vuxna i tjugoårsåldern hade en prevalens på 5,26 % respektive 4,31 % . I Peru var prevalensen av infektion hos kvinnor med CT-infektion 6-5 % och med NG-infektion 0-1 % . I Sydkorea var den totala upptäcktsfrekvensen för CT 2,4 % och för HSV typ II 0,8 % . Hos tunisiska kvinnliga sexarbetare var CT, NG och HSV-2 PCR positiva hos 72,9 %, 11,2 % respektive 1,1 % av kvinnorna .

Och även om tidigare studier har visat att ung ålder är förknippad med positiva resultat för CT, finns det några undersökningar som inte har rapporterat något samband mellan ålder och sjukdomsprevalens . På samma sätt visade våra resultat att det inte fanns någon signifikant skillnad i prevalensen av CT mellan olika åldersgrupper.

Flera studier visade att HSV-prevalensen konsekvent ökade med åldern i de flesta geografiska områden . Som förväntat visade resultaten av den aktuella studien att prevalensen av HSV var signifikant högre i grupp III jämfört med grupp I. En liknande studie i Bangladesh visade att prevalensen av HSV-2-antikroppar var låg bland gifta kvinnor yngre än 20 år . Följaktligen ökade denna prevalens med åldern, vilket kan vara relaterat till varaktigheten av sexuellt aktiva år hos kvinnor.

Däremot visade våra resultat att prevalensen av NG minskade med åldern och att det fanns en signifikant skillnad i prevalensen av infektionen mellan grupperna I och III och att infektionen var mer utbredd hos unga kvinnor. Detta resultat är oförenligt med en annan studie . I Nigeria var NG-infektion vanligare hos kvinnor vid 25 års ålder.

En studie i Kina bland kvinnliga sexarbetare visade att 8 % av de studerade populationerna var infekterade med NG, vilket låg nära infektionsfrekvensen hos unga kvinnor. Även om alla kvinnor i den aktuella studien var gifta och de hade inga sexuella relationer utanför familjen var prevalensen av könssjukdomar hos dessa patienter hög. Partnerens sexuella relation måste dock utvärderas. En tidigare undersökning i Frankrike visade att bland 111 asymtomatiska manliga partners till infertila par upptäcktes CT med PCR COBAS AMPLICOR- och serologitestet hos 6,3 % respektive 4,5 % av patienterna . Därför verkar det som om övervakning av sexualpartners är viktigt för att förebygga sexuellt överförbara sjukdomar.

Svamp-bakteriell livmoderhalsinfektion hittades hos 45,3 % av den studerade populationen, men det fanns inga signifikanta skillnader i prevalensen av HSV-, CT- och NG-infektioner mellan gruppen med svamp-bakteriell livmoderhalsinfektion och gruppen med icke-svamp-bakteriell infektion. Det visades att blandade infektioner med bakteriell eller svampig vaginos och sexuellt överförbara sjukdomar kan förekomma, t.ex. HSV, CT, NG och T. vaginalis . Det behövs ytterligare undersökningar för att på ett heltäckande sätt utvärdera den roll som bakteriell och svampig livmoderhalsinfektion spelar i patogenesen för HSV, CT, NG och andra sexuellt överförbara sjukdomar. En övervakning av prevalensen och incidensen av sexuellt överförbara sjukdomar i befolkningen, särskilt bland ungdomar, skulle hjälpa de statliga myndigheterna att genomföra och utvärdera förebyggande strategier och insatser. På grund av STD:s betydande och långvariga inverkan på livskvaliteten och den ekonomiska förlusten av STD:s på grund av höga sjukvårdskostnader finns det ett behov av en noggrann utvärdering av STD:s över hela världen. Jerman et al. rapporterade att 1,1 miljoner nya fall av könssjukdomar inträffade bland unga patienter i Kalifornien 2005, med en direkt medicinsk kostnad på 1,1 miljarder US-dollar. Symtomatiska könssjukdomar är dessutom bara toppen av isberget och de flesta av dessa sjukdomar är asymtomatiska. Screeningprogram för könssjukdomar är därför viktiga i alla länder för att förhindra överföring av sjukdomen och hjälpa forskarna att planera för nya behandlingsprotokoll. På grund av STD:s betydelse för folkhälsan verkar det nödvändigt med förebyggande åtgärder och utbildning av kvinnor.

Intressekonflikter

Författarna förklarar att det inte finns några intressekonflikter när det gäller publiceringen av denna artikel.

Acknowledgment

Författarna uppskattar samarbetet med det iranska sjukhuset, särskilt med avdelningarna för patologi och för obstetrik och gynekologi.