Abstract

Tragmaticamente, le infezioni del tratto genitale sono ancora un importante problema di salute pubblica in molte regioni. Questo studio è stato intrapreso per determinare la prevalenza dell’infezione cervicale da Herpes simplex virus (HSV), Chlamydia trachomatis (CT) e Neisseria gonorrhoeae (NG) tra le donne sposate che si rivolgono all’Iranian Hospital, Dubai, UAE. In un’indagine trasversale retrospettiva, sono state arruolate 201 pazienti di sesso femminile di età compresa tra i 16 e gli 80 anni che si sono rivolte al reparto di ostetricia e ginecologia dell’Iranian Hospital, Dubai, EAU, nel 2010. Le pazienti sono state classificate in tre gruppi di età: 15-30 (gruppo I), 31-40 (gruppo II) e 41 anni (gruppo III). Un campione di tampone cervicale è stato raccolto da ogni donna e la prevalenza dell’infezione cervicale da HSV, CT e NG è stata determinata con il metodo PCR. HSV, CT e NG sono stati rilevati nel 6,5%, 10,4% e 5,5% dei campioni di tampone, rispettivamente. Per quanto riguarda l’età, una differenza significativa è stata notata per la prevalenza di NG e HSV tra i gruppi I e III. A causa dell’importanza per la salute pubblica delle malattie sessualmente trasmissibili (STD), del loro impatto duraturo sulla qualità della vita e del loro onere economico, sembrano necessarie misure di prevenzione ed educazione delle donne.

1. Introduzione

Tragmaticamente, le infezioni del tratto genitale sono ancora un importante problema di salute pubblica in molte regioni. Ogni anno negli Stati Uniti, più di 15 milioni di nuovi casi di malattie sessualmente trasmissibili (STD) sono stati segnalati. Tra le donne, alcune di esse possono portare a malattie infiammatorie pelviche a lungo termine, infertilità, gravidanze ectopiche, dispareunia e cancro cervicale. Ogni anno, più della metà di tutti i nuovi casi di STD si verificano in individui giovani tra i 15 e i 24 anni. Inoltre, nelle donne giovani e adolescenti, possono provocare depressione, scarso sostegno sociale e stress prominente .

La maggior parte delle STD come l’Herpes simplex virus (HSV), Chlamydia trachomatis (CT), e Neisseria gonorrhoeae (NG) hanno dimostrato di essere asintomatiche nelle donne . L’herpes genitale è generalmente considerato come una comune malattia sessualmente trasmissibile cronica sia nei paesi sviluppati che in quelli in via di sviluppo, con una sostanziale morbilità. L’infezione è causata da due tipi di virus tra cui HSV-2 (principalmente) e HSV-1 (a volte), mentre la loro prevalenza e l’incidenza sono aumentati negli ultimi tre decenni .

L’infezione da TBC è la causa più frequente di STD batterica nel mondo, soprattutto nelle giovani donne. L’infezione è asintomatica nella maggior parte dei casi e può essere trasmessa durante il contatto sessuale vaginale, orale o anale e può essere trasmessa anche dalla madre al neonato.

La gonorrea è causata da NG e questo patogeno ha dimostrato di avere il potenziale di sviluppare resistenza agli agenti antimicrobici frequentemente utilizzati, soprattutto nei pazienti non curati. Questi casi possono continuare a trasmettere e facilitare il rapido emergere della resistenza antimicrobica. Il tasso di incidenza della malattia è alto, quindi la diagnosi delle infezioni sia sintomatiche che asintomatiche è di grande importanza.

Negli ultimi anni, i kit di rilevamento rapido e i dipstick sono stati utilizzati come metodi comuni, convenienti e veloci per lo screening delle malattie sessualmente trasmissibili. Tuttavia, i nuovi metodi molecolari come la PCR, la PCR qualitativa e quantitativa in tempo reale e l’ibridazione del DNA sono stati introdotti come tecniche più affidabili nella diagnosi di un’ampia varietà di malattie sessualmente trasmissibili rispetto ai metodi sierologici. Inoltre, il monitoraggio del livello di DNA di un patogeno nei fluidi corporei può rivelare lo stato della malattia, la sua risposta ai farmaci e i suoi modelli di resistenza. Inoltre, molti lavoratori migranti o investitori sono stati attratti in questa città da più di 100 paesi di Asia, Africa, Europa e così via. Poiché Dubai è l’ottava città più visitata al mondo dai turisti e ha dimostrato di attirare più di 15 milioni di turisti da vari paesi fino al 2015, quindi, le malattie sessualmente trasmissibili possono essere una preoccupazione emergente per la salute pubblica a Dubai, negli Emirati Arabi Uniti. Lo screening delle malattie sessualmente trasmissibili nella popolazione di Dubai può essere il primo e critico passo nella gestione di un problema di salute pubblica. L’obiettivo di questo studio è stato quello di determinare la prevalenza di infezione cervicale con HSV, CT e NG tra le donne sposate che si rivolgono all’ospedale iraniano, Dubai, UAE.

2. Soggetti e metodi

2.1. Popolazione di studio

Lo studio ha coinvolto 201 pazienti di sesso femminile di età compresa tra i 16 e gli 80 anni ( anni) che si sono rivolti al Dipartimento di Ostetricia e Ginecologia dell’Ospedale Iraniano, Dubai, nel 2010 con sintomi come prurito nella zona genitale, dispareunia, disuria, o scariche vaginali anomale. I pazienti erano di diverse nazionalità (Tabella 1) e tutti erano sposati. Le pazienti sono state classificate in tre gruppi di età: 15-30 (gruppo I), 31-40 (gruppo II), e ≥41 anni (gruppo III). Un campione di tampone cervicale è stato raccolto con tamponi sterili da tutte le pazienti ed è stato trasferito in un mezzo di trasporto virale al Professor Alborzi Clinical Microbiology Research Center, Nemazee Hospital, Shiraz, Iran, per ulteriori indagini. Lo studio è stato approvato dall’Ufficio per l’istruzione e la ricerca dell’ospedale iraniano, Dubai.

2.2. Estrazione del DNA

Il DNA è stato estratto da campioni di tampone in 200 μL di mezzo di trasporto virale con Invisorb spin virus DNA Mini Kit (Invitek, Berlino, Germania) secondo il protocollo del produttore. Per il rilevamento di CT, una quantità standardizzata di DNA di controllo interno, fornito con il kit di PCR in tempo reale, è stato aggiunto al kit del tampone di lisi per monitorare l’efficienza delle estrazioni. I controlli negativi e positivi sono stati inclusi nel processo di estrazione.

2.3. PCR quantitativa in tempo reale per il rilevamento di HSV e CT

La PCR quantitativa in tempo reale è stata eseguita utilizzando coppie di primer oligonucleotidici e sonde specifiche per la regione della glicoproteina B (gB) di HSV1 e HSV2, come riportato precedentemente. I primer utilizzati erano HSVFP (5′TCC CGG TAC GAA GAC CAG3′) e HSVRP (5′AGC AGG CCG CTG TCC TTG3′), e la sonda era HSVTCP (5′FAMTGG TCC TCC AGC ATG GTG ATG TTG/C AGG TCGTAMRA3′). La reazione è stata eseguita con il seguente protocollo: 2 min di incubazione a 50°C per l’attivazione dell’AmpErase, 10 min a 95°C per l’attivazione della polimerasi e per 45 cicli, 15 secondi a 94°C per la denaturazione e 60 secondi a 58°C per l’annealing, l’estensione e la raccolta dati. Ogni 50 μL di miscela PCR conteneva 10 μL di DNA purificato, 840 nM di concentrazione di ogni primer e 100 nM di sonda in 1x TaqMan universal PCR master mix (Applied Biosystems, Branchburg, New Jersey, USA).

Per il rilevamento della CT, è stata effettuata una PCR quantitativa in tempo reale con coppie di primer oligonucleotidici e sonda specifica per il genoma CT con Advanced Kit (PrimerDesign Ltd., Millbrook Technology Campus, South Hampton, UK). L’amplificazione è stata eseguita utilizzando i reagenti TaqMan universal real time PCR master mix (Roche, Branchburg, New Jersey, USA). È stata eseguita con il seguente protocollo in quattro fasi: 2 minuti di incubazione a 50°C per l’attivazione dell’AmpErase, 10 minuti a 95°C per l’attivazione della polimerasi e per 45 cicli, 10 secondi a 95°C per la denaturazione e 60 secondi a 60°C per l’annealing, l’estensione e la raccolta dati.

Tutte le amplificazioni sono state eseguite in una macchina Applied Biosystem Sequence Detector 7500 (Applied Biosystems, USA). I controlli negativi sono stati inclusi nel processo di estrazione tra ogni 20 campioni clinici. Tutti i campioni negativi sono stati testati due volte.

2.4. Rilevamento di NG

NG è stato rilevato con un kit di rilevamento PCR (CinnaGen Inc., Iran) secondo il protocollo del produttore. La miscela di reazione è stata riscaldata a 94°C per 3 minuti e poi incubata per 35 cicli di 94°C per 45 secondi, 50°C per 20 secondi e 72°C per 30 secondi e per 5 minuti a 72°C per un’ulteriore estensione. I prodotti di PCR sono stati analizzati su gel di agarosio all’1%.

2.5. Analisi statistica

Le differenze nella prevalenza di HSV, CT e NG tra i gruppi di età sono state analizzate con il test del chi-quadrato. Inoltre, l’associazione tra HSV, CT e NG e il verificarsi di un’infezione cervicale fungo-batterica sono stati analizzati con il test chi-quadrato. Tutti i dati sono stati analizzati dal software SPSS (SPSS for Windows, versione 16, SPSS Inc., Chicago, IL, USA). Tutti i valori di sono stati considerati statisticamente significativi.

3. Risultati

L’infezione cervicale da Candida spp. e Coccobacilli è stata considerata come infezione fungo-batterica con una prevalenza del 45,3% e infezione non fungo-batterica con una prevalenza del 54,7%. HSV e CT sono risultati positivi in 13 (6,5%) e 21 (10,4%) campioni di tampone, rispettivamente. Il numero di copie del DNA di HSV misurato dal test PCR in tempo reale variava da 3,11 × 103 a 7,18 × 105 copie/mL nel mezzo di trasporto virale (mediana di 4 × 104 copie/mL) e il numero di copie del DNA di CT variava da 3,48 × 103 a 7,11 × 106 copie/mL nel mezzo di trasporto virale (mediana di 3,33 × 105 copie/mL). NG è stato rilevato in 11 (5,5%) pazienti.

Tabella 2 presenta la prevalenza delle malattie in diversi gruppi di età. Nessuno dei pazienti aveva infezioni miste. Non c’erano differenze significative nella prevalenza di CT tra i diversi gruppi di età. La prevalenza di NG e HSV non era significativamente diversa tra i gruppi I e II e II e III (); tuttavia, c’erano differenze significative tra i gruppi I e III (). Inoltre, le differenze nella prevalenza delle infezioni da HSV, CT e NG non erano statisticamente significative tra il gruppo di infezioni cervicali fungo-batteriche e il gruppo non fungo-batterico (). La tabella 3 confronta i nostri dati a Dubai, EAU, per la prevalenza di HSV, CT e NG con diversi studi.

4. Discussione

Nello studio attuale, su 201 donne, il 6,5%, il 10,4% e il 5,5% erano infettate rispettivamente da HSV, CT e NG. I nostri risultati attuali sull’infezione da HSV, CT e NG sono coerenti con le indagini precedenti sulla prevalenza delle malattie sessualmente trasmissibili. Più recentemente, un’indagine simile ha trovato HSV-2 DNA nel 7% di 509 donne negli Stati Uniti. Uno studio precedente in Turchia ha mostrato che il 12,7% delle donne a basso rischio erano infette da CT. Gaydos et al. hanno riferito che il 3,8% della loro popolazione femminile studiata era infettata da NG.

La letteratura precedente ha indicato che la maggior parte delle infezioni da HSV, CT e NG possono essere asintomatiche e con una durata a lungo termine. Allo stesso modo, nel presente studio, nessuna delle donne era consapevole della sua infezione prima di sottoporsi allo screening; tuttavia, alcuni sintomi clinici erano visibili. La prevalenza delle malattie sessualmente trasmissibili è stata costantemente maggiore nelle popolazioni ad alto rischio rispetto a quelle considerate a basso rischio. I fattori di rischio comunemente citati associati alle STD includono lo stato di non sposato e i partner sessuali multipli. Ad Amsterdam, nei Paesi Bassi, la più alta prevalenza di HSV-1 o HSV-2 è stata notata nei gruppi di età più giovani, mentre gli adolescenti e gli adulti ventenni avevano una prevalenza del 5,26% e del 4,31%, rispettivamente. In Perù, la prevalenza dell’infezione nelle donne con infezione CT era del 6-5%, e con infezione NG era dello 0-1% . In Corea del Sud, il tasso di rilevamento complessivo per il CT era del 2,4% e per l’HSV tipo II era dello 0,8%. Nelle lavoratrici del sesso tunisine, CT, NG, e HSV-2 PCR erano positivi nel 72,9%, 11,2%, e 1,1% delle donne, rispettivamente.

Anche se studi precedenti hanno dimostrato che la giovane età è associata a risultati positivi per CT, ci sono alcune indagini che non hanno riportato alcuna correlazione tra età e la prevalenza della malattia. Allo stesso modo, i nostri risultati hanno mostrato che non vi era alcuna differenza significativa nella prevalenza di CT tra i diversi gruppi di età.

Vari studi hanno dimostrato che la prevalenza di HSV aumenta costantemente con l’età nella maggior parte delle aree geografiche. Come previsto, i risultati del presente studio hanno indicato che la prevalenza di HSV era significativamente più alta nel gruppo III rispetto al gruppo I. Uno studio simile in Bangladesh ha rivelato che la prevalenza di anticorpi HSV-2 era bassa tra le donne sposate di età inferiore ai 20 anni. Di conseguenza, questa prevalenza è aumentata con l’età che potrebbe essere legata alla durata degli anni sessualmente attivi nelle donne.

Al contrario, i nostri risultati hanno dimostrato che la prevalenza di NG è diminuita con l’età e c’era una differenza significativa nella prevalenza dell’infezione tra i gruppi I e III e l’infezione era più diffusa nelle giovani donne. Questo risultato non è coerente con un altro studio. In Nigeria, l’infezione da NG era più comune nelle donne all’età di 25 anni.

Uno studio in Cina tra le lavoratrici del sesso ha dimostrato che l’8% delle popolazioni studiate erano infettate da NG che era vicino al tasso di infezione nelle giovani donne. Anche se tutte le donne del presente studio erano sposate e non avevano relazioni sessuali al di fuori della famiglia, la prevalenza di STDs in queste pazienti era alta. Tuttavia, la relazione sessuale del partner deve essere valutata. Un’indagine precedente in Francia ha indicato che tra 111 partner maschi asintomatici di coppie infertili, il CT è stato rilevato dalla PCR COBAS AMPLICOR e dai test sierologici nel 6,3% e 4,5% dei pazienti, rispettivamente. Pertanto, sembra che il monitoraggio dei partner sessuali è essenziale per la prevenzione delle malattie sessualmente trasmissibili.

L’infezione cervicale fungo-batterica è stata trovata nel 45,3% della popolazione studiata, ma non c’erano differenze significative nella prevalenza di HSV, CT e infezioni NG tra il gruppo di infezioni cervicali fungo-batteriche e quello non fungo-batterico. È stato dimostrato che possono verificarsi infezioni miste con vaginosi batteriche o fungine e STD come HSV, CT, NG, e T. vaginalis. Ulteriori indagini sono necessarie per valutare in modo completo il ruolo dell’infezione cervicale batterica e fungina nella patogenesi di HSV, CT, NG, e altre STD. Il monitoraggio della prevalenza e dell’incidenza delle malattie sessualmente trasmissibili tra la popolazione e soprattutto tra i giovani aiuterebbe le autorità governative a eseguire e valutare le strategie e gli sforzi di prevenzione. A causa dell’impatto considerevole e duraturo delle malattie sessualmente trasmissibili sulla qualità della vita e la perdita economica delle malattie sessualmente trasmissibili a causa degli alti costi medici, c’è bisogno di una valutazione accurata delle malattie sessualmente trasmissibili in tutto il mondo. Jerman et al. hanno riferito che 1,1 milioni di nuovi casi di STD si sono verificati tra i giovani pazienti in California nel 2005, con un costo medico diretto di 1,1 miliardi di dollari. Inoltre, le STD sintomatiche sono solo la punta dell’iceberg e la maggior parte di queste malattie sono asintomatiche. Quindi i programmi di screening sulle STD sono importanti in tutti i paesi per prevenire la trasmissione della malattia e aiutare gli scienziati a pianificare nuovi protocolli di trattamento. A causa dell’importanza delle malattie sessualmente trasmissibili per la salute pubblica, sembrano necessarie misure di prevenzione ed educazione delle donne.

Conflitto di interessi

Gli autori dichiarano che non c’è conflitto di interessi riguardo alla pubblicazione di questo articolo.

Riconoscimenti

Gli autori apprezzano la cooperazione dell’ospedale iraniano, in particolare i dipartimenti di patologia e ostetricia e ginecologia.