Lipofectamina

Dez 14, 2021
admin

Lipofectamina ou Lipofectamina 2000 é um reagente de transfecção comum, produzido e vendido pela Invitrogen, utilizado em biologia molecular e celular. É usado para aumentar a eficiência transfeccional do RNA (incluindo mRNA e siRNA) ou DNA plasmídeo em culturas celulares in vitro por lipofecção. A lipofectamina contém subunidades lipídicas que podem formar lipossomas em um ambiente aquoso, que prendem a carga útil da transfecção, por exemplo, plasmídeos de DNA.

Lipofectamina consiste numa mistura 3:1 de DOSPA (2,3-dioleoyloxy-N- -N,N-dimetil-1-propaniminium trifluoroacetate) e DOPE (1,2-Dioleoyl-sn-glycero-3-fosfoetanolamina), que se complementa com moléculas de ácido nucleico carregadas negativamente para lhes permitir ultrapassar a repulsão electrostática da membrana celular. As moléculas lipídicas catiónicas da lipofectamina são formuladas com um co-lípido neutro (lípido auxiliar). Os lipossomas contendo DNA (carregados positivamente em sua superfície) podem se fundir com a membrana plasmática de células vivas carregadas negativamente, devido à fusão mediadora do co-lipídio neutro do lipossoma com a membrana celular, permitindo que as moléculas de carga de ácido nucléico cruzem para o citoplasma para replicação ou expressão.

Para que uma célula possa expressar um transgene, o ácido nucléico deve alcançar o núcleo da célula para iniciar a transcrição. Entretanto, o material genético transfectado pode nunca alcançar o núcleo em primeiro lugar, em vez disso, ser interrompido em algum lugar ao longo do processo de parto. Ao dividir as células, o material pode alcançar o núcleo ao ficar preso no envelope nuclear de remontagem após a mitose. Mas também em células não divididas, a pesquisa mostrou que a Lipofectamina melhora a eficiência da transfecção, o que sugere que ela adicionalmente ajuda o material genético transfectado a penetrar no envelope nuclear intacto.

Este método de transfecção foi inventado pelo Dr. Yongliang Chu.

Deixe uma resposta

O seu endereço de email não será publicado.