Lipofectamine

dec 14, 2021
admin

A Lipofectamine vagy Lipofectamine 2000 az Invitrogen által gyártott és forgalmazott, a molekuláris és sejtbiológiában használt általános transzfekciós reagens. Az RNS (beleértve az mRNS-t és az siRNS-t) vagy plazmid DNS in vitro sejtkultúrákba történő transzfekciós hatékonyságának növelésére használják lipofekcióval. A lipofectamin olyan lipid alegységeket tartalmaz, amelyek vizes környezetben liposzómákat képesek képezni, amelyek a transzfekciós hasznos terhet, pl. DNS-plazmidokat, magukba zárják.

A lipofektamin DOSPA (2,3-dioleoiloxi-N- -N,N-dimetil-1-propaniminium-trifluoracetát) és DOPE (1,2-dioleoil-sn-glicero-3-foszfoetanolamin) 3:1 arányú keverékéből áll, amely komplexet képez negatív töltésű nukleinsavmolekulákkal, hogy azok legyőzhessék a sejtmembrán elektrosztatikus taszítását. A Lipofectamine kationos lipidmolekulái egy semleges társlipiddel (segédlipid) vannak formulázva. A DNS-t tartalmazó liposzómák (felszínükön pozitív töltésűek) képesek összeolvadni az élő sejtek negatív töltésű plazmamembránjával, mivel a semleges ko-lipid közvetíti a liposzóma és a sejtmembrán összeolvadását, így a nukleinsav-rakomány molekulák átjuthatnak a citoplazmába replikáció vagy expresszió céljából.

Hogy egy sejt transzgént tudjon kifejezni, a nukleinsavnak el kell jutnia a sejtmagba, hogy megkezdődjön az átírás. Előfordulhat azonban, hogy a transzfektált genetikai anyag eleve nem jut el a sejtmagba, ehelyett valahol a szállítási folyamat során megszakad. Osztódó sejtekben az anyag úgy juthat el a sejtmagba, hogy a mitózist követően az újra összeálló magburokban reked. De nem osztódó sejtekben is kimutatták a kutatások, hogy a Lipofectamin javítja a transzfekció hatékonyságát, ami arra utal, hogy a transzfektált genetikai anyag ezen felül segít áthatolni az ép magburkon.

A transzfekciónak ezt a módszerét Dr. Yongliang Chu találta fel.

A transzfekciót Dr. Yongliang Chu találta fel.

Vélemény, hozzászólás?

Az e-mail-címet nem tesszük közzé.