Kémiai Tanszék
Veszélyek
A nindrin oldat reakcióba lép a bőr fehérjéivel. Viseljen kesztyűt, különben lila lesz a keze.
Kémiai anyagok és oldatok
- Ninhidrinoldat (0.25% vízben)
- Methionin
- Hidroxiprolin
Műszerek
- Két 100 ml-es palack
- Két kevertető rúd
- Két mágneses keverő
- Két spatula
Eljárás
- Töltsük a két palackot félig tele ninhidrinoldattal.
- Tegyünk mindkét hengerhez egy-egy keverőpálcát, és kezdjük el keverni az oldatokat a mágneses keverőkön.
- Az egyik hengerhez adjunk metionint, a másikhoz pedig hidroxiprolint. Hagyjuk az oldatokat kb. 5-10 percig keverni.
- Kb. 5 perc múlva a hidroxiprolint tartalmazó hengerben aranyszínű oldat képződik.
- Néhány perccel később a metionint tartalmazó hengerben lila színű oldat képződik. (Husky Colors).
Diszkusszió
A ninhidrin az indán-1,2,3-trion hidrátja. A prolin és a hidroxi-prolin kivételével a fehérjékben található összes alfa-aminosav reakcióba lép a ninhidrinnel, és ugyanazt az intenzív lila színű aniont adja (570 nm). A lila anion két ninhidrinmolekulából áll, amelyek mindegyikéből hiányzik a hidroxi-csoportjuk, és amelyek egy központi nitrogénnel kapcsolódnak egymáshoz. A nitrogén az egyetlen olyan része a lila anionnak, amely az aminosavból származik.
A prolin és a hidroxi-prolin nem reagál a ninhidrinnel ugyanúgy, mint a többi aminosav, mivel az alfa-aminocsoportjuk egy öttagú gyűrű része.