Lipofectamine
Lipofectamine eller Lipofectamine 2000 är ett vanligt transfektionsreagens som tillverkas och säljs av Invitrogen och används inom molekylär- och cellbiologi. Det används för att öka transfektionseffektiviteten av RNA (inklusive mRNA och siRNA) eller plasmid-DNA i in vitro cellkulturer genom lipoinfektion. Lipofectamin innehåller lipidunderenheter som kan bilda liposomer i en vattenhaltig miljö, vilka fångar in transfektionslasten, t.ex. DNA-plasmider.
Lipofectamine består av en 3:1-blandning av DOSPA (2,3-dioleoyloxy-N- -N,N-dimetyl-1-propaniminium trifluoroacetat) och DOPE (1,2-Dioleoyl-sn-glycero-3-phosphoetanolamin), som bildar komplex med negativt laddade nukleinsyramolekyler så att de kan övervinna cellmembranets elektrostatiska repulsion. Lipofectaminets katjoniska lipidmolekyler är formulerade med en neutral co-lipid (hjälplipid). De DNA-innehållande liposomerna (positivt laddade på ytan) kan fusionera med det negativt laddade plasmamembranet hos levande celler, tack vare den neutrala co-lipiden som förmedlar fusionen av liposomen med cellmembranet, vilket gör det möjligt för nukleinsyramolekylerna att passera in i cytoplasman för replikation eller uttryck.
För att en cell ska uttrycka en transgen måste nukleinsyran nå cellens kärna för att påbörja transkriptionen. Det kan dock hända att det transfekterade genetiska materialet aldrig når kärnan från början, utan istället störs någonstans under leveransprocessen. I delande celler kan materialet nå kärnan genom att fastna i det återskapade kärnhöljet efter mitos. Men även i icke-delande celler har forskning visat att Lipofectamine förbättrar transfektionens effektivitet, vilket tyder på att det dessutom hjälper det transfekterade genetiska materialet att tränga igenom det intakta kärnhöljet.
Denna transfektionsmetod uppfanns av Dr. Yongliang Chu.