Densitetsgradientmedier och centrifugering för cellisolering
Densitetsgradientcentrifugering används vanligen för att isolera specifika cellpopulationer från helblod. Denna teknik utnyttjar skillnaderna i densitet mellan de olika leukocyterna och densitetsgradientmediet. Som ett resultat av detta kommer de särskilda cellpopulationer som isoleras att bero på densiteten hos det medium som används.
För att isolera mononukleära celler (MNC) från perifert blod, navelsträngsblod och benmärg rekommenderas att använda medier med en densitet på 1,077 g/mL, till exempel Lymphoprep™ eller Ficoll-Paque™. För denna särskilda tillämpning skiktas utspätt blod ovanpå densitetsgradientmediet och proverna centrifugeras. Granulocyter och erytrocyter har en högre densitet än mononukleära celler och under centrifugeringen sedimenterar de genom skiktet med densitetsgradientmedium. De mindre täta mononukleära cellerna stannar kvar vid gränssnittet mellan plasma och densitetsmedium. Denna process underlättas avsevärt om man utför densitetsgradientcentrifugeringen i ett SepMate™-rör. För mer information om hur man utför denna teknik, se denna video om hur man isolerar MNC från helblod med hjälp av densitetsgradientcentrifugering.