În calitate de specialiști în domeniul colectării de probe de salivă, înțelegem că a avea probe de ADN din salivă care sunt optimizate pentru a asigura cele mai bune rezultate posibile este crucial pentru studiul dvs. de cercetare.

Dobținerea unui randament ridicat și de înaltă calitate a ADN din salivă permite clienților noștri să efectueze mai multe studii și să genereze mai multe date, accelerându-și astfel cercetările. În plus, faptul de a avea opțiuni de colectare neinvazive, cum ar fi Oragene, oferă cercetătorilor și participanților o metodă de colectare care chiar le place.

Ne-am gândit că ar fi util să evidențiem sfaturi și trucuri dovedite pentru optimizarea probelor dumneavoastră. Știm de ce este nevoie pentru a obține rezultate excelente din probele de salivă și avem ani de experiență care să susțină acest lucru.

Am compilat cele mai importante 10 modalități de optimizare a probelor de salivă ADN care pot contribui la succesul dumneavoastră. În timp ce citiți, întrebați-vă dacă vreunul dintre aceste sfaturi ar putea fi util în laboratorul dumneavoastră. Și dacă aveți sfaturi suplimentare de împărtășit, anunțați-ne pe Twitter, Linkedin sau pe pagina noastră de Facebook.

Optimizarea bazată pe colectare

1. Este important să urmați îndeaproape instrucțiunile de colectare. Asigurați-vă că subiecții livrează cantitatea necesară de salivă și că nu mănâncă/băut/fumează/mestecă gumă de mestecat timp de 30 de minute înainte de a oferi un eșantion. Nerespectarea acestor recomandări poate duce la o producție redusă de ADN.
2. Când scuipați, bulele nu contează. Asigurați-vă că saliva lichidă se află la linia „Fill To”; orice bule prezente trebuie să fie deasupra liniei. Acest lucru va asigura că se colectează cantitatea optimă de salivă. Dacă colectați mai puțină salivă, calitatea nu este afectată, dar randamentul ADN-ului va fi redus proporțional.
3. Randamentul ADN-ului va varia de la un donator la altul. Este important să testați probe de la diferiți donatori pentru a obține o imagine exactă a randamentelor la care vă puteți aștepta.
4. Pentru donatorii care au probleme în a scuipa 2 ml, fluxul de salivă poate fi adesea stimulat prin frecarea obrajilor, chiar în spatele dinților din spate. De asemenea, puteți stimula producția de salivă folosind un vârf de cuțit de zahăr pe limbă. Aveți nevoie doar de o cantitate mică; doar atât cât persoana să o poată gusta. O picătură de suc de lămâie funcționează, de asemenea.
5. Uneori poate fi dificil de colectat de la o persoană care nu poate scuipa la comandă, cum ar fi un copil mai mic. Utilizarea unui kit de recoltare conceput pentru cei care nu scuipă, cum ar fi Oragene assisted collection (OG-675) sau ORAcollect pentru pediatrie (OC-175), va ușura recoltarea de probe atât pentru dvs. cât și pentru donator și vă va asigura că veți colecta suficient ADN.

Optimizare bazată pe procesare

1. Etapa de incubare la 50°C trebuie efectuată în tubul de probă original, înainte de a preleva o parte aliquotă pentru extracția ADN. Incubarea trebuie efectuată o singură dată; nu trebuie să repetați această etapă atunci când extrageți ADN din alicote ulterioare.
2. Dacă nu se iau măsuri specifice pentru a elimina ARN-ul, ARN-ul se va copurifica împreună cu ADN-ul. Vă recomandăm să vă cuantificați ADN-ul prin fluorescență (de exemplu, Picogreen), deoarece absorbția UV poate supraestima cantitatea de ADN.
3. Dacă aplicația dvs. din aval necesită concentrații mari de ADN, puteți crește concentrația prin reducerea cantității de tampon utilizat pentru dizolvarea peletului de ADN de la 100 µL la 50 µL. Este întotdeauna mai ușor să diluați ADN-ul mai târziu decât să fiți nevoiți să îl concentrați.
4. Eșantioanele de oragene/salivă sunt stabile la temperatura camerei timp de ani de zile. Dacă nu le puteți extrage imediat, nu este nevoie să le refrigerați sau să le congelați; lăsați-le pur și simplu pe bancă.
5. Asigurați-vă că aveți suficient timp pentru ca ADN-ul să se dizolve după extracție. ADN-ul extras din probele de oragină/salivă prin metoda prepIT-L2P are o greutate moleculară extrem de mare și, prin urmare, va avea nevoie de timp pentru a se dizolva complet. După extracție, vă recomandăm să lăsați proba la temperatura camerei peste noapte pentru a permite ADN-ului să se dizolve complet. Faptul că ADN-ul nu se dizolvă complet poate afecta acuratețea cuantificării.

Acestea sunt cele mai importante 10 modalități de a optimiza probele de ADN. Aveți ceva de adăugat la această listă? Vă rugăm să lăsați un comentariu și să ne anunțați.

Click pe butonul de solicitare a kiturilor de mai jos dacă sunteți interesat să solicitați kituri gratuite de încercare Oragene, sau ne puteți trimite un e-mail la [email protected].

Bloguri conexe:

Cum să executați colectarea de probe de ADN pe scară largă pentru cercetare genetică – 10 considerații esențiale

8 fapte pe care majoritatea oamenilor nu le știu despre ADN din salivă