En tant que spécialistes dans le domaine de la collecte d’échantillons de salive, nous comprenons que le fait de disposer d’échantillons d’ADN de salive optimisés pour garantir les meilleurs résultats possibles est crucial pour votre étude de recherche.

Le rendement élevé et la haute qualité de l’ADN de salive permettent à nos clients de réaliser plus d’études et de générer plus de données, accélérant ainsi leurs recherches. De plus, le fait de disposer d’options de prélèvement non invasives telles qu’Oragene offre aux chercheurs et aux participants une méthode de prélèvement qu’ils apprécient réellement.

Nous avons pensé qu’il serait utile de mettre en avant des conseils et des astuces éprouvés pour optimiser vos échantillons. Nous savons ce qu’il faut pour obtenir d’excellents résultats à partir d’échantillons de salive et nous avons des années d’expérience pour le prouver.

Nous avons compilé nos 10 principales façons d’optimiser les échantillons de salive ADN qui peuvent contribuer à votre succès. Pendant que vous lisez, demandez-vous si l’un de ces conseils pourrait être utile dans votre laboratoire. Et si vous avez d’autres astuces à partager, faites-le nous savoir sur Twitter, Linkedin ou sur notre page Facebook.

Optimisation basée sur la collecte

1. Il est important de suivre de près les instructions de collecte. Assurez-vous que les sujets délivrent la quantité de salive requise et qu’ils ne mangent pas/ne boivent pas/fument/ne mâchent pas de chewing-gum pendant 30 minutes avant de donner un échantillon. Le non-respect de ces recommandations peut entraîner une réduction du rendement en ADN.
2. Lorsque vous crachez, les bulles ne comptent pas. Assurez-vous que la salive liquide se trouve à la ligne  » Remplir jusqu’à  » ; les bulles présentes doivent être au-dessus de la ligne. Cela vous permettra de recueillir la quantité optimale de salive. Si vous prélevez moins de salive, la qualité n’est pas affectée mais le rendement en ADN sera réduit proportionnellement.
3. Les rendements en ADN varient selon les donneurs. Il est important de tester les échantillons de différents donneurs pour avoir une idée précise des rendements auxquels vous pouvez vous attendre.
4. Pour les donneurs qui ont des difficultés à cracher 2 ml, le flux de salive peut souvent être stimulé en frottant les joues, juste derrière les dents du fond. Vous pouvez également stimuler la production de salive en utilisant une pincée de sucre sur la langue. Il suffit d’une toute petite quantité, juste assez pour que la personne puisse la goûter. Une goutte de jus de citron fonctionne également.
5. Il peut parfois être difficile de prélever sur une personne incapable de cracher sur commande, comme un jeune enfant. L’utilisation d’un kit de prélèvement conçu pour les personnes ne crachant pas, comme le prélèvement assisté Oragene (OG-675) ou ORAcollect pour la pédiatrie (OC-175), facilitera le prélèvement des échantillons pour vous et le donneur et vous assurera de recueillir suffisamment d’ADN.

Optimisation basée sur le traitement

1. L’étape d’incubation à 50°C doit être effectuée dans le tube d’échantillon original, avant de prélever une aliquote pour l’extraction d’ADN. L’incubation ne doit être effectuée qu’une seule fois ; vous n’avez pas besoin de répéter cette étape lors de l’extraction de l’ADN des aliquotes ultérieures.
2. Sans que des mesures spécifiques soient prises pour éliminer l’ARN, l’ARN se copurifie avec l’ADN. Nous recommandons de quantifier votre ADN par fluorescence (par exemple Picogreen) car l’absorbance UV peut surestimer la quantité d’ADN.
3. Si votre application en aval nécessite des concentrations élevées d’ADN, vous pouvez augmenter la concentration en réduisant la quantité de tampon utilisée pour dissoudre le culot d’ADN de 100 µL à 50 µL. Il est toujours plus facile de diluer l’ADN plus tard plutôt que de devoir le concentrer.
4. Les échantillons d’orga/de salive sont stables à température ambiante pendant des années. Si vous ne pouvez pas les extraire tout de suite, il n’est pas nécessaire de les réfrigérer ou de les congeler ; laissez-les simplement sur la paillasse.
5. Assurez un temps suffisant pour que l’ADN se dissolve après l’extraction. L’ADN extrait des échantillons d’Oragène/salive à l’aide de la méthode prepIT-L2P a un poids moléculaire extrêmement élevé et, par conséquent, prendra du temps pour se dissoudre complètement. Après l’extraction, nous recommandons de laisser l’échantillon à température ambiante pendant une nuit pour permettre à l’ADN de se dissoudre complètement. Le fait de ne pas dissoudre complètement l’ADN peut affecter la précision de la quantification.

Voilà nos 10 principales façons d’optimiser les échantillons d’ADN. Avez-vous quelque chose à ajouter à cette liste ? Veuillez laisser un commentaire et nous le faire savoir.

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