Kvalita RNA získané z biologických vzorků nebo reakčních směsí má zásadní význam pro úspěch následných aplikací, včetně kvantitativní PCR v reálném čase, PCR s reverzní transkripcí, mikroarrays, Northern blot analýzy, testů ochrany proti nukleázám, mapování RNA, translace in vitro, konstrukce knihoven cDNA atd.

Proto je nezbytné, aby metody extrakce, čištění nebo izolace RNA z různých typů buněk a tkání poskytovaly RNA s dostatečnou výtěžností a strukturní integritou. S ohledem na tuto skutečnost vyvinuli vědci ze společnosti Zymo Research řadu souprav pro extrakci, purifikaci a izolaci RNA určených pro účinné získávání vysoce kvalitní RNA z různých zdrojů.

Čištění RNA &Koncentrace

Čištění RNA z různých typů buněk a tkání bylo v minulosti obtížné, nicméně vysoce kvalitní RNA je nezbytná pro úspěch navazujících aplikací, jako jsou mikročipy, transfekce RNA, denaturační gelová elektroforéza, Northern blotting a RT-PCR. Společnost Zymo Research Corporation použila svou nejmodernější technologii kolony „Fast-Spin“ k výrobě soupravy RNA Clean & Concentrator. Tato souprava obnovuje vysoce koncentrovanou RNA a zároveň zajišťuje strukturální integritu produktu.

Purifikace celkové RNA

Zymo Research nabízí sortiment produktů, které umožňují jednoduchou, rychlou a účinnou izolaci celkové RNA z různých biologických zdrojů včetně čerstvých, zmrazených nebo do parafínu vložených tkání, kultivovaných buněk, bukálních buněk, plné krve, plazmy, séra, moči, kvasinek nebo RNA virů. Stejně jako naše soupravy pro čištění RNA jsou všechny soupravy pro izolaci RNA vybaveny technologií kolony Fast-Spin pro vysoce koncentrovanou RNA, která je vhodná pro aplikace, jako jsou mikroarraye, denaturační gelová elektroforéza, Northern blotting a RT-PCR. Soupravy Quick-RNA jsou univerzálním řešením pro purifikaci celkové RNA a jsou k dispozici ve formátech Micro-, Mini-, Midi- a 96 jamek. Soupravy ZR RNA MicroPrep™ a ZR RNA MiniPrep™ navíc umožňují izolovat RNA o velikosti pouhých 17 nt. Každá souprava byla optimalizována pro konkrétní aplikaci pomocí specializovaných komponent bez nukleáz, které zajišťují: 1) maximální úroveň solubilizace membrán a narušení buněk, 2) úplnou inhibici nukleázové aktivity, 3) úplnou deproteinizaci vzorku, 4) účinnou izolaci a koncentraci RNA, 5) stabilizaci a bezpečné skladování RNA.

Marker molekulové hmotnosti RNA

Agarosová a polyakrylamidová gelová elektroforéza jsou dvě běžné techniky pro stanovení velikosti, čistoty a sekvenční identity (např, Northernův a Southernův blotting) nukleových kyselin. Nukleové kyseliny lze v gelech vizualizovat pomocí fluorescenčních barviv (např. ethidium bromidu) nebo barvením stříbrem. K identifikaci neznámých nukleových kyselin při gelových postupech jsou nezbytné markery velikosti RNA (nebo žebříčky). Žebříček ZR small-RNA™ Ladder je ideální pro identifikaci malých RNA (tj. siRNA a miRNA) o velikosti 17 – 29 bází.

.