Hazards

Roztok ninhydrinu reaguje s bílkovinami kůže. Používejte rukavice, jinak budete mít fialové ruce.

Chemické látky a roztoky

• Roztok ninhydrinu (0.25% ve vodě)
• Methionin
• Hydroxyprolin

Materiály

• Dvě 100 ml lahve
• Dvě míchadla. tyče
• Dvě magnetická míchadla
• Dvě špachtle

Postup

1. Dva válce naplňte do poloviny roztokem ninhydrinu.
2. Přidejte do každého válce míchadlo a začněte roztoky míchat na magnetických míchadlech.
3. Do jednoho válce přidejte methionin a do druhého hydroxyprolin. Roztoky nechte míchat asi 5 až 10 minut.
4. Přibližně po 5 minutách se ve válci obsahujícím hydroxyprolin vytvoří zlatě zbarvený roztok.
5. O několik minut později se ve válci obsahujícím methionin vytvoří fialově zbarvený roztok. (Husky Colors).

Diskuse

Ninhydrin je hydrát indan-1,2,3-trionu. S výjimkou prolinu a hydroxy-prolinu reagují všechny alfa-aminokyseliny obsažené v bílkovinách s ninhydrinem za vzniku stejně intenzivně zbarveného fialového aniontu (570 nm). Fialový aniont se skládá ze dvou molekul ninhydrinu, z nichž každá je bez hydroxyskupiny a jsou spojeny centrálním dusíkem. Dusík je jedinou částí fialového aniontu, která pochází z aminokyseliny.

Prolin a hydroxy-prolin nereagují s ninhydrinem stejným způsobem jako ostatní aminokyseliny, protože jejich alfa aminoskupina je součástí pětičlenného kruhu.

.