Spektroskopi är studiet av interaktionen mellan materia och utstrålad energi (elektromagnetiska vågor). Detta kan tolkas som vetenskapen om att studera växelverkan mellan materia och strålning. För att förstå spektroskopi måste man först förstå det elektromagnetiska spektrumet som sträcker sig från mikrovågor, radiovågor, infraröda och ultravioletta strålar, röntgenstrålar och gammastrålar . Energin i dessa vågor är beroende av vågens våglängd eller frekvens. Vågor med hög frekvens har hög energi och vågor med låg frekvens har låg energi.

Om man tittar på NIST:s definition av spektrofotometri står det att
:
” Spektrofotometri är den kvantitativa mätningen av reflektions- eller transmissionsegenskaperna hos ett material som en funktion av våglängden. Även om konceptet är relativt enkelt, innebär bestämning av reflektans eller transmittans en noggrann bedömning av de geometriska och spektrala förutsättningarna för mätningen.”

En spektrofotometer består av två instrument, nämligen en spektrometer för att producera ljus av valfri färg (våglängd) och en fotometer för att mäta ljusets intensitet. Instrumenten är anordnade så att vätska i en kuvett kan placeras mellan spektrometerstrålen och fotometern. Mängden ljus som passerar genom röret mäts av fotometern. Fotometern levererar en spänningssignal till en visningsanordning, normalt en galvanometer. Signalen förändras när mängden ljus som absorberas av vätskan förändras.