Lipofectamina
Lipofectamina sau Lipofectamina 2000 este un reactiv comun de transfecție, produs și vândut de Invitrogen, utilizat în biologia moleculară și celulară. Se utilizează pentru a crește eficiența transfecției ARN (inclusiv ARNm și ARNsi) sau ADN plasmidic în culturile celulare in vitro prin lipofecție. Lipofectamina conține subunități lipidice care pot forma lipozomi într-un mediu apos, care captează încărcătura utilă de transfecție, de exemplu, plasmide ADN.
Lipofectamina constă dintr-un amestec 3:1 de DOSPA (2,3-dioleoyloxy-N- -N,N-dimetil-1-propaniminium trifluoroacetat) și DOPE (1,2-Dioleoyl-sn-glycero-3-fosfoetanolamină), care se complexează cu moleculele de acid nucleic încărcate negativ pentru a le permite să depășească repulsia electrostatică a membranei celulare. Moleculele lipidice cationice ale Lipofectaminei sunt formulate cu un co-lipid neutru (lipid ajutător). Lipozomii care conțin ADN (încărcați pozitiv pe suprafața lor) pot fuziona cu membrana plasmatică încărcată negativ a celulelor vii, datorită co-lipidului neutru care mediază fuziunea lipozomului cu membrana celulară, permițând moleculelor de sarcină de acid nucleic să treacă în citoplasmă pentru replicare sau exprimare.
Pentru ca o celulă să exprime o transgenă, acidul nucleic trebuie să ajungă în nucleul celulei pentru a începe transcrierea. Cu toate acestea, este posibil ca materialul genetic transfectat să nu ajungă niciodată la nucleu în primul rând, fiind în schimb perturbat undeva de-a lungul procesului de livrare. În cazul celulelor care se divid, materialul poate ajunge la nucleu fiind prins în învelișul nuclear care se reasamblează în urma mitozei. Dar, de asemenea, în celulele care nu se divid, cercetările au arătat că Lipofectamina îmbunătățește eficiența transfecției, ceea ce sugerează că aceasta ajută în plus materialul genetic transfectat să pătrundă în învelișul nuclear intact.
Această metodă de transfecție a fost inventată de Dr. Yongliang Chu.
.