Abstract

În mod tragic, infecțiile tractului genital sunt încă o problemă majoră de sănătate publică în multe regiuni. Acest studiu a fost întreprins pentru a determina prevalența infecției cervicale cu virusul Herpes simplex (HSV), Chlamydia trachomatis (CT) și Neisseria gonorrhoeae (NG) în rândul femeilor căsătorite care se adresează Spitalului Iranian, Dubai, EAU. Într-un studiu transversal retrospectiv, au fost înrolate 201 paciente cu vârste cuprinse între 16 și 80 de ani care s-au adresat Departamentului de Obstetrică și Ginecologie al Spitalului Iranian, Dubai, EAU, în 2010. Pacientele au fost clasificate în trei grupe de vârstă: 15-30 de ani (grupa I), 31-40 de ani (grupa II) și 41 de ani (grupa III). De la fiecare femeie a fost colectată o probă de tampon cervical și prevalența infecției cervicale cu HSV, CT și NG a fost determinată prin metoda PCR. HSV, CT și NG au fost detectate în 6,5%, 10,4% și, respectiv, 5,5% din probele de tampoane. În ceea ce privește vârsta, s-a observat o diferență semnificativă pentru prevalența NG și HSV între grupurile I și III. Datorită importanței pentru sănătatea publică a bolilor cu transmitere sexuală (BTS), a impactului lor de lungă durată asupra calității vieții și a poverii lor economice, măsurile de prevenire și de educare a femeilor par a fi necesare.

1. Introducere

În mod tragic, infecțiile tractului genital sunt încă o problemă majoră de sănătate publică în multe regiuni . Anual, în Statele Unite, au fost raportate mai mult de 15 milioane de cazuri noi de boli cu transmitere sexuală (BTS) . În rândul femeilor, unele dintre acestea pot duce la boli inflamatorii pelviene pe termen lung, infertilitate, sarcini ectopice, dispareunie și cancer de col uterin . În fiecare an, mai mult de jumătate din toate cazurile noi de boli cu transmitere sexuală apar la persoanele tinere cu vârste cuprinse între 15 și 24 de ani . În plus, la femeile tinere și adolescente, acestea pot duce la depresie, sprijin social scăzut și stres proeminent .

Majoritatea bolilor cu transmitere sexuală, cum ar fi virusul Herpes simplex (HSV), Chlamydia trachomatis (CT) și Neisseria gonorrhoeae (NG) s-au dovedit a fi asimptomatice la femei . Herpesul genital este, în general, considerat ca fiind o boală cu transmitere sexuală cronică comună atât în țările dezvoltate, cât și în cele în curs de dezvoltare, cu o morbiditate substanțială . Infecția este cauzată de două tipuri de virus, inclusiv HSV-2 (în principal) și HSV-1 (uneori), în timp ce prevalența și incidența lor au crescut în ultimele trei decenii .

Infecția CT este cea mai frecventă cauză de BTS bacteriană din lume, în special la femeile tinere . Infecția este asimptomatică în majoritatea cazurilor și poate fi transmisă în timpul contactului sexual vaginal, oral sau anal și poate fi transmisă și de la mamă la nou-născut .

Gonoreea este cauzată de NG și s-a demonstrat că acest agent patogen are potențialul de a dezvolta rezistență la agenții antimicrobieni utilizați frecvent, în special la pacienții nevindecați. Aceste cazuri pot continua să se transmită și să faciliteze apariția rapidă a rezistenței antimicrobiene . Rata de incidență a bolii este ridicată; prin urmare, diagnosticarea infecțiilor simptomatice și asimptomatice este de mare importanță .

În ultimii ani, kiturile de detecție rapidă și dipstick-urile au fost utilizate ca metode comune, convenabile și rapide de depistare a bolilor cu transmitere sexuală. Cu toate acestea, noile metode moleculare, cum ar fi PCR, PCR în timp real calitativ și cantitativ și hibridizarea ADN au fost introduse ca tehnici mai fiabile în diagnosticarea unei mari varietăți de BTS în comparație cu metodele serologice. Mai mult, monitorizarea nivelului de ADN al unui agent patogen în fluidele corporale poate dezvălui starea bolii, răspunsul acesteia la medicație și modelele sale de rezistență .

În Dubai, Emiratele Arabe Unite, stilul de viață al indivizilor s-a schimbat. În plus, în acest oraș au fost atrași mulți lucrători migranți sau investitori din peste 100 de țări din Asia, Africa, Europa și așa mai departe. Având în vedere că Dubai este al 8-lea cel mai vizitat oraș din lume de către turiști și s-a demonstrat că a atras peste 15 milioane de turiști din diferite țări până în 2015, prin urmare, bolile cu transmitere sexuală pot fi o problemă de sănătate publică emergentă în Dubai, EAU. Depistarea bolilor cu transmitere sexuală în populația din Dubai poate fi primul pas, foarte important, în gestionarea unei probleme de sănătate publică. Obiectivul acestui studiu a fost de a determina prevalența infecției cervicale cu HSV, CT și NG în rândul femeilor căsătorite care se adresează Spitalului Iranian, Dubai, EAU.

2. Subiecți și metode

2.1. Subiecți și metode

2.1. Populația studiată

Studiul a implicat 201 pacienți de sex feminin cu vârste cuprinse între 16 și 80 de ani ( ani) care s-au adresat Departamentului de Obstetrică și Ginecologie al Spitalului Iranian, Dubai, în 2010, cu simptome precum mâncărime în zona genitală, dispareunie, disurie sau descărcări vaginale anormale. Pacientele erau de naționalități diferite (Tabelul 1) și toate erau căsătorite. Pacienții au fost clasificați în trei grupe de vârstă: 15-30 de ani (grupa I), 31-40 de ani (grupa II) și ≥41 de ani (grupa III). O probă de tampon cervical a fost colectată prin tampoane sterile de la toate pacientele și a fost transferată într-un mediu de transport viral la Centrul de cercetare în microbiologie clinică Profesor Alborzi, Spitalul Nemazee, Shiraz, Iran, pentru investigații suplimentare. Studiul a fost aprobat în Biroul de Educație și Cercetare al Spitalului Iranian, Dubai.

2.2. Extracția ADN-ului

ADN-ul a fost extras din probele de tampoane în 200 μL de mediu de transport viral cu ajutorul Invisorb spin virus DNA Mini Kit (Invitek, Berlin, Germania) în conformitate cu protocolul producătorului. Pentru detectarea CT, o cantitate standardizată de ADN de control intern, furnizată împreună cu kitul PCR în timp real, a fost adăugată la kitul de tampon de liză pentru a monitoriza eficiența extracțiilor. Controalele negative și pozitive au fost incluse în procesul de extracție.

2.3. PCR cantitativă în timp real pentru detectarea HSV și CT

PCR cantitativă în timp real a fost efectuată folosind perechi de amorse oligonucleotide și sonde specifice pentru regiunea glicoproteinei B (gB) a HSV1 și HSV2, așa cum s-a raportat anterior . Amorsele utilizate au fost HSVFP (5′TCC CGG TAC GAA GAC CAG3′) și HSVRP (5′AGC AGG CCG CTG CTG TCC TTG3′), iar sonda a fost HSVTCP (5′FAMTGG TCC TCC TCC AGC ATG GTG ATG TTG/C AGG TCGTAMRA3′). Reacția a fost efectuată cu următorul protocol: 2 minute de incubare la 50°C pentru activarea AmpErase, 10 minute la 95°C pentru activarea polimerazei și pentru 45 de cicluri, 15 secunde la 94°C pentru denaturare și 60 de secunde la 58°C pentru recoacere, extensie și colectarea datelor. Fiecare 50 μL de amestec PCR conținea 10 μL de ADN purificat, o concentrație de 840 nM din fiecare amorsă și 100 nM de sondă în 1x TaqMan universal PCR master mix (Applied Biosystems, Branchburg, New Jersey, SUA).

Pentru detectarea CT, s-a efectuat o PCR cantitativă în timp real cu perechi de amorsă oligonucleotide și sondă specifice pentru genomul CT cu ajutorul Advanced Kit (PrimerDesign Ltd., Millbrook Technology Campus, South Hampton, Regatul Unit). Amplificarea a fost realizată cu ajutorul reactivilor master mix pentru PCR în timp real TaqMan universal (Roche, Branchburg, New Jersey, SUA). S-a realizat cu următorul protocol în patru pași: 2 min de incubare la 50°C pentru activarea AmpErase, 10 min la 95°C pentru activarea polimerazei și pentru 45 de cicluri, 10 secunde la 95°C pentru denaturare și 60 de secunde la 60°C pentru recoacere, extensie și colectarea datelor.

Toate amplificările au fost efectuate într-un aparat Applied Biosystem Sequence Detector 7500 (Applied Biosystems, SUA). Controalele negative au fost incluse în procesul de extracție între fiecare 20 de probe clinice. Toate probele negative au fost testate de două ori.

2.4. Detectarea NG

NG a fost detectată cu un kit de detecție PCR (CinnaGen Inc., Iran) în conformitate cu protocolul producătorului. Amestecul de reacție a fost încălzit la 94°C timp de 3 min și apoi incubat timp de 35 de cicluri de 94°C timp de 45 de secunde, 50°C timp de 20 de secunde și 72°C timp de 30 de secunde și timp de 5 min la 72°C pentru o extensie suplimentară. Produsele PCR au fost analizate pe un gel de agaroză 1%.

2.5. Analiză statistică

Diferențele de prevalență a HSV, CT și NG între grupele de vârstă au fost analizate cu testul chi-pătrat. Mai mult, asocierea dintre HSV, CT și NG și apariția infecției cervicale fungice-bacteriene au fost analizate cu testul chi-pătrat. Toate datele au fost analizate cu ajutorul software-ului SPSS (SPSS pentru Windows, versiunea 16, SPSS Inc., Chicago, IL, SUA). Toate valorile de au fost considerate semnificative din punct de vedere statistic.

3. Rezultate

Infecția cervicală cu Candida spp. și Coccobacilli a fost considerată infecție mico-bacteriană cu o prevalență de 45,3% și infecție non-fungică-bacteriană cu o prevalență de 54,7%. HSV și CT au fost pozitive în 13 (6,5%) și, respectiv, 21 (10,4%) probe de tampon. Numărul de copii de ADN HSV măsurat prin testul PCR în timp real a variat de la 3,11 × 103 la 7,18 × 105 copii/mL în mediul de transport viral (mediana de 4 × 104 copii/mL), iar numărul de copii de ADN CT a variat de la 3,48 × 103 la 7,11 × 106 copii/mL în mediul de transport viral (mediana de 3,33 × 105 copii/mL). NG a fost detectată la 11 (5,5%) pacienți.

Tabelul 2 prezintă prevalența bolilor în diferite grupe de vârstă. Niciunul dintre pacienți nu a avut infecții mixte. Nu au existat diferențe semnificative în ceea ce privește prevalența CT între diferitele grupe de vârstă (). Prevalența NG și HSV nu a fost semnificativ diferită între grupele I și II și II și III (); cu toate acestea, au existat diferențe semnificative între grupele I și III (). Mai mult, diferențele în ceea ce privește prevalența infecțiilor cu HSV, CT și NG nu au fost semnificative din punct de vedere statistic între grupul de infecții cervicale fungice-bacteriene și grupul de infecții non-fungice-bacteriene (). Tabelul 3 compară datele noastre din Dubai, EAU, pentru prevalența HSV, CT și NG cu diferite studii.

4. Discuții

În studiul actual, din 201 femei, 6,5%, 10,4% și 5,5% au fost infectate cu HSV, CT și, respectiv, NG. Constatările noastre actuale privind infecția cu HSV, CT și NG sunt în concordanță cu studiile anterioare privind prevalența bolilor cu transmitere sexuală. Mai recent, un sondaj similar a găsit ADN de HSV-2 la 7% din 509 femei din SUA . Un studiu anterior din Turcia a arătat că 12,7% dintre femeile cu risc scăzut erau infectate cu CT . Gaydos et al. au raportat că 3,8% din populația lor feminină studiată era infectată cu NG .

Literatura anterioară a indicat că majoritatea infecțiilor cu HSV, CT și NG pot fi asimptomatice și cu o durată pe termen lung . În mod similar, în studiul de față, niciuna dintre femei nu a fost conștientă de infecția sa înainte de a se supune screeningului; cu toate acestea, unele simptome clinice erau vizibile. Prevalența bolilor cu transmitere sexuală a fost în mod constant mai mare la populațiile cu risc ridicat în comparație cu cele considerate cu un risc mai scăzut. Factorii de risc frecvent citați ca fiind asociați cu STD includ statutul de necăsătorit și partenerii sexuali multipli . În Amsterdam, Țările de Jos, cea mai mare prevalență a HSV-1 sau HSV-2 a fost observată în cele mai tinere grupe de vârstă, în timp ce adolescenții și adulții în vârstă de 20 de ani au avut o prevalență de 5,26% și, respectiv, 4,31% . În Peru, prevalența infecției la femeile cu infecție CT a fost de 6-5%, iar la cele cu infecție NG a fost de 0-1% . În Coreea de Sud, rata globală de detectare pentru CT a fost de 2,4%, iar pentru HSV tip II a fost de 0,8% . La lucrătoarele sexuale tunisiene, CT, NG și HSV-2 PCR au fost pozitive la 72,9%, 11,2% și, respectiv, 1,1% dintre femei .

Deși studiile anterioare au arătat că vârsta tânără este asociată cu rezultate pozitive pentru CT, există unele studii care nu au raportat nicio corelație între vârstă și prevalența bolii . În mod similar, constatările noastre au arătat că nu a existat nicio diferență semnificativă în ceea ce privește prevalența CT între diferitele grupe de vârstă.

Diverse studii au arătat că prevalența HSV a crescut în mod constant cu vârsta în majoritatea zonelor geografice . Așa cum era de așteptat, rezultatele prezentului studiu au indicat că prevalența HSV a fost semnificativ mai mare în grupul III în comparație cu grupul I. Un studiu similar din Bangladesh a arătat că prevalența anticorpilor HSV-2 a fost scăzută în rândul femeilor căsătorite cu vârsta mai mică de 20 de ani . În consecință, această prevalență a crescut odată cu vârsta, ceea ce ar putea fi legat de durata anilor de activitate sexuală la femei.

În schimb, constatările noastre au demonstrat că prevalența NG a scăzut odată cu vârsta și a existat o diferență semnificativă în ceea ce privește prevalența infecției între grupurile I și III, iar infecția a fost mai frecventă la femeile tinere. Acest rezultat este în contradicție cu un alt studiu . În Nigeria, infecția cu NG a fost mai frecventă la femeile la vârsta de 25 de ani .

Un studiu efectuat în China în rândul lucrătoarelor sexuale a demonstrat că 8% din populațiile studiate erau infectate cu NG, ceea ce era aproape de rata de infecție la femeile tinere. Deși toate femeile din studiul de față erau căsătorite și nu au avut relații sexuale în afara familiei, prevalența bolilor cu transmitere sexuală la aceste paciente a fost ridicată. Cu toate acestea, relația sexuală a partenerului trebuie să fie evaluată. Un studiu anterior realizat în Franța a indicat că, în rândul a 111 parteneri de sex masculin asimptomatici ai cuplurilor infertile, CT a fost detectată prin testele PCR COBAS AMPLICOR și serologice la 6,3 % și, respectiv, 4,5 % dintre pacienți . Prin urmare, se pare că monitorizarea partenerilor sexuali este esențială pentru prevenirea bolilor cu transmitere sexuală.

Infecția cervicală fungic-bacteriană a fost găsită la 45,3% din populația studiată, dar nu au existat diferențe semnificative în ceea ce privește prevalența infecțiilor cu HSV, CT și NG între grupul de infecție cervicală fungic-bacteriană și cel non-fungic-bacterian. S-a demonstrat că pot apărea infecții mixte cu vaginoză bacteriană sau fungică și boli cu transmitere sexuală, cum ar fi HSV, CT, NG și T. vaginalis . Sunt necesare investigații suplimentare pentru a evalua în mod cuprinzător rolul infecției cervicale bacteriene și fungice în patogeneza HSV, CT, NG și a altor boli cu transmitere sexuală. Monitorizarea prevalenței și incidenței STD în rândul populației și în special în rândul tinerilor ar ajuta autoritățile guvernamentale să realizeze și să evalueze strategiile și eforturile de prevenire. Din cauza impactului considerabil și de lungă durată al STD asupra calității vieții și a pierderilor economice cauzate de STD din cauza costurilor medicale ridicate, este nevoie de o evaluare precisă a STD în întreaga lume. Jerman et al. au raportat că 1,1 milioane de cazuri noi de boli cu transmitere sexuală au apărut în rândul pacienților tineri din California în 2005, cu un cost medical direct de 1,1 miliarde USD . În plus, STD simptomatice reprezintă doar vârful aisbergului, majoritatea acestor boli fiind asimptomatice. Prin urmare, programele de depistare a bolilor cu transmitere sexuală sunt importante în toate țările pentru a preveni transmiterea bolii și pentru a ajuta oamenii de știință să planifice noi protocoale de tratament. Din cauza importanței STD pentru sănătatea publică, măsurile de prevenire și educarea femeilor par a fi necesare.

Conflict de interese

Autorii declară că nu există niciun conflict de interese în ceea ce privește publicarea acestei lucrări.

Recunoștințe

Autorii apreciază cooperarea Spitalului Iranian, în special a Departamentelor de Patologie și Obstetrică și Ginecologie.

.