Mutații CEBPA la pacienții cu LMA cu cariotip normal

Nivelurile de expresie BAALC în 67 de cazuri de LMA cu cariotip normal au variat de la 0,004 la 67,2. Douăzeci și trei dintre cei 67 de pacienți (34,3%) au îndeplinit criteriile de expresie BAALC „scăzută”, în timp ce 44 de pacienți (65,7%) au fost clasificați ca fiind cu expresie BAALC „ridicată”. Din nou, am determinat dacă nivelurile ARNm BAALC din sânge și măduva osoasă s-au corelat pentru un anumit pacient. Într-adevăr, Fig. 3B indică o corelație puternică (r = 0,9501) între nivelurile BAALC din sânge și măduva osoasă la cei 29 de pacienți la care atât măduva osoasă, cât și sângele au fost disponibile la momentul diagnosticului. Am evaluat, de asemenea, dacă procentul de blastocite dintr-o anumită probă s-a corelat cu nivelurile de expresie BAALC. Cu toate acestea, nu a fost găsită nicio corelație între procentul de blaste și expresia BAALC (corelație Pearson, r = 0,0907).

În mod interesant, pacienții cu expresie BAALC ridicată nu au fost semnificativ diferiți de pacienții cu expresie BAALC scăzută în ceea ce privește numărul de leucocite la diagnostic și valoarea mediană a LDH la diagnostic (tabelul 1). Cu toate acestea, am observat că subtipurile monoblastice de LMA au avut predominant o expresie scăzută a BAALC (80%; 12 din 15 AML-M4 și M5), așa cum s-a raportat anterior (24). Expresia scăzută a BAALC a fost observată în LMA mieloblastică (M1 și M2) în doar 25,6 % (11 din 43 de pacienți). În schimb, o expresie ridicată a BAALC a fost observată predominant în subtipurile mieloblastice de LMA (32 din 43; 74,4%) și în LMA nediferențiată (M0; 5 din 5). Toate LMA cu subtipurile M6 și M7 (patru pacienți) au avut, de asemenea, o expresie ridicată a BAALC.

În mod interesant, au fost detectate diferențe semnificative în imunofenotip în funcție de diferitele expresii BAALC. Celulele leucemice cu o expresie scăzută a BAALC au avut o expresie semnificativ mai mare a antigenelor CD11b, CD15 și mieloperoxidază. În plus, expresia scăzută a BAALC s-a corelat cu expresia scăzută a CD34 (tabelul 4).

Rata de remisiune completă obținută după chimioterapia de inducție nu a fost diferită la pacienții cu expresie BAALC ridicată față de cei cu expresie scăzută a BAALC (82% față de 91%; P = 0,3008). Cu toate acestea, mediana DFS la pacienții cu expresie BAALC ridicată a fost semnificativ mai scurtă (8,5 versus 21 luni; P = 0,0152). De asemenea, supraviețuirea globală a pacienților cu expresie BAALC ridicată a fost redusă în comparație cu pacienții cu expresie BAALC scăzută (10 versus 21 luni; P = 0,0210). În concluzie, expresia BAALC ridicată în LMA cu cariotip normal pare să fie asociată cu DFS și OS reduse.

În Fig. 4, reprezentările dot blot ale nivelurilor de expresie BAALC sunt reprezentate pentru toți pacienții împreună (coloana din stânga; n = 67), pentru pacienții cu FLT3-ITD numai (a doua coloană; n = 19), pentru pacienții cu mutații CEBPA numai (coloana din mijloc; n = 12), pentru pacienții care nu au nici FLT3-ITD, nici mutații CEBPA (a patra coloană; n = 36) și, în final, pentru grupul de control format din 12 voluntari sănătoși. Am constatat că pacienții cu FLT3-ITD au avut o gamă largă de expresie BAALC. Deoarece pacienții cu expresie BAALC ridicată și scăzută cu FLT3-ITD nu au prezentat diferențe în ceea ce privește evoluția lor (datele nu sunt prezentate), concluzionăm că prezența FLT3-ITD prevalează asupra semnificației expresiei BAALC. Este interesant faptul că pacienții cu mutații CEBPA au fost observați cu precădere în grupul cu expresie BAALC „ridicată”. Doar trei dintre cei 12 pacienți cu mutații CEBPA au recidivat. În mod remarcabil, acești trei pacienți au prezentat cea mai mare expresie BAALC din grupul de 12 pacienți cu LMA cu cariotip normal și mutații CEBPA.

Am analizat, de asemenea, în cadrul grupului cu expresie BAALC ridicată, dacă DFS sau OS la pacienții cu expresie foarte ridicată (top 50%) a fost mai scurtă decât la pacienții cu expresie „doar” ridicată (50% mai mică). Cu toate acestea, pacienții cu expresie BAALC foarte ridicată nu au fost diferiți în ceea ce privește DFS și OS de pacienții cu expresie BAALC ridicată (P = 0,497 și, respectiv, P = 0,757.). În mod similar, am studiat în cadrul grupului cu expresie BAALC scăzută dacă rezultatul clinic la pacienții cu expresie foarte scăzută a fost mai favorabil decât la pacienții cu expresie „doar” scăzută. Din nou, am observat că pacienții cu o expresie BAALC foarte scăzută nu diferă în ceea ce privește DFS și OS de pacienții cu o expresie BAALC scăzută (P = 0,753 și, respectiv, P = 0,746). Aceste rezultate susțin utilitatea cutoff-ului nostru, indicând faptul că acest cutoff pare într-adevăr să separe grupurile de pacienți cu prognostic favorabil și nefavorabil.

Low BAALC Expression in Normal Karyotype Acute Myeloid Leukemia cu cariotip normal fără mutații CEBPA sau FLT3-ITD este asociată cu un prognostic favorabil. Am emis ipoteza că determinarea expresiei BAALC ar putea fi deosebit de utilă în subgrupul de pacienți cu LMA care nu prezintă nici mutații FLT3-ITD, nici CEBPA (36 din 67). Expresia BAALC mediană a pacienților din acest subgrup a fost de aproximativ 10 ori mai mare decât valoarea din grupul nostru de control. Optsprezece dintre acești 36 de pacienți (50%) au avut o expresie BAALC scăzută, iar 18 au avut o expresie BAALC ridicată.

Cel mai interesant, evoluția clinică a acestor două subgrupuri a fost dramatic diferită atât pentru DFS (18,4 și, respectiv, 7,4 luni; P = 0,0001), cât și pentru OS (22,8 și 9.1 luni, respectiv; P = 0,0001), așa cum este descris în Fig. 5A și B. Astfel, concluzionăm că expresia BAALC adaugă informații prognostice semnificative, în special la acei pacienți cu LMA cu un cariotip normal, unde până în prezent lipsesc alți markeri, cum ar fi mutațiile FLT3-ITD sau CEBPA.

În cele din urmă, am făcut o analiză multivariabilă pentru a investiga dacă mutațiile CEBPA, FLT3-ITD și expresia BAALC reprezintă markeri prognostici independenți în LMA cu cariotip normal. Rezultatele acestei analize sunt rezumate în tabelul 6, indicând faptul că mutațiile CEBPA, FLT3-ITD și expresia BAALC par a fi predictori independenți puternici de rezultat în LMA cu cariotip normal.