Calitatea ARN-ului obținut din eșantioane biologice sau din amestecuri de reacție este de o importanță critică pentru succesul aplicațiilor din aval, inclusiv PCR cantitativă în timp real, PCR cu transcriere inversă, microarrays, analiză Northern blot, teste de protecție a nucleazei, cartografiere ARN, traducere in vitro, construcție de biblioteci ADNc, etc.

De aceea, este esențial ca metodele de extragere, purificare sau izolare a ARN-ului din diferite tipuri de celule și țesuturi să producă ARN cu un randament și o integritate structurală suficiente. Ținând cont de acest lucru, oamenii de știință de la Zymo Research au dezvoltat o gamă de kituri de extracție, purificare și izolare a ARN-ului, concepute pentru recuperarea eficientă a ARN-ului de înaltă calitate dintr-o diversitate de surse.

Curățarea ARN-ului & Concentrare

Purificarea ARN-ului din diferite tipuri de celule și țesuturi a fost dificilă în trecut, cu toate acestea, ARN-ul de înaltă calitate este esențial pentru succesul aplicațiilor din aval, cum ar fi microarrays, transfecția ARN-ului, electroforeza în gel denaturat, Northern blotting și RT-PCR. Zymo Research Corporation a folosit tehnologia de ultimă generație a coloanei „Fast-Spin” pentru a produce kitul RNA Clean & Concentrator. Acest kit recuperează un ARN foarte concentrat, asigurând în același timp integritatea structurală a produsului.

Purificare ARN total

Zymo Research oferă un sortiment de produse care permit izolarea simplă, rapidă și eficientă a ARN total dintr-o varietate de surse biologice, inclusiv țesuturi proaspete, congelate sau încorporate în parafină, celule cultivate, celule bucale, sânge integral, plasmă, ser, urină, drojdie sau virusuri ARN. La fel ca și kiturile noastre de curățare a ARN-ului, toate kiturile de izolare a ARN-ului dispun de tehnologia coloanei Fast-Spin pentru un ARN foarte concentrat care este foarte potrivit pentru aplicații precum microarrays, electroforeza în gel denaturat, Northern blotting și RT-PCR. Soluția versatilă pentru purificarea ARN total, kiturile Quick-RNA sunt disponibile în format Micro-, Mini-, Midi- și 96 de godeuri. În plus, kiturile ZR RNA MicroPrep™ și ZR RNA MiniPrep™ sunt capabile să izoleze specii de ARN cu dimensiuni de până la 17 nt. Fiecare kit a fost optimizat pentru o anumită aplicație cu componente specializate, fără nucleaze, care asigură: 1) niveluri maxime de solubilizare a membranei și întrerupere celulară, 2) inhibarea totală a activității nucleazelor, 3) deproteinizarea completă a probei, 4) izolarea și concentrarea eficientă a ARN-ului, 5) stabilizarea și stocarea sigură a ARN-ului.

Marker de greutate moleculară a ARN-ului

Electroforeza pe gel de agaroză și poliacrilamidă sunt două tehnici comune pentru determinarea dimensiunii, purității și identității secvenței (de ex, procedurile de Northern și Southern blotting) a acizilor nucleici. Acizii nucleici pot fi vizualizați în geluri cu ajutorul unor coloranți fluorescenți (de exemplu, bromura de etidiu) sau prin colorare cu argint. Markerii de mărime a ARN-ului (sau scări) sunt necesari pentru a ajuta la identificarea acizilor nucleici necunoscuți în procedurile bazate pe gel. Scara ZR small-RNA™ Ladder este ideală pentru identificarea ARN-urilor mici (de exemplu, siARN-uri și miARN-uri) cu dimensiuni cuprinse între 17 și 29 de baze.

.