Faixas de referência

Gaixas de referência para os mesmos métodos ou instrumentos podem diferir entre laboratórios e áreas geográficas pelas seguintes razões:

1. As condições operacionais são diferentes.
2. Critérios para seleção de sujeitos saudáveis são diferentes.
3. Populações doentes são diferentes.
4. As áreas geográficas têm temperaturas, altitudes, pressões barométricas, humidades e fusos horários diferentes.
5. O preparo do subgrupo e a coleta de amostras podem ser diferentes.

Por causa dessas diferenças, intervalos de referência devem ser estabelecidos localmente sempre que um novo teste for introduzido ou um método existente for alterado. NCCLS recomenda testar pelo menos 120 amostras de pacientes para o estabelecimento de um intervalo de referência estatisticamente significativo. Outros especialistas recomendam um mínimo de 200 amostras para garantir limites de referência inferiores e superiores estáveis.

Pode ser necessário subdividir os intervalos de referência em grupos de partição. Por exemplo, as faixas de referência de hemoglobina devem ser estabelecidas por sexo e idade, enquanto as faixas de cortisol devem ser subdivididas pela hora do dia. Cada grupo de partição deve conter 120 amostras.

Factores pré-analíticos também podem precisar de ser controlados para assegurar que as gamas de referência precisas sejam derivadas. Alguns fatores a considerar são: tempo de coleta; consumo de alimentos, água e álcool nas últimas 24 horas; local da punção venosa; tempo do torniquete; e tipo de tubo de coleta. As amostras a serem usadas para a determinação da faixa de referência devem ser coletadas e processadas da mesma forma que o trabalho laboratorial de rotina.

Duas abordagens, paramétricas e não paramétricas, podem ser tomadas ao analisar os dados da faixa de referência. A abordagem paramétrica envolve o cálculo da média e do desvio padrão para determinar a faixa de valores que se enquadram no intervalo de confiança de 95%. Antes que este método possa ser usado, a distribuição da população deve ser examinada para garantir que uma distribuição gaussiana (em forma de sino) esteja presente. Se a distribuição da população for distorcida, as estatísticas paramétricas não são válidas. A distribuição da população pode ser visualizada traçando um histograma de freqüência em uma planilha, como o Excel. Como este exercício é muito demorado, a abordagem não paramétrica é frequentemente escolhida.

A abordagem não paramétrica envolve estabelecer os valores que caem nos percentis 2,5 e 97,5 da população como os limites de referência inferior e superior. O primeiro passo é inserir os valores dos analitos em uma planilha e ordená-los em ordem ascendente de magnitude. O número de valores no conjunto de dados é então multiplicado por 0,025 e 0,975 para obter os percentis dos limites de referência superior e inferior, respectivamente. Por exemplo, se o conjunto de dados consistisse em 120 amostras, os percentis 2,5 e 97,5 seriam calculados multiplicando;

120 x 0,025 = 3

120 x 0,975 = 117

O limite de referência inferior seria o terceiro número do início (topo) da lista ordenada e o limite de referência superior seria o terceiro número do fundo (fim). O limite de referência seria o 95% central dos dados, que se situa entre o 3º e 117º valores.

Outliers podem ter um efeito substancial no cálculo dos intervalos de referência por este método e devem ser removidos. Os outliers são pontos de dados que estão fora da maioria da população. Embora existam programas e fórmulas de computador para identificar os outliers, nenhum é mais eficaz do que o exame visual dos dados. Os outliers são resultados que diferem da média em mais de 3 DP ou diferem de outros resultados em mais de 30%.

Intervalos de referência do consenso

Intervalos de referência para alguns analistas são determinados por consenso de especialistas médicos com base nos resultados dos estudos de resultados clínicos. Por exemplo, a Associação Americana de Diabetes desenvolveu valores de consenso para glicose e hemoglobina A1c. Outros exemplos de intervalos de referência de consenso estão resumidos na tabela a seguir.

Quando intervalos de referência consensuais estão disponíveis, os laboratórios clínicos relatam esses valores ao invés de determinar sua própria faixa de referência.

Verificação de um intervalo de referência

Verificar uma faixa de referência é diferente de estabelecer uma faixa de referência. Para um método de teste aprovado pelo FDA, o laboratório clínico pode adotar a faixa de referência declarada pelo fabricante se sua população de pacientes apresentar resultados semelhantes aos publicados na bula do fabricante.

Um total de 40 amostras, 20 de homens saudáveis e 20 de mulheres saudáveis, devem ser testadas e os resultados devem ser comparados com a faixa de referência publicada. Os resultados devem ser distribuídos uniformemente por toda a faixa de referência publicada e não agrupados em uma extremidade. Se 95% dos resultados estiverem dentro da faixa de referência publicada, podem ser aceitos para uso. Se a gama de referência do fabricante não puder ser validada, o laboratório necessita de estabelecer a sua própria gama de referência.

A verificação da gama de referência também é útil quando é demasiado difícil recolher um grande número de amostras para estabelecer uma nova gama de referência. Nesta situação é permitido determinar se é aplicável a gama de referência declarada pelo fabricante, a sua gama de referência existente, ou uma gama de referência estabelecida por outro laboratório vizinho que utilize o mesmo instrumento e reagentes.