Mutações C/EBPA em pacientes com LMA de cariótipo normal

BAALC níveis de expressão em 67 pacientes com LMA de cariótipo normal variou de 0,004 a 67,2. Vinte e três dos 67 pacientes (34,3%) preencheram os critérios para expressão “baixa” do BAALC, enquanto 44 pacientes (65,7%) foram classificados como expressão “alta” do BAALC. Mais uma vez, determinamos se os níveis de mRNA do BAALC no sangue e na medula óssea estavam correlacionados para um determinado paciente. De fato, a Fig. 3B indica uma forte correlação (r = 0,9501) entre os níveis de BAALC no sangue e na medula óssea nos 29 pacientes em que tanto a medula óssea quanto o sangue estavam disponíveis no momento do diagnóstico. Também avaliamos se a porcentagem de explosões em uma determinada amostra estava correlacionada com os níveis de expressão do BAALC. Entretanto, não foi encontrada correlação entre a porcentagem de explosões e a expressão de BAALC (correlação de Pearson, r = 0,0907).

Interessantemente, pacientes com alta expressão de BAALC não diferiram significativamente dos pacientes com baixa expressão de BAALC em termos de contagem de leucócitos no momento do diagnóstico e o valor mediano de LDH no momento do diagnóstico (Tabela 1). Entretanto, observamos que os subtipos monoblásicos de LMA tinham predominantemente baixa expressão de BAALC (80%; 12 de 15 LMA-M4 e M5) como relatado anteriormente (24). Baixa expressão do BAALC foi observada na LMA mieloblástica (M1 e M2) em apenas 25,6% (11 de 43 pacientes). Em contraste, a expressão elevada do BAALC foi predominantemente observada em subtipos mieloblásticos de LMA (32 de 43; 74,4%) e LMA indiferenciada (M0; 5 de 5). Todos os subtipos de LMA com M6 e M7 (quatro pacientes) também apresentaram expressão elevada de BAALC.

Interessantemente, foram detectadas diferenças significativas no imunofenótipo dependendo das diferentes expressões de BAALC. As células leucêmicas com baixa expressão do BAALC tiveram expressão significativamente mais alta dos antígenos CD11b, CD15 e mieloperoxidase. Além disso, a baixa expressão do BAALC correlacionou-se com a baixa expressão do CD34 (Tabela 4).

A taxa de remissão completa alcançada após a quimioterapia de indução não foi diferente em pacientes com expressão alta versus baixa do BAALC (82% versus 91%; P = 0,3008). Entretanto, a mediana do DFS em pacientes com alta expressão de BAALC foi significativamente menor (8,5 versus 21 meses; P = 0,0152). Além disso, a sobrevida global dos pacientes com alta expressão de BAALC foi diminuída em comparação com os pacientes com baixa expressão de BAALC (10 versus 21 meses; P = 0,0210). Em resumo, a expressão elevada de BAALC no cariótipo normal de LMA parece estar associada à diminuição da DFS e OS.

Na Fig. 4, representações de ponto blot dos níveis de expressão do BAALC são representadas para todos os pacientes juntos (coluna da esquerda; n = 67), para pacientes com FLT3-ITD apenas (segunda coluna; n = 19), para pacientes com mutações CEBPA apenas (coluna do meio; n = 12), para pacientes sem mutações FLT3-ITD nem CEBPA (quarta coluna; n = 36), e finalmente para o grupo controle de 12 voluntários saudáveis. Verificamos que os pacientes com FLT3-ITD tinham uma ampla faixa de expressão do BAALC. Como o alto e baixo BAALC expressando pacientes com FLT3-ITD não diferiram em seu curso (dados não mostrados), concluímos que a presença do FLT3-ITD supera a importância da expressão do BAALC. Curiosamente, os pacientes com mutações do CEBPA foram vistos predominantemente no grupo de expressão “alta” do BAALC. Apenas três em cada 12 pacientes com mutações CEBPA recaíram. Notavelmente, esses três pacientes apresentaram a maior expressão de BAALC entre o grupo de 12 pacientes com mutações CEBPA com o cariótipo normal.

Analisamos também dentro do grupo de alta expressão do BAALC se o DFS ou OS em pacientes com expressão muito alta (50% superior) foi menor do que em pacientes com “apenas” expressão alta (50% inferior). Entretanto, pacientes com expressão muito alta de BAALC não diferiram em sua DFS e SO de pacientes com expressão alta de BAALC (P = 0,497 e P = 0,757, respectivamente.). Da mesma forma, estudamos dentro do grupo de baixa expressão do BAALC se o resultado clínico em pacientes com expressão muito baixa foi mais favorável do que em pacientes com “apenas” baixa expressão. Novamente, observamos que pacientes com expressão muito baixa de BAALC não diferiram em sua DFS e OS de pacientes com baixa expressão de BAALC (P = 0,753 e P = 0,746, respectivamente). Estes resultados suportam a utilidade do nosso corte, indicando que este corte de fato parece separar grupos de pacientes prognósticos favoráveis e desfavoráveis.

Expressão BAALC Baixa em Leucemia Mielóide Aguda do Cariótipo Normal sem mutações CEBPA ou FLT3-ITD está associada a Prognóstico Favorável. Hipotecamos que a determinação da expressão do BAALC pode ser particularmente útil no subconjunto de pacientes com LMA sem mutações FLT3-ITD ou CEBPA (36 de 67). A mediana da expressão do BAALC dos pacientes deste subgrupo foi cerca de 10 vezes maior do que o valor do nosso grupo controle. Dezoito desses 36 pacientes (50%) tinham expressão BAALC baixa, e 18 tinham expressão BAALC alta.

Mais interessantemente, o curso clínico desses dois subgrupos diferiu drasticamente tanto para a EED (18,4 e 7,4 meses, respectivamente; P = 0,0001) quanto para a SO (22,8 e 9.1 mês, respectivamente; P = 0,0001) como descrito na Fig. 5A e B. Assim, concluímos que a expressão BAALC acrescenta informações prognósticas significativas, particularmente naqueles pacientes de LMA com cariótipo normal, onde até agora faltam outros marcadores como FLT3-ITD ou mutações CEBPA.

Ultimamente, fizemos uma análise multivariável para investigar se as mutações CEBPA, FLT3-ITD e a expressão BAALC representam marcadores prognósticos independentes no cariótipo de LMA normal. Os resultados desta análise estão resumidos na Tabela 6 indicando que as mutações CEBPA, FLT3-ITD e a expressão BAALC parecem ser fortes preditores independentes de resultado em LMA de cariótipo normal.