Desde que o RNA tenha surgido do RNAP e haja espaço suficiente para acomodar um ribossomo, a tradução pode começar em procariotas. Na verdade, para genes altamente expressos, não seria incomum ver múltiplas polimerases de RNA transcrevendo o DNA e múltiplos ribossomos em cada uma das transcrições traduzindo o mRNA para proteína! O processo começa com a subunidade pequena do ribossomo (e apenas a subunidade pequena – se estiver ligada à subunidade grande, é incapaz de ligar o mRNA), que se liga ao mRNA frouxamente e começa a digitalizá-lo para uma sequência de reconhecimento chamada sequência Shine-Dalgarno, após os seus descobridores. Uma vez reconhecido pelo pequeno rRNA da subunidade ribossômica, a pequena subunidade é posicionada ao redor do códon inicial (AUG). Este processo é facilitado por fatores de iniciação como segue.

A subunidade 30S do ribossomo dissocia-se da subunidade 50S do ribossomo, caso tenha sido associada a uma, e liga-se aos fatores de iniciação IF-1 e IF-3. IF-1 liga-se ao local A, onde impede a entrada de novas moléculas de aminoacil-tRNA antes da montagem do ribossomo completo. Também facilita a montagem e estabilização do complexo de iniciação. O IF-3 é necessário para permitir que a subunidade 30S se ligue ao mRNA. Uma vez que isto tenha ocorrido, IF-2-GTP chega ao local, levando consigo o aminoacril-tRNA iniciador. Este se instala no local P, que é posicionado de modo que o anticódon do tRNA se instale sobre o códon de início AUG do mRNA. Hidrólise do GTP ligado ao IF-2 e liberação de todos os fatores de iniciação é necessária para permitir que a subunidade 50S se ligue à subunidade 30S para formar o ribossomo completo e totalmente funcional. Como a hidrólise GTP foi necessária, a união das subunidades é irreversível espontaneamente, e requer um gasto de energia ao terminar a tradução. Uma vez que a subunidade 50S se une à subunidade 30S, o site A está pronto para aceitar o próximo aminoacyl-tRNA.

Um equívoco comum e compreensível é que o novo aminoácido trazido para o ribossomo é adicionado à cadeia crescente de polipeptídeos. Na verdade, o mecanismo é exatamente o oposto: o polipeptídeo é adicionado ao novo aminoácido (Figura \PageIndex{4}}). Isto começa a partir do segundo aminoácido a ser adicionado a uma nova proteína (Figura \PageIndex{5}}). O primeiro aminoácido, uma metionina, você deve se lembrar, veio junto com o IF-2 e o iniciador tRNA. O novo aminoacil-tRNA é acompanhado por EF-Tu, um fator de alongamento que carrega um GTP. Uma vez que o aa-tRNA está no lugar, EF-Tu hidrolisa o GTP e dissocia do aminoacil-tRNA e ribossomo.

Quando um novo aminoacil-tRNA cai na ranhura A do ribossomo, o anticódon é alinhado com o códon do mRNA. Se não houver complementaridade, o aminoacil-tRNA logo flutua de volta para fora da ranhura para ser substituído por outro candidato. Entretanto, se houver complementaridade (ou algo suficientemente próximo, lembrando a idéia de oscilação), então o H-bonds se forma entre o códon e o anti-códon, o tRNA muda de conformação, o que muda a conformação do EF-Tu, causando a hidrólise do GTP para o PIB + Pi, e liberação do aa-tRNA. A interação códon-anticodon é estável o tempo suficiente para que a atividade catalítica do ribossomo hidrolise a ligação entre fMet e o tRNAf na ranhura P, e prenda o fMet ao novo aminoácido com uma ligação de peptídeo na ranhura A. O novo aminoácido ainda está ligado ao seu tRNA, e à medida que este processo ocorre, o ribossomo muda de posição em relação ao mRNA e tRNAs. Isto coloca o agora vazio (sem aminoácido ligado) tRNAf na ranhura E, o tRNAaa na ranhura P, ligado ao aa que está ligado ao Met, e a ranhura A está novamente aberta para a entrada de um novo tRNAt. O factor de alongamento EF-G liga-se perto do slot A assim que o EF-Tu sai, e é necessário para a translocação do ribossoma, fornecendo energia para o processo através da hidrolização de um GTP que transporta com ele para o ribossoma. A partir das experiências dos meus alunos, a melhor maneira de aprender isto parece ser estudar os diagramas e ver os movimentos das moléculas, preenchendo os detalhes mecanicistas na sua mente. Este processo continua até que o ribossomo traga o slot A em linha com um códão de parada.

Não há tRNA com um anti-códon para o códon de parada. Ao invés disso, há um conjunto de fatores de liberação que t no site A do ribossomo, liga-se ao códon de parada, e ativa o ribossomo para cortar a ligação entre a cadeia de polipeptídeos e o último tRNA (Figura \PageIndex{6}}). Dependendo do códon de parada presente, a RF1 (reconhece UAA ou UAG) ou RF2 (para UAA ou UGA) entra primeiro no slot A. A RF1 ou RF2 é complexada com a RF3, que está envolvida na liberação subseqüente do complexo de RF do slot A. Isso é necessário porque uma vez que o polipeptídeo tenha sido liberado do ribossomo, o mRNA deve ser liberado. O fator de liberação do ribossomo (RRF) também se liga no slot A, o que causa uma alteração conformacional no ribossomo liberando o tRNA anterior e agora vazio. Finalmente, o EF-G liga-se ao RRF, e com uma hidrólise de GTP que o acompanha, provoca a des-sociação do ribossomo em subunidades grandes e pequenas separadas. Note que é a combinação de EF-G/RRF que causa a dissociação; EF-G sozinho desempenha um papel diferente no movimento do ribossomo quando não está no códon de parada.