Zagrożenia

Roztwór ninhydryny będzie reagował z białkami skóry. Noś rękawiczki albo skończysz z purpurowymi rękami.

Chemikalia i roztwory

• Roztwór ninhydryny (0.25% w wodzie)
• Metionina
• Hydroksyprolina

Materiały

• Dwa cylindry o pojemności 100 mL
• Dwa pręty mieszające pręty
• Dwa mieszadła magnetyczne
• Dwie szpatułki

Procedura

1. Wypełnić dwa cylindry do połowy roztworem ninhydryny.
2. Dodać pręt mieszający do każdego cylindra i rozpocząć mieszanie roztworów na mieszadłach magnetycznych.
3. Do jednego cylindra dodać metioninę, a do drugiego hydroksyprolinę. Pozostawić roztwory do wymieszania przez około 5 do 10 minut.
4. Po około 5 minutach cylinder zawierający hydroksyprolinę wykaże tworzenie się roztworu o złotym zabarwieniu.
5. Kilka minut później cylinder zawierający metioninę wykaże tworzenie się roztworu o purpurowym zabarwieniu. (Husky Colors).

Dyskusja

Ninhydryna jest hydratem indano-1,2,3-trionu. Z wyjątkiem proliny i hydroksyproliny, wszystkie alfa-aminokwasy występujące w białkach reagują z ninhydryną dając ten sam intensywnie zabarwiony fioletowy anion (570 nm). Fioletowy anion składa się z dwóch cząsteczek ninhydryny, z których każda pozbawiona jest grupy hydroksylowej i połączona jest centralnie położonym azotem. Azot jest jedyną częścią purpurowego anionu, która pochodzi z aminokwasu.

Prolina i hydroksyprolina nie reagują z ninhydryną w taki sam sposób, jak inne aminokwasy, ponieważ ich grupa aminowa alfa jest częścią pięcioczłonowego pierścienia.

.