Zakresy referencyjne

Zakresy referencyjne dla tych samych metod lub instrumentów mogą się różnić między laboratoriami i obszarami geograficznymi z następujących powodów:

1. Warunki operacyjne są różne.
2. Kryteria wyboru zdrowych uczestników są różne.
3. Populacje pacjentów są różne.
4. Obszary geograficzne mają różne temperatury, wysokości, ciśnienia barometryczne, wilgotności i strefy czasowe.
5. Przygotowanie uczestników i pobieranie próbek może się różnić.

Z powodu tych różnic, zakresy referencyjne powinny być ustalane lokalnie zawsze, gdy wprowadzany jest nowy test lub zmieniana jest istniejąca metoda. NCCLS zaleca przebadanie co najmniej 120 próbek pacjentów w celu ustalenia statystycznie istotnego przedziału referencyjnego. Inni eksperci zalecają minimum 200 próbek, aby zapewnić stabilne dolne i górne granice referencyjne.

Może być konieczne podzielenie zakresów referencyjnych na grupy podziału. Na przykład, zakresy referencyjne hemoglobiny powinny być ustalone według płci i wieku, podczas gdy zakresy kortyzolu powinny być podzielone według pory dnia. Każda grupa podziału powinna zawierać 120 próbek.

Preanalityczne czynniki mogą również wymagać kontroli w celu zapewnienia, że wyprowadzone są dokładne zakresy referencyjne. Niektóre czynniki do rozważenia to: czas pobrania; jedzenie, woda i spożycie alkoholu w ciągu ostatnich 24 godzin; miejsce wkłucia do żyły; czas opaski uciskowej; oraz rodzaj rurki do pobierania. Próbki przeznaczone do oznaczenia zakresu referencyjnego powinny być pobierane i przetwarzane w taki sam sposób, jak rutynowa praca laboratoryjna.

Dwa podejścia, parametryczne i nieparametryczne, mogą być zastosowane podczas analizy danych zakresu referencyjnego. Podejście parametryczne obejmuje obliczenie średniej i odchylenia standardowego w celu określenia zakresu wartości, które mieszczą się w 95% przedziale ufności. Przed zastosowaniem tej metody należy zbadać rozkład populacji, aby upewnić się, że jest to rozkład gaussowski (dzwonowaty). Jeśli rozkład populacji jest skośny, statystyka parametryczna nie jest ważna. Rozkład populacji może być zwizualizowany poprzez wykreślenie histogramu częstotliwości w arkuszu kalkulacyjnym, takim jak Excel. Ponieważ to ćwiczenie jest bardzo czasochłonne, często wybiera się podejście nieparametryczne.

Podejście nieparametryczne obejmuje ustalenie wartości przypadających na 2,5 i 97,5 percentyl populacji jako dolnych i górnych granic odniesienia. Pierwszym krokiem jest wprowadzenie wartości analitu do arkusza kalkulacyjnego i posortowanie ich w porządku rosnącym według wielkości. Liczba wartości w zestawie danych jest następnie mnożona przez 0,025 i 0,975, aby uzyskać odpowiednio szeregi percentylowe górnego i dolnego limitu referencyjnego. Na przykład, jeżeli zbiór danych składa się ze 120 próbek, 2,5 i 97,5 percentyla oblicza się poprzez pomnożenie:

120 x 0,025 = 3

120 x 0,975 = 117

Dolna granica odniesienia jest trzecią liczbą od początku (góry) posortowanej listy, a górna granica odniesienia jest trzecią liczbą od (końca) dołu. Zakres odniesienia stanowiłby środkowe 95% danych, które mieszczą się między 3. a 117. wartością.

Outliers mogą mieć istotny wpływ na obliczanie zakresów odniesienia tą metodą i powinny zostać usunięte. Punkty odstające to punkty danych, które leżą poza większością populacji. Chociaż istnieją programy komputerowe i wzory do identyfikacji wartości odstających, żaden z nich nie jest bardziej skuteczny niż wizualne badanie danych. Wartości odstające to wyniki, które różnią się od średniej o więcej niż 3 SD lub różnią się od innych wyników o więcej niż 30%.

Konsensusowe przedziały referencyjne

Odstępy referencyjne dla niektórych analitów są określane przez konsensus ekspertów medycznych na podstawie wyników badań wyników klinicznych. Na przykład, Amerykańskie Stowarzyszenie Diabetologiczne (American Diabetes Association) opracowało wartości konsensusu dla glukozy i hemoglobiny A1c. Inne przykłady zgodnych przedziałów referencyjnych są podsumowane w poniższej tabeli.

Gdy dostępne są konsensualne przedziały referencyjne, laboratoria kliniczne podają te wartości zamiast ustalać własny zakres referencyjny.

Weryfikacja przedziału referencyjnego

Weryfikacja zakresu referencyjnego różni się od ustalania zakresu referencyjnego. W przypadku metody badania zatwierdzonej przez FDA, laboratorium kliniczne może przyjąć podany przez producenta zakres referencyjny, jeżeli jego populacja pacjentów daje podobne wyniki do tych opublikowanych w ulotce dołączonej do opakowania producenta.

W sumie 40 próbek, 20 od zdrowych mężczyzn i 20 od zdrowych kobiet, powinno być przebadanych, a wyniki porównane z opublikowanym zakresem referencyjnym. Wyniki powinny być równomiernie rozłożone w całym opublikowanym zakresie referencyjnym, a nie skupione na jednym końcu. Jeżeli 95% wyników mieści się w opublikowanym zakresie referencyjnym, może on zostać zaakceptowany do użytku. Jeżeli zakres referencyjny producenta nie może być zwalidowany, laboratorium musi ustalić własny zakres referencyjny.

Weryfikacja zakresu referencyjnego jest również przydatna, gdy zebranie dużej liczby próbek w celu ustalenia nowego zakresu referencyjnego jest zbyt trudne. W takiej sytuacji dopuszczalne jest określenie, czy zastosowanie ma zakres referencyjny podany przez producenta, własny istniejący zakres referencyjny lub zakres referencyjny ustalony przez inne sąsiednie laboratorium stosujące ten sam aparat i odczynniki.