Abstract

Danshen was in staat om het risico van de patiënten met coronaire hartziekten (CHD) te verminderen, maar het mechanisme is nog steeds algemeen onbekend. Biochemische indices (lipidenprofiel, markers van nier- en leverfunctie, en homocysteïne (Hcy)) zijn nauw geassocieerd met het risico op CHD. Wij wilden onderzoeken of het medicijn het risico op CHD vermindert door deze biochemische indices te verbeteren. De patiënten kregen 10 Danshen pillen (27 mg/pil) in de Dashen groep, terwijl de controle patiënten placebo pillen kregen, drie maal daags. De follow-up duurde drie maanden. De serum biochemische indices werden gemeten, waaronder lipidenprofielen (LDL-cholesterol (LDL-C), HDL-C, totaal cholesterol (TC), triglyceriden (TG), apolipoproteïne (Apo) A, ApoB, ApoE, en lipoproteïne (a) (Lp(a)); markers van leverfunctie (gamma-glutamyl transpeptidase (GGT), totaal bilirubine (TBil), indirect bilirubine (IBil) en direct bilirubine (DBil)); marker van nierfunctie (urinezuur (UA)) en Hcy. Na drie maanden follow-up, verminderde de Danshen behandeling de niveaus van TG, TC, LDL-C, Lp(a), GGT, DBil, UA, en Hcy (). Daarentegen verhoogde de behandeling de gehaltes aan HDL-C, ApoA, ApoB, ApoE, TBil, en IBil (). Conclusie. Danshen kan het CHD risico verminderen door de biochemische indices van CHD patiënten te verbeteren.

1. Inleiding

Coronaire hartziekte (CHD) is de belangrijkste doodsoorzaak in de wereld. Het aantal CHD-patiënten zal in 2020 82 miljoen bedragen. CHD kan nog steeds niet worden genezen en de huidige behandeling voorkomt symptoomontwikkeling en vermindert de incidentie van hartaanvallen. De behandeling van hartinsufficiëntie omvat voornamelijk op lichaamsbeweging gebaseerde hartrevalidatie, veranderingen in het voedingspatroon (stoppen met alcoholconsumptie), medicatie, vervanging van de aortaklep en coronaire-arteriële bypassoperaties. Vanwege het gebrek aan effectieve therapie is het daarom noodzakelijk om nieuwe behandelingen te ontdekken voor het voorkomen van CHD risico.

Traditionele Chinese geneeskunde (TCM) heeft een diepgaande geschiedenis en wordt al bij veel ziekten beoefend. Het is een benadering voor het onderzoeken van nieuwe medicijnen en mechanismen voor de behandeling van CHD. Danshen (Salvia miltiorrhiza), een vorm van TCM, wordt vaak toegepast in de therapie voor coronaire hartziekten . De resultaten van een aantal publicaties wezen op antioxiderende , ontstekingsremmende , beschermende , of antiplatelet eigenschappen van Danshen en zijn actieve verbindingen . Een salvianolzuur B (SaB), een belangrijk bioactief bestanddeel in de wortel van Danshen, wordt gesuggereerd verantwoordelijk te zijn voor zijn antioxiderende eigenschap . Andere actieve wateroplosbare verbindingen, zoals protocatechuic aldehyde (PAl), 3,4-dihydroxyphenyl lactic acid (DLA), en SaB met peroxidescavenging activiteiten, waren in staat om de expressie van adhesiemoleculen in vasculair endotheel te voorkomen en vasculaire schade te remmen en de componenten zoals tanshinone IIA en tanshinone IIB kunnen de activiteit van NADPH oxidase en de aggregatie van bloedplaatjes remmen. Dit kan het gebruik van het geneesmiddel verklaren voor de behandeling van verschillende microcirculatiestoornissen. De ontstekingsremmende eigenschappen van de hoofdingrediënten SaB, tanshinon IIA (Tansh) en protocatechuïnezuur, die de expressie van kleefmoleculen, cytokinen, chemokinen en P-selectine voor bloedplaatjes voorkomen, werden ook waargenomen. Bovendien was Danshen in lage concentratie in staat om menselijke navelstreng endotheelcellen (HUVECs) te beschermen en hun functies te verbeteren. De belangrijkste componenten, rosmarinezuur, lithosperminezuur, SaB, salvianolzuur C (SaC), D (SaD), en en H / I (SaHI), hebben ook antiplatelet potentieel.

Het is bekend dat de veranderingen in de niveaus van een aantal biochemische parameters direct of indirect geassocieerd zijn met het risico van het optreden van CHD. Ten eerste, lage-densiteit lipoproteïne cholesterol (LDL-C) is een belangrijke risicofactor voor CHD en de concentratie moet goed worden gecontroleerd om de incidentie van CHD te verminderen , terwijl de concentratie van hoge-densiteit lipoproteïne cholesterol (HDL-C) sterk en invers geassocieerd is met het risico van CHD . Een correlatie met het optreden van deze ziekte werd ook waargenomen met de veranderingen in de niveaus van totaal cholesterol (TC) en triglyceriden (TG), alsmede in het geval van apolipoproteïnen A (ApoA), B (ApoB), E (ApoE) en lipoproteïne (a) (Lp(a)) genexpressieprofiel veranderingen . De markers van leverfunctie zoals γ-glutamyl transpeptidase (GGT) , totaal bilirubine (TBil) , indirect bilirubine (IBil), en direct bilirubine (DBil) zijn ook gerelateerd aan CHD risico. Bovendien kan de serumspiegel van urinezuur, een van de markers van de nierfunctie, ook de ernst van CHD weerspiegelen. Bovendien wordt de hoge concentratie van homocysteïne (Hcy) beschouwd als een risicofactor voor hart- en vaatziekten.

Verscheidene klinische studies toonden ook positieve effecten op het gebied van bovengenoemde parameters, waaronder verbetering van de lipidenpatronen van hyperlipidemische patiënten en beschermende eigenschappen bij de patiënten met lever- of nierschade. Onze hypothese was dat Danshen in staat zou kunnen zijn om de incidentie van CHD te verminderen door verbetering van deze biochemische indices (lipidenprofiel, markers van nier- en leverfunctie, en Hcy) van CHD patiënten. Daarom werd een placebo-gecontroleerde, prospectieve en gerandomiseerde studie uitgevoerd om de effecten van het geneesmiddel op biochemische indices van CHD-patiënten te onderzoeken en de mogelijke mechanismen van zijn functies te onderzoeken.

2. Methoden

2.1. Patiënten

Voor de studie werden alle protocollen goedgekeurd door de menselijke ethische commissie van het Affiliated Hospital van Changchun University of Traditional Chinese Medicine. De studie werd uitgevoerd volgens de principes van de Verklaring van Helsinki. Alle patiënten ondertekenden de geïnformeerde toestemming voordat ze werden ingeschreven in deze studie. Van maart 2011 tot juni 2012 bezochten 432 CHD-patiënten ons ziekenhuis. In totaal 126 patiënten voldeden aan de volgende inclusiecriteria en werden in aanmerking genomen voor inschrijving in de studie.

2.2. Inclusiecriteria

Inclusiecriteria werden gegeven volgens de richtlijnen voor het beheer van patiënten met myocardinfarct . Alle patiënten moeten een van de volgende klinische symptomen hebben: (1) instabiele angina; (2) ST-elevatie myocardinfarct (STEMI) en non-STEMI; (3) patiënten die coronary-artery bypass grafting (CABG) chirurgie ondergaan; (4) patiënten die percutane coronaire interventie (PCI) ondergaan; patiënten die coronary-artery stent ondergaan; (5) CHD bepaald door angiografie.

2.3. Exclusiecriteria

Exclusiecriteria werden bepaald op basis van eerdere rapporten . De volgende uitsluitingscriteria werden gebruikt: (1) zwangerschap en borstvoeding; (2) nierfalen met een creatininespiegel > 3 mg/dL; (3) multipel myeloom; (4) voorgeschiedenis van overgevoeligheid; (5) cardiogene shock of linkerventrikel ejectiefractie < 40%; (6) patiënten die harttransplantaties ondergaan; (7) patiënten die cardiale resynchronisatietherapie (CRT) ondergaan; (8) die implanteerbare defibrillatoren (ICD) hebben; (9) moeilijke communicatie en andere redenen.

2.4. Groepen

Danshen verbindingen werden geëxtraheerd met ethanol en de kwaliteit werd gecontroleerd volgens de standaard ontworpen door China State Food and Drug Administration (http://www.sda.gov.cn/WS01/CL1236/114286.html). De belangrijkste inhoudsstoffen van de ethanolextracten zijn tanshinon IIA, cryptotanshinon, tanshinon I , rozemarijnzuur, en salvianolzuur B . Danshenpillen waren de extracten van S. miltiorrhiza en werden als 27 mg/pil geleverd door Tianjin Tasly Group Co, Ltd (Tianjin, China). Danshen pil is samengesteld uit 0,28% tanshinon IIA, 0,21% cryptotanshinon, 0,04% tanshinon I, 1,2% rozemarijnzuur, 5,8% salvianolzuur B, en het meeste zetmeel. Na de selectie van inclusie- en exclusiecriteria werden de uiteindelijke 126 patiënten gelijkmatig en willekeurig in twee groepen verdeeld: Danshen groep en controlegroep. Elke persoon werd aan een groep toegewezen met behulp van een elektronisch spreadsheet met het aangegeven nummer. Om blindering van deze studie te voorkomen, werd een inloopperiode van drie maanden toegevoegd. Tijdens deze periode werden alle patiënten op de gebruikelijke manier behandeld. Om de resultaten stabiel te houden, werden veranderingen in levensstijl en dagelijkse calorie-inname ontmoedigd. CHD-patiënten in beide groepen hadden elke week persoonlijk bezoek of telefonisch contact. De biochemische indices werden constant gehouden tussen de twee groepen na een inloopperiode van 3 maanden, waarna de behandeling met Danshen werd gestart.

Na een inloopperiode van drie maanden kregen de patiënten 10 Danshen pillen per keer in de Dashen groep, terwijl de controle patiënten placebo pillen kregen, drie maal daags. Ondertussen kregen alle patiënten de normale therapie zoals in de inloopperiode en werden veranderingen in levensstijl en dagelijkse calorie-inname ontmoedigd. CHD patiënten in beide groepen hadden elke week persoonlijk bezoek of telefonisch contact. De duur van de follow-up was 3 maanden.

2.5. Bloedmonster werd afgenomen uit de antecubitale ader van elke patiënt op de dag van inschrijving, na 3 maanden inloopperiode, en 3 maanden toediening van Danshen of placebo. Serum werd gescheiden van perifeer veneus bloed (4 ml) na centrifugeren bij 4°C bij 3000 rpm gedurende 10 min. De biochemische indices werden gemeten, waaronder lipidenprofielen (LDL-C, TC, TG, HDL-C, ApoA, ApoB, ApoE, en Lp(a)), markers van leverfunctie (GGT, TBil, IBil, en DBil), marker van nierfunctie (UA), en een risicofactor voor hart- en vaatziekten (Hcy).

Alle kits waren in de handel verkrijgbaar. Low-density lipoprotein cholesterol (LDL-C) BioAssay ELISA Kit (Human), cat. nummer 196116, was van Beijing Huamei Scientific (Beijing, China). High-density lipoprotein cholesterol, HDL-C, ELISA Kit, Cat. nummer CSB-E08954h, was van Cusabio Biotech Co., Ltd (Wuhan, China). Humaan totaal cholesterol (TC) ELISA Kit, Cat. nummer QY-E00062, was van Qayee Bio-Technology Co., Ltd (Shanghai, China). De menselijke TG (triglyceride) ELISA-kit, cat. nummer E-EL-H5437, was van Elabscience Biotechnology Co., Ltd (Beijing, China). Lipoproteïne A (ApoA) menselijke ELISA-kit, cat. Nummer ab108878, Apolipoproteïne B (ApoB) Menselijke ELISA-kit, Cat. nummer ab108807, en Apolipoproteïne E (ApoE) Menselijke ELISA-kit, Cat. nummer ab108813, waren van Abcam Trading (Shanghai) Company, Ltd (Shanghai, China). De ELISA-kit voor Lipoproteïne (a), Lp(a), cat. nummer SEA842Hu, was afkomstig van Wuhan USCN Business Co., Ltd (Wuhan, China). Human gamma-glutamyl transpeptidase, GGT ELISA Kit, Cat. nummer E1375h, was van Everlight Biotech (Taipei, Taiwan). Totale bilirubine, humaan, ELISA Kit, cat. nummer E01T0143, was van ARP American Research Products, Inc (Waltham, MA, USA). Bilirubine (totaal en direct) colorimetrische testkit, cat. nummer K553-100, is van BioVision, Inc (Milpitas, CA, VS). De urinezuurbepalingskit, cat. nummer KA1651, was van Anova Corporation (Taipei, Taiwan). Human Homocysteine (HCY) ELISA Kit, Cat. nummer, was van Flarebio Biotech (Wuhan, China).

Zoals in een inloopperiode, om de variaties in biochemische indices als gevolg van normale therapie, de veranderingen van de dagelijkse voedsel calorie inname, en levensstijl te voorkomen, werden al deze veranderingen ontmoedigd in drie-maanden behandelingsperiode. Na drie maanden follow-up werden de serum biochemische indices gemeten op alle beschikbare gegevens. Deze variabelen omvatten nog steeds serum lipidenprofielen (LDL-C, HDL-C, TC, TG, ApoA, ApoB, ApoE, en Lp(a)); serum markers van leverfunctie, GGT, TBil, IBil, en DBil; serum marker van nierfunctie, UA, en CHD risicofactor, Hcy.

2.6. Statistische Analyse

Een totaal van 126 patiënten (63 in elke groep) leverde 90% power om het verschil tussen twee groepen te detecteren met een alfa-niveau vastgesteld op 0,05. Alle gegevens werden gepresenteerd als gemiddelde waarden ± SD. Chi-kwadraat toets en -test werden toegepast. Variantie-analyses werden gebruikt om de serumniveaus van lipiden bij de aanvangswaarde en na de behandelingsperiode van 3 maanden in elke groep te vergelijken. (2-tailed) zal als statistisch significant worden beschouwd. De analyse werd uitgevoerd met behulp van SPSS versie 20.0 (IBM corporation; Chicago, IL, USA).

3. Resultaten

3.1. Baseline Characters of CHD Patients

In totaal 432 patiënten bezochten ons ziekenhuis van maart 2011 tot juni 2012. Van deze patiënten werden 306 CHD-patiënten uitgesloten na selectie met inclusie- en exclusiecriteria (figuur 1). Voordat Danshen werd toegediend, werd een inloopperiode van 3 maanden uitgevoerd om er zeker van te zijn dat er geen significante verandering in biochemische indices was, hoewel sommige van deze patiënten nog steeds het geneesmiddel voor de behandeling van CHD gebruikten. Zo werden 126 patiënten geselecteerd en willekeurig toegewezen aan twee groepen: de Danshen groep () en de controlegroep (). Na nog eens 3 maanden follow-up, beëindigden 61 en 62 CHD-patiënten de studie in respectievelijk de Danshen- en de controlegroep.

Figuur 1

Het stroomdiagram van deze studie. CHD, coronaire hartziekte. De veranderingen voor CHD normale therapie, levensstijl, en dagelijkse voedsel calorie inname werden ontmoedigd in drie-maanden run-in en drie-maanden behandeling periodes. Uiteindelijk beëindigden 61 en 62 CHD patiënten de gehele procedure. Danshen pillen waren de extracten van Salvia miltiorrhiza en geleverd als 27 mg/pil door Tianjin Tasly Group Co, Ltd (Tianjin, China).

Er was geen significant verschil voor de klinische en procedurele kenmerken tussen Danshen en controlegroepen (tabel 1) (), inclusief leeftijd, geslacht, risico-element, klinische presentatie, preprocedurele laboratoriumuitslagen, en medicatie. Er waren 26 (41,3%) en 24 (38,1%) mannen in respectievelijk de Danshen en controlegroepen. De leeftijd van alle CHD-patiënten varieerde van 60,2 tot 73,5 jaar. De meeste CHD-patiënten hadden instabiele angina: 37 gevallen (58,7%) in de Danshen-groep en 34 gevallen (54,0%) in de controlegroep. Meer dan de helft van het aantal patiënten had overgewicht volgens de BMI waarden (overgewicht = BMI van 25-29.9) in beide groepen. Hypertensie was een duidelijk symptoom met 48 gevallen (76,2%) in de Danshen groep en 50 gevallen (79,4%) in de controlegroep.

3.2. Biochemische Indices at Baseline

Serum biochemische indices werden geanalyseerd op alle beschikbare gegevens, om in de eerste plaats deze variabelen te identificeren die geassocieerd zijn met het CHD-risico. Deze variabelen omvatten serum lipidenprofielen (LDL-C, HDL-C, TC, TG, ApoA, ApoB, ApoE, en Lp(a)); serum markers van leverfunctie, GGT, TBil, IBil, en DBil; serum marker van nierfunctie, UA en CHD risicofactor, en Hcy. Alle serum biochemische indices tussen Danshen en controlegroepen waren statistisch insignificant () (Tabel 2).

3.3. Biochemische Indices na 3-Month Run-In Periode

Om de variaties in biochemische indices als gevolg van normale therapie, de veranderingen van de dagelijkse voedsel calorie-inname, en levensstijl te voorkomen, is het noodzakelijk om drie maanden run-in periode toe te voegen om zeker te zijn van de variaties. Ondertussen werden al deze veranderingen ontmoedigd. Na de drie maanden inloopperiode, werden serum biochemische indices gemeten op alle beschikbare gegevens, die geassocieerd zijn met CHD risico. Deze variabelen omvatten nog steeds serum lipidenprofielen (LDL-C, HDL-C, TC, TG, ApoA, ApoB, ApoE, en Lp(a)); serum markers van leverfunctie, GGT, TBil, IBil, en DBil; serum marker van nierfunctie, UA en CHD risicofactor, en Hcy. De resultaten toonden ook aan dat er geen significant statistisch verschil was voor deze serum biochemische indices tussen Danshen en controlegroepen na een inloopperiode van drie maanden (Tabel 3) ().

4. Discussie

De TCM Danshen is lang beschouwd als effectief in “het activeren van de circulatie en het verspreiden van bloed stasis” . Volgens de klassieke theorie van TCM wordt gezegd dat “pijn zal worden verlicht wanneer blokkade wordt verwijderd”. Dit concept suggereert dat een lage bloedcirculatie schade toebrengt aan menselijke weefsels en organen. Dus, een dergelijke theorie kan worden gebruikt voor de behandeling van CHD.

We beoordeelden de therapeutische werkzaamheid van Danshen, die wordt geassocieerd met de veranderingen van lipidenprofielen bij CHD-patiënten. Meerdere markers van biochemische indices van CHD-patiënten werden gemeten in het serum. De resultaten gaven aan dat de aanwezigheid van Danshen een verbetering van verschillende onderzochte biochemische indices van CHD-patiënten kan veroorzaken. Het niveau van TG, TC, LDL-C, Lp(a), GGT, DBil, AU en Hcy werd statistisch significant verlaagd (tabellen 3 en 4), terwijl het niveau van HDL-C, ApoA, ApoB, ApoE, TBIL en IBil significant verhoogd werden (tabellen 3 en 4). De meeste van deze resultaten komen overeen met eerdere rapporten.

Danshen was in staat om de leverfunctie te verbeteren door het niveau van totale bilirubine te verhogen en het niveau van UA bij vrijwilligers te verlagen. Hcy is een bijproduct van het methioninemetabolisme en de onbalans ervan zal leiden tot hyperhomocysteïnemie , die verantwoordelijk is voor de ontwikkeling van CHD . S. miltiorrhiza extract remde ook ongewenste bijwerkingen voor HUVECs . Al deze resultaten suggereren dat het geneesmiddel de hartfuncties kan verbeteren en een potentieel geneesmiddel is in CHD therapie.

Danshen heeft bewezen de opname van lage-densiteit lipoproteïne te onderdrukken, de expressie van intercellulaire adhesie molecuul te verhogen, en de belangrijkste gebeurtenissen in atherosclerose te moduleren . De combinatie van het geneesmiddel en Gegen kan de verhoudingen TG/HDL-C en LDL-C/HDL-C verbeteren . De belangrijkste samenstellingen in Danshen kunnen gunstig zijn voor de verbetering van lipidenprofielen. Cryptotanshinone toonde beschermende effecten op atherosclerose van ApoE-deficiënte muizen en kan de situatie veroorzaakt door apolipoproteïne tekort verbeteren , die ook in staat was om de expressie van geoxideerde adhesiemoleculen geïnduceerd door LDL te remmen . Tanshinone IIA vertoonde scavenging effecten op lipide vrije radicalen in cardiale sarcoplasmatisch reticulum en remde de expressie van geoxideerde lage-densiteit lipoproteïne receptor-1 . Ethanol extract van S. miltiorrhiza verhoogde in vivo serum niveau van HDL om het optreden van osteoporose te voorkomen. Preventie van lipide peroxidatie werd ook waargenomen in het geval van de actieve verbinding-rosmarininezuur . Al deze samenstellingen kunnen gunstig zijn voor de verbetering van lipidenprofielen van CHD-patiënten.

De incidentie van CHD verschilt sterk tussen verschillende studies. De bepaling van de mate van correlatie tussen de risicoprofielen en de prevalentie van factoren van CHD-patiënten is vaak zeer ingewikkeld, vooral bij de patiënten met de samenvallende ziekten zoals hypertensie , diabetes mellitus , nierziekte , en anderen waardoor dergelijke resultaten meer variabel. Ook andere activiteiten kunnen CHD verergeren, zoals oxidatieve stress en de productie van proinflammatoire cytokines . Het voorkomen van deze begeleidende ziekten en deze processen kan dus de klinische uitkomst van CHD-patiënten verbeteren. Belangrijker nog is dat de progressie van CHD door Danshen afhankelijk lijkt te zijn van zijn meervoudige functies en gunstige effecten werden aangetoond in verschillende studies. Bijvoorbeeld, het geneesmiddel heeft de belangrijkste componenten met anti-oxidant activiteiten , die vasculaire schade kunnen voorkomen. Het bezit ontstekingsremmende eigenschappen , remt de aggregatie van bloedplaatjes , voorkomt trombose , vermindert de viscositeit van het bloed , en verbetert myocardiale ischemie . Al deze resultaten suggereren dat Danshen superieur is aan de meeste huidige medicijnen met meervoudige activiteiten, die gunstig zijn voor het verbeteren van de symptomen van CHD. Hier wordt echter alleen gekeken naar de verbetering van het lipidenprofiel van CHD-patiënten door Danshen. Er moet nog veel werk worden verricht om de functie van Danshen voor het verbeteren van de ernst van CHD beter te begrijpen.

Het moet worden benadrukt dat de waarden van de verkregen resultaten, zelfs met de beperking van de klinische studie, van invloed kunnen zijn; bijvoorbeeld, (1) de steekproefgrootte lijkt klein met slechts 126 geselecteerde CHD patiënten, wat wordt veroorzaakt door de strikte criteria die in deze studie zijn gegeven; (2) de gehele follow-up periode is 6 maanden, terwijl de periode voor toediening van Danshen slechts drie maanden is. In zo’n korte periode kan de vermindering van hartdood en hartfalen niet worden vastgesteld; (3) de veiligheid van het geneesmiddel is niet vastgesteld, hoewel het in China op grote schaal klinisch is gebruikt. Onze resultaten moeten worden beschouwd als veelbelovend, hoewel voorlopig. Veel meer bewijs is nodig om het klinisch gebruik van Danshen voor CHD patiënten te ondersteunen.

5. Conclusie

Danshen was in staat om biochemische indices van CHD patiënten te verbeteren. In een voorgespecificeerde verkennende analyse waren er aanwijzingen voor een vermindering van het aantal CHD-gebeurtenissen bij patiënten die de medicijntherapie hadden gekregen. Het is momenteel het populairste Chinese kruidengeneesmiddel en wordt vaak alleen of in combinatie met andere geneesmiddelen gebruikt, vooral voor de behandeling van hart- en vaatziekten. De resultaten van onze studie weerspiegelen de wereldwijde trend van studies op het gebied van de rol van Danshen bij de ontwikkeling van therapie voor CHD-patiënten.

Competing Interests

De auteurs verklaren dat er geen concurrerende belangen zijn met betrekking tot de publicatie van dit artikel.

Acknowledgments

De auteurs danken Dr. Wang voor haar technische hulp tijdens het verzamelen van gegevens.