Danshen (Salvia miltiorrhiza) Compounds improve Biochemical Indices of the Patient of Coronary Heart Disease
Abstract
Danshen は冠動脈疾患のリスクを低減することができたが、そのメカニズムはまだ広く解明されていない。 生化学的指標(脂質プロファイル,腎機能・肝機能マーカー,ホモシステイン(Hcy))はCHDリスクと密接に関連している。 我々は、この薬がこれらの生化学的指標を改善することによってCHDリスクを低減させるかどうかを調査することを目的とした。 ダーシェン群では10錠(27 mg/錠)、対照群ではプラセボ錠を1日3回服用させた。 追跡期間は3ヶ月であった。 血清生化学的指標は、脂質プロファイル(LDLコレステロール(LDL-C)、HDL-C、総コレステロール(TC)、トリグリセリド(TG)、アポリポ蛋白(Apo)A、ApoB、ApoE、リポ蛋白(a)(Lp(a)))などが測定された。 肝機能マーカー(γ-グルタミルトランスペプチダーゼ(GGT),総ビリルビン(TBil),間接ビリルビン(IBil),直接ビリルビン(DBil)),腎機能マーカー(尿酸(UA))およびHcy. 3ヶ月の追跡調査後、丹頂はTG, TC, LDL-C, Lp(a), GGT, DBil, UA, Hcyの値を減少させた()。 一方、HDL-C、ApoA、ApoB、ApoE、TBil、IBilの値は増加した()。 結論 丹参はCHD患者の生化学的指標を改善することにより、CHDリスクを低減させることができる。 はじめに
冠状動脈性心臓病(CHD)は、世界の主要な死因である 。 CHDの患者数は2020年には8200万人に達すると言われています。 CHDは未だに完治することができませんが、現在の治療では症状の進行を防ぎ、心臓発作の発生を抑えることができます。 CHDの治療には、運動療法に基づく心臓リハビリテーション、食事パターンの変更(アルコール摂取の中止)、薬物療法、大動脈弁置換術や冠動脈バイパス移植術などが主に行われます。
中国伝統医学(TCM)は、深い歴史を持ち、多くの疾患に対して実践されてきました。 CHD治療のための新しい薬やメカニズムを探索するアプローチである。 中医学の一つである丹参(Salvia miltiorrhiza)は、冠動脈疾患の治療によく応用されている。 その結果、丹参とその活性化合物の抗酸化作用、抗炎症作用、保護作用、抗血小板作用が指摘されている。 丹参の根に含まれる重要な生理活性成分であるサルビアノール酸B(SaB)は、その抗酸化作用に関与していることが示唆されている。 また、プロトカテクアルデヒド(PAl)、3,4-ジヒドロキシフェニル乳酸(DLA)、過酸化物消去作用を有するSaBなどの水溶性活性化合物は、血管内皮の接着分子の発現を阻害し血管障害を抑制し、タンシノンIIAやタンシノンIIBなどの成分はNADPH oxidase活性と血小板凝集を阻害することができることがわかった … このことから、様々な微小循環障害の治療薬として使用されているものと思われる。 また、主要成分であるSaB、タンシノンIIA(Tansh)、プロトカテク酸は、接着分子、サイトカイン、ケモカイン、血小板P-セレクチンの発現を抑制する抗炎症作用が確認された。 さらに、低濃度の丹参は、ヒト臍帯静脈内皮細胞(HUVEC)を保護し、その機能を向上させることができた。 また、主成分であるロスマリン酸、リトスペルミン酸、SaB、サルビアノール酸C(SaC)、D(SaD)、H/I(SaHI)には抗血小板作用がある。
多くの生化学パラメータのレベルの変化が直接または間接的にCHD発生のリスクと関連していることはよく知られている。 まず、低密度リポタンパク質コレステロール(LDL-C)はCHDの重要な危険因子であり、CHDの発生を減らすために濃度を十分に制御する必要がある一方、高密度リポタンパク質コレステロール(HDL-C)の濃度はCHDリスクと強く、逆相関している。 また、総コレステロール(TC)、トリグリセリド(TG)、アポリポ蛋白A(ApoA)、B(ApoB)、E(ApoE)、リポ蛋白(a)(Lp(a))遺伝子発現プロファイルの変化と、この疾患の発生との相関が観察された。 また、γ-グルタミルトランスペプチダーゼ(GGT)、総ビリルビン(TBil)、間接ビリルビン(IBil)、直接ビリルビン(DBil)などの肝機能マーカーもCHDリスクと関連している。 さらに、腎機能マーカーの一つである尿酸の血清レベルも、CHDの重症度を反映することがある。 さらに、ホモシステイン(Hcy)濃度の高さは心血管疾患の危険因子とみなされている。
いくつかの臨床試験では、高脂血症患者の脂質パターンの改善、肝臓や腎臓の障害を持つ患者の保護作用など、上記のパラメータの分野でもプラスの効果が示された。 我々は、丹参がCHD患者のこれらの生化学的指標(脂質プロファイル、腎機能および肝機能のマーカー、Hcy)を改善することにより、CHDの発生を抑制することができると仮定した。 そこで、プラセボ対照前向き無作為化試験を実施し、CHD患者の生化学的指標に対する本薬剤の効果を検討し、その作用機序を探った。 方法
2.1. 患者
研究前に、すべてのプロトコルは、長春中医薬大学付属病院の人間倫理委員会によって承認されました。 本研究はヘルシンキ宣言の原則に従って実施された。 すべての患者は、この研究に登録される前に、インフォームドコンセントに署名した。 2011年3月から2012年6月までに、432名のCHD患者が当院に来院した。 2011年3月から2012年6月までに当院に来院したCHD患者432名のうち、126名が以下の基準を満たし、本研究への登録を検討した。 心筋梗塞患者の管理に関するガイドラインに基づき、対象患者を設定した。 すべての患者は以下の臨床症状のいずれかを有していることが望ましい。 (1) 不安定狭心症 (2) ST上昇型心筋梗塞(STEMI)および非STEMI (3) 冠動脈バイパス術(CABG)を受けている患者 (4) 経皮的冠動脈インターベンション(PCI)を受けている患者 (5) 冠動脈ステントを使用している患者
2.3. 除外基準
除外基準は、過去の報告に従って決定された。 除外基準は以下の通りであった。 (1) 妊娠・授乳期 (2) クレアチニン値 > 3 mg/dL の腎不全 (3) 多発性骨髄腫 (4) 過敏症の既往 (5) 心原性ショックまたは左室駆出率 < 40% (6) 心臓移植を受けた患者 (7) 心臓再同期療法 (CRT) を受けた患者 (8) 植込み型除細動器を有する (9) コミュニケーション困難などの理由である。
2.4. グループ
丹参化合物はエタノールで抽出し、中国国家食品薬品監督管理局(http://www.sda.gov.cn/WS01/CL1236/114286.html)の設計基準に従って品質管理されたものである。 エタノール抽出物の主成分は、タンシノンIIA、クリプトタンシノン、タンシノンI、ロスマリン酸、サルビアノール酸Bである。 丹参錠はS. miltiorrhizaの抽出物であり、27mg/錠としてTianjin Tasly Group Co, Ltd(中国、天津市)から提供された。 丹参錠は、0.28% tanshinone IIA, 0.21% cryptotanshinone, 0.04% tanshinone I, 1.2% rosmarinic acid, 5.8% salvianolic acid B, and most starchから構成され、S.miltiorrhizaの抽出物である。 対象者と除外者の選定後、最終的に126名の患者を2つのグループに均等かつ無作為に割り付けた。 ダンセン群と対照群である。 各人は、指示された番号の電子計算機を用いて1つのグループに割り当てられた。 この研究の盲検化を避けるために、3ヶ月のランイン期間が加えられた。 この間、すべての患者は通常通り治療された。 一方、安定した結果を維持するために、生活習慣と毎日の食事カロリーの摂取量の変化は抑制された。 両群のCHD患者には、毎週、面会または電話連絡があった。 7564>
3ヶ月の試行期間後、ダーシェン群には1回10錠、対照群には1日3回プラセボを投与し、生化学的指標は両群で一定に保たれた。 一方,対照群にはプラセボを1日3回投与した。その間,すべての患者には導入期間と同様に通常の治療を行い,生活習慣や日々の食事摂取カロリーの変更は控えた。 両群のCHD患者には、毎週、面会または電話連絡を行った。 追跡期間は3ヶ月であった。 生化学的指標の測定
血液サンプルは、登録日、3ヶ月のランイン期間後、およびダンセンまたはプラセボの3ヶ月投与後に各患者の前十字架静脈から採取された。 末梢静脈血(4mL)を4℃、3000rpm、10分間遠心分離した後、血清を分離した。 脂質プロファイル(LDL-C、TC、TG、HDL-C、ApoA、ApoB、ApoE、Lp(a))、肝機能マーカー(GGT、TBil、IBil、DBil)、腎機能マーカー(UA)、心血管疾患の危険因子(Hcy)などの生化学指標を測定した
すべてのキットは市販のものであった。 Low-density lipoprotein cholesterol (LDL-C) BioAssay ELISA Kit (Human), Cat.number 196116, was from Beijing Huamei Scientific (Beijing, China). 高密度リポタンパク質コレステロール、HDL-C、ELISAキット、カタログ番号CSB-E08954hは、Cusabio Biotech Co, Ltd(中国、Wuhan)からであった。 ヒト総コレステロール(TC)ELISAキット、Cat.番号QY-E00062は、Qayee Bio-Technology Co, Ltd(中国、上海)からのものである。 Human TG (Triglyceride) ELISA Kit, Cat. Number E-EL-H5437, Elabscience Biotechnology Co., Ltd (Beijing, China)からのものであった。 リポ蛋白A(ApoA)Human ELISA Kit、Cat. Number ab108878、Apolipoprotein B (ApoB) Human ELISA Kit, Cat.number ab108807、Apolipoprotein E (ApoE) Human ELISA Kit, Cat.number ab108813、は Abcam Trading (Shanghai) Company, Ltd (Shanghai, China)より入手したものである。 リポタンパク質(a)、Lp(a)のELISAキット、Cat番号SEA842Huは、Wuhan USCN Business Co, Ltd(中国、武漢)より入手した。 Human gamma-glutamyl transpeptidase, GGT ELISA Kit, Cat.number E1375h, Everlight Biotech (Taipei, Taiwan)からであった。 総ビリルビン、ヒト、ELISAキット、カタログ番号E01T0143は、ARP American Research Products, Inc (Waltham, MA, USA)からのものである。 ビリルビン(トータルおよびダイレクト)比色アッセイキット、カタログ番号K553-100は、BioVision,Inc(Milpitas,CA,USA)より得たものである。 Uric Acid Assay Kit, Cat.number KA1651, は、Anova Corporation (Taipei, Taiwan)からのものである。 ヒトホモシステイン(HCY)ELISAキット、カタログ番号は、Flarebio Biotech(武漢、中国)からだった。
ランイン期間と同様に、通常の治療、毎日の食品摂取カロリーやライフスタイルの変化による生化学指標の変動を避けるために、これらのすべての変更は、3ヶ月間の治療期間中に抑制された。 3ヵ月後のフォローアップでは、入手可能なすべてのデータについて、血清生化学的指標を測定した。 これらの変数には、血清脂質プロファイル(LDL-C、HDL-C、TC、TG、ApoA、ApoB、ApoE、Lp(a))、血清肝機能マーカー、GGT、TBil、IBil、DBil、血清腎機能マーカー、UA、CHD危険因子、Hcy(7564>
2.6) が含まれています。 統計解析<427><7224>合計126名(各群63名)でα水準を0.05とし、2群間の差を検出する90%の検出力を得た。 すべてのデータは平均値±SDで表示した。 カイ二乗検定と-検定が適用された。 分散分析は、各グループのベースラインと3ヶ月の治療期間後の脂質の血清レベルを比較するために使用された。 (2-tailed)を統計的に有意とみなす。 分析はSPSS version 20.0 (IBM corporation; Chicago, IL, USA)を用いて行った。 結果
3.1. CHD患者のベースライン特性
2011年3月から2012年6月までに当院に通院した患者は合計432名であった。 これらの患者のうち、306人のCHD患者は、包含基準および除外基準で選択した後、除外された(図1)。 なお,CHD治療薬として服用中の患者もいるが,投与前に3ヶ月のランイン期間を設け,生化学的指標に有意な変化がないことを確認した。 そこで、126名の患者を選び、無作為にダンセン群()と対照群()の2群に振り分けた。 7564>
年齢、性別、危険因子、臨床症状、処置前の検査結果、投薬などの臨床および処置の特徴について、丹心と対照群との間に有意差はなかった(表1)()。 男性は、Danshen群26名(41.3%)、対照群24名(38.1%)であった。 CHD患者の年齢は60.2歳から73.5歳であった。 CHD患者の多くは不安定狭心症であり、丹心群で37例(58.7%)、対照群で34例(54.0%)であった。 BMI値では両群とも半数以上が過体重(過体重=BMI25-29.9)であった。 高血圧は明らかな症状で、丹心グループ48例(76.2%)、対照グループ50例(79.4%)であった。
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3.2. ベースラインでの生化学的指標
血清生化学的指標は、主にCHDリスクと関連するこれらの変数を識別するために、すべての利用可能なデータについて分析した。 これらの変数には、血清脂質プロファイル(LDL-C、HDL-C、TC、TG、ApoA、ApoB、ApoE、Lp(a))、肝機能の血清マーカー、GGT、TBil、IBil、DBil、腎機能の血清マーカー、UA、CHD危険因子、Hcyが含まれている。 丹心と対照群間のすべての血清生化学的指標は、統計的に有意ではなかった()(表2)。
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中医学の丹参は古くから「血行を促進し、瘀血を取り除く」効果があるとされてきた。 中医学の古典的な理論では、”滞りを取り除くと痛みが和らぐ “と言われてきた。 この考え方は、血液の循環が悪くなると、人間の組織や臓器にダメージを与えることを示唆しています。 したがって、このような理論はCHDの管理に用いることができる。
我々は、CHD患者の脂質プロファイルの変化に関連する丹参の治療効果を評価した。 CHD患者の生化学的指標である複数のマーカーを血清中で測定した。 その結果,Danshenの存在は,CHD患者のいくつかの調査された生化学的指標の改善をもたらす可能性があることが示された。 TG、TC、LDL-C、Lp(a)、GGT、DBil、AU、Hcyは統計的に有意に減少し(表3、4)、HDL-C、ApoA、ApoB、ApoE、TBIL、IBilは著しく増加した(表3、4)、(表1)、。 これらの結果のほとんどは、これまでの報告と一致している。
丹参は、ボランティアにおいて総ビリルビン値を増加させ、UA値を減少させることにより、肝機能を改善することができた。 Hcyはメチオニン代謝の副産物であり、そのバランスが崩れると、CHD発症の原因となる高ホモシステイン血症になります。 また、S. miltiorrhizaエキスは、HUVECに対する好ましくない副作用を抑制した。 7564>
丹参は、低密度リポ蛋白の摂取を抑制し、細胞間接着分子の発現を増加させ、動脈硬化の主要なイベントを調節することが証明されている。 この薬とゲゲンを併用することで、TG/HDL-CとLDL-C/HDL-Cの比率を改善することができる。 丹参の主成分は、脂質プロファイルの改善に有益であると考えられる。 クリプトタンシノンは、ApoE欠損マウスの動脈硬化の予防効果を示し、アポリポ蛋白質不足による状況を改善することができ、またLDLによって誘導される酸化された接着分子の発現を抑制することができた。 Tanshinone IIA は、心筋小胞体の脂質フリーラジカルを消去し、酸化型低密度リポタンパク質受容体 1 の発現を抑制することが示された。 S. miltiorrhizaのエタノール抽出物は、in vivoでの血清中のHDLレベルを増加させ、骨粗鬆症の発生を予防することがわかった。 また、活性化合物であるロスマリン酸の場合、過酸化脂質の防止作用が認められた。 7564>
CHDの発症率は研究によって大きく異なっています。 特に、高血圧、糖尿病、腎臓病などの疾患を併発する患者においては、その結果がより変動しやすく、CHD患者のリスクプロファイルと有病率の相関の度合いを決定することは非常に複雑な場合が多い。 また、酸化ストレスや炎症性サイトカインの産生など、他の活動もCHDを悪化させる可能性がある。 したがって、これらの付随する疾患やこれらの過程を予防することは、CHD患者の臨床転帰を改善する可能性がある。 さらに重要なことは、丹参によるCHDの進行は、その多機能に依存しているようで、いくつかの研究で有益な効果が実証されたことである。 例えば、この薬には抗酸化作用のある主成分が含まれており、血管の損傷を防ぐことができる。 また、抗炎症作用、血小板凝集抑制作用、血栓症予防作用、血液粘性低下作用、心筋虚血改善作用を有する。 これらの結果は、丹参がCHDの症状を改善するために有益な複数の活性を持つ、ほとんどの現在の薬よりも優れていることを示唆している。 しかし、ここでは、丹参がCHD患者の脂質プロファイルを改善することだけを考えている。 例えば、(1)サンプルサイズは、この研究で与えられた厳しい基準に起因する、選択された126人のCHD患者のみで小さく見える、(2)全追跡期間は6ヶ月であるが、丹参の投与期間はわずか3ヶ月である、などである。 このような短期間では、心臓死や心不全の減少を検出できないこと、(3)中国で広く臨床使用されているにもかかわらず、薬の安全性が確認されていないことです。 今回の結果は、予備的なものではあるが、有望なものと評価されるべきであろう。 CHD患者に対する丹参の臨床使用を支持するためには、より多くのエビデンスが必要である
5. 結論
DanshenはCHD患者の生化学的指標を改善することができた。 事前に特定した探索的分析では、薬物療法を受けた患者のCHDイベントの発生率が低下する証拠があった。 現在、漢方薬の中で最もポピュラーな薬であり、特に循環器疾患の治療に単独または他の薬と組み合わせて使用されることが多い。 本研究の結果は、CHD患者の治療法開発における丹参の役割に関する研究の世界的傾向を反映している。
Competing Interests
著者らは、本論文の発表に関して競合する利害関係がないことを宣言する。
Acknowledgements
データ収集中に技術的支援を行った王博士に感謝する。