何百万ものサンプルを基にした、DNA唾液サンプルを最適化する10のヒント
唾液サンプル収集の分野の専門家として、最高の結果が得られるように最適化された唾液DNAサンプルを持つことが、研究調査にとって重要であることを理解しています。
唾液からの高い収率と高い品質のDNAは、お客様がより多くの調査を実施し多くのデータを生成し、それによって研究を加速させることができるのです。 さらに、Orageneのような非侵襲的な採取方法によって、研究者や参加者が実際に好む採取方法を提供することができます。
サンプルを最適化するための実証済みのヒントやトリックを紹介することは、役に立つと思います。 唾液サンプルから素晴らしい結果を得るために何が必要なのか、私たちにはそれを裏付ける長年の経験があります。
私たちは、あなたの成功に貢献できる、DNA唾液サンプルを最適化する方法トップ10をまとめました。 読みながら、これらのヒントの中に、あなたのラボで役立ちそうなものがあるかどうか自問してみてください。 また、その他のヒントをお持ちの方は、Twitter、Linkedin、または弊社のFacebookページでお知らせください。
コレクションベースの最適化
- コレクションインストラクションに忠実に従うことが重要です。 被験者が必要な量の唾液を出し、サンプルを出す30分前から飲食や喫煙、ガムを噛まないようにしてください。 これらの推奨事項に従わない場合、DNA収量が減少する可能性があります。
- 唾液を吐くとき、気泡はカウントされません。 唾液が「Fill To」ライン上にあることを確認し、気泡がある場合はラインより上にあることを確認します。 これにより、最適な量の唾液が収集されます。 唾液の量が少ないと、品質には影響しませんが、DNA収量は比例して減少します。
- DNA 収量は、ドナーによって異なります。
- DNAの収量はドナーによって異なります。期待できる収量の正確なイメージを得るために、異なるドナーのサンプルをテストすることが重要です。
- 2mlを吐くのが難しいドナーの場合、頬、ちょうど奥歯の後ろをこすることによって、しばしば唾液の流れを促進することができます。 また、砂糖ひとつまみを舌の上にのせて唾液の分泌を促すこともできます。 味を感じることができる程度の少量でよいのです。
- 幼い子供など、命令で唾を吐くことができない人からの採取が困難な場合があります。 Oragene assisted collection(OG-675)やORAcollect for pediatrics(OC-175)のような唾液を吐かない人のための採取キットを使用すると、あなたとドナーの両方が簡単にサンプルを採取でき、十分なDNAを採取することも可能です。
プロセスベースの最適化
- 50℃インキュベーションのステップは、DNA抽出のためにアリコートを取り出す前に元のサンプルチューブで実施する必要があります。 インキュベーションは一度だけ行う必要があり、その後のアリコートからDNAを抽出する際にこのステップを繰り返す必要はありません。
- RNAを除去するための特別な処理を行わない限り、RNAはDNAと共沈してしまいます。
- 下流のアプリケーションで高濃度のDNAが必要な場合、DNAペレットを溶解するバッファーの量を100 µLから50 µLに減らすことにより、濃度を上げることができます。
- Oragene/saliva のサンプルは室温で数年間安定しています。 すぐに抽出できない場合は、冷蔵や冷凍する必要はありません。
- 抽出後、DNAが溶解するのに十分な時間を確保すること。 prepIT-L2P法でOragene/唾液サンプルから抽出したDNAは非常に高分子量であるため、完全に溶解するまでに時間がかかります。 抽出後、DNAを完全に溶解させるために、一晩室温で放置することをお勧めします。 DNAが完全に溶解しない場合、定量精度に影響が出る可能性があります。
以上、DNAサンプルを最適化するための10の方法をご紹介しました。 このリストに何か追加することはありますか?
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