ビタミンDは、脂溶性の構造的に類似したステロール類の総称であり、ホルモンとして作用する。 この検査はビタミンDの状態を評価するための好ましい初期検査であり、体内のビタミンD貯蔵量を最も正確に反映します。

腎疾患がある場合、ビタミンDの状態を適切に評価するために1,25-ジヒドロキシビタミンD（DHVD）レベルの検査が必要になる場合があります。 DHVDの検査だけでは、ビタミンDの貯蔵量の不足を明確に示すことはできない。

体内のビタミンD化合物は、植物から25-ヒドロキシビタミンD2（エルゴカルシフェロールまたはカルシフェロール）として、または動物製品から25-ヒドロキシビタミンD3（コレカルシフェロールまたはカルシジオール）として食事によって外的に得られるものである。 ビタミンDはまた、紫外線にさらされた皮膚で7-ジヒドロコレステロールが25-ヒドロキシビタミンD3に変換されることによって内因的に得られることもある。

25HDNはその後、肝臓で水酸化（CYP2R1）により生成される。 25HDNは、ビタミンDの主な貯蔵・輸送形態であるプロホルモンで、脂肪組織に貯蔵され、循環中は輸送タンパク質によって強固に結合されています。 生物学的活性は、25HDNの活性代謝物であるDHVDの形で表される。 1-α水酸化（CYP27B1）は、生物学的活性を発現する前に、副甲状腺ホルモン（PTH）の制御下で、主に腎臓でオンデマンドに起こる。 他のステロイドホルモンと同様に、DHVDは核内受容体に結合し、標的臓器における遺伝子転写パターンに影響を与える。

25HDNは、（CYP24A1）水酸化によって不活性代謝物の24,25-ジヒドロキシビタミンD（24,25D）に変換されることもある。 このプロセスはPTHによって制御され、代替水酸化（CYP24A1）産物24,25Dを犠牲にしてDHVD合成を増加させるかもしれない。 CYP24A1による25HDNとDHVDの不活性化は、DHVDの過剰生産を防ぎ、結果としてビタミンDの毒性を防ぐ重要なプロセスである。 最適な循環血中25HDN濃度の正確なレベルは、依然として議論のあるところである。 軽度から中等度の欠乏は骨粗鬆症や二次性副甲状腺機能亢進症に関連することがある。 重度の欠乏症は、骨に新しく形成されたオステオイドをミネラル化することができず、小児ではくる病、成人では骨軟化症になることがある。 ビタミンDの欠乏が骨以外の臓器に及ぼす影響については完全には分かっていないが、感染症にかかりやすくなる、筋肉の不快感、結腸癌、乳癌、前立腺癌のリスクが増加する、などの可能性があるとされている。

中程度の25HDN欠乏はよくあることで、施設入所高齢者ではその有病率は50％を超えるかもしれない。 頻度ははるかに低いが、重度の欠乏症もまれではない。 25HDNが不足する理由としては、冬季の北半球では特に問題となる日光への露出不足、不十分な摂取量、吸収不良（例えば、セリアック病による）、進行した肝臓疾患による肝ビタミンD 25-水酸化酵素活性の低下、酵素誘導薬、特にフェニトイン、フェノバルビタル、カルバマゼピンなどの多くの抗てんかん薬、25HDNの代謝を促進する、などがある

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