I legami estere sono stati usati come legami metabolizzabili per ridurre i livelli di radioattività in tessuti non bersaglio dopo la somministrazione di anticorpi marcati con radionuclidi metallici. In questa progettazione radiochimica degli anticorpi, mentre i legami esteri dovrebbero essere scissi rapidamente nei tessuti non bersaglio, un’alta stabilità dei legami esteri nel plasma è anche richiesta per preservare i livelli di radioattività del bersaglio. Per valutare i requisiti strutturali per stabilizzare il legame estere, è stato sviluppato un nuovo agente chelante bifunzionale derivato dal benzil-EDTA con un legame estere, (1-benzil]etilendiammina-N,N,N’,N’ – acido tetraacetico; MESS-Bz-EDTA). MESS-Bz-EDTA è stato accoppiato con un anticorpo monoclonale tiolato (OST7, IgG1) preparato riducendo i suoi legami disolfuro per introdurre il legame estere vicino e prossimale alla molecola dell’anticorpo. Per confronto, l’acido 1-etilendiammina-N,N,N’,N’-tetraacetico (EMCS-Bz-EDTA) e il meleimidoetil 3-iodohippurato (MIH) sono stati accoppiati a OST7 con la stessa chimica di congiunzione. Quando incubato nel plasma murino al 50% o in una soluzione tampone a pH neutro, OST7-MESS-Bz-EDTA-111In ha rilasciato rapidamente la radioattività, e più del 95% della radioattività iniziale è stata liberata dopo un’incubazione di 24 ore in entrambe le soluzioni, a causa di una scissione del legame estere. D’altra parte, solo circa il 20% della radioattività è stato rilasciato da OST7-MIH-131I in entrambe le soluzioni durante lo stesso periodo di incubazione. Negli studi di biodistribuzione sui topi, mentre una clearance della radioattività leggermente più veloce dal sangue con meno livelli di radioattività nel fegato e nei reni è stata osservata con OST7-MIH-131I rispetto a OST7-EMCS-Bz-EDTA-111In, OST7-MESS-Bz-EDTA-111In ha indicato una clearance della radioattività dal sangue molto più veloce e quasi comparabile a quella di OST7-MIH-131I e succinamidobenzyl-EDTA-111In, rispettivamente. Questi risultati, così come i risultati precedenti sugli anticorpi radiomarcati con legami esteri, hanno suggerito che mentre l’introduzione di un legame estere vicino a una molecola di anticorpo stabilizzava il legame estere contro l’accesso dell’esterasi, le strutture chimiche dei legami e i radiomarcatori attaccati ai legami esteri giocano un ruolo significativo nella stabilità chimica del legame estere. Questo può spiegare la diversa stabilità dei legami esteri nei radioimmunoconiugati finora riportati.