Era la figlia di un certo John Duff, ed era sposata con James Gilbert, fabbro. I Gilbert erano coloni pionieri che sbarcarono sulle rive del fiume Yarra e si accamparono il 30 agosto 1835. La goletta Enterprize, di proprietà di John Pascoe Fawkner, aveva portato loro e altri coloni da Launceston, Tasmania, dove aveva sposato James a diciotto anni.

Il gruppo di sbarco iniziale comprendeva il capitano John Lancey, capo del gruppo di sbarco e rappresentante di Fawkner; George Evans, costruttore; i falegnami William Jackson e Robert Hay Marr; l’aratore Charles Wise; il fabbro James Gilbert e sua moglie incinta, Mary; ed Evan Evans, il servo di George Evans.

Il 29 dicembre 1835 Mary diede alla luce suo figlio, James Melbourne Gilbert, il primo bambino europeo nato nel nuovo distretto. Le furono dati 500 acri (200 ettari) di terra e un lotto di terreno in città. Un busto a grandezza naturale di Mary Gilbert si trova al Conservatorio, nei Fitzroy Gardens. La scultura è stata creata dall’artista di Melbourne, Ailsa O’Connor (1921-1980).

Il 30 aprile 1837, Mary diede alla luce un secondo figlio, Charles Phillip Gilbert, anche lui avuto dal marito James. Secondo la trascrizione della sua morte, altri due figli erano John e William.

Anche se James (forse più tardi conosciuto come John) Melbourne Gilbert non era noto per avere prole, suo fratello minore Charles era noto per aver generato almeno otto figli da sua moglie Amelia sia nel Victoria che nel Nuovo Galles del Sud.

Morì accidentalmente in un incendio in un cespuglio a South Talbingo, Tumut River, New South Wales, il 20 febbraio 1878, e fu sepolta a Cumberland Range il 24 febbraio dello stesso anno.