Abstract

Tragikus módon a nemi úton terjedő fertőzések számos régióban még mindig jelentős közegészségügyi problémát jelentenek. Ezt a vizsgálatot a Herpes simplex vírus (HSV), a Chlamydia trachomatis (CT) és a Neisseria gonorrhoeae (NG) méhnyakfertőzés prevalenciájának meghatározására végeztük az Iráni Kórházba (Dubai, Egyesült Arab Emírségek) beutaló házas nők körében. Egy retrospektív keresztmetszeti felmérésbe 201, 16-80 év közötti női beteget vontak be, akiket 2010-ben az Iráni Kórház szülészeti és nőgyógyászati osztályára utaltak be, Dubai, Egyesült Arab Emírségek. A betegeket három korcsoportba sorolták: 15-30 (I. csoport), 31-40 (II. csoport) és 41 évesek (III. csoport). Minden nőtől méhnyak-tamponmintát vettek, és PCR-módszerrel meghatározták a HSV-vel, CT-vel és NG-vel való méhnyakfertőzés prevalenciáját. A HSV-t, CT-t és NG-t a tamponminták 6,5%-ában, 10,4%-ában, illetve 5,5%-ában mutatták ki. Az életkor tekintetében szignifikáns különbséget észleltünk az NG és a HSV prevalenciája tekintetében az I. és III. csoport között. A szexuális úton terjedő betegségek (STD-k) közegészségügyi jelentősége, az életminőségre gyakorolt hosszú távú hatásuk és gazdasági terhük miatt szükségesnek tűnik a megelőzési intézkedések és a nők felvilágosítása.

1. Bevezetés

Tragikus módon a nemi úton terjedő fertőzések számos régióban még mindig jelentős közegészségügyi problémát jelentenek . Az Egyesült Államokban évente több mint 15 millió új szexuális úton terjedő betegséget (STD) jelentettek . A nők körében ezek közül néhány hosszú távú kismedencei gyulladásos betegségekhez, meddőséghez, méhen kívüli terhességhez, dyspareunia és méhnyakrákhoz vezethet . Évente az új nemi betegségek több mint fele a 15 és 24 év közötti fiatalokat érinti. Ezenkívül a fiatal és serdülő nőknél depressziót, alacsony szociális támogatást és kiemelkedő stresszt okozhatnak .

A nemi úton terjedő betegségek többsége, mint például a Herpes simplex vírus (HSV), a Chlamydia trachomatis (CT) és a Neisseria gonorrhoeae (NG) tünetmentesnek bizonyult a nőknél . A genitális herpeszt általában a fejlett és a fejlődő országokban egyaránt gyakori, jelentős morbiditással járó krónikus STD-nek tekintik . A fertőzést kétféle vírus okozza, köztük a HSV-2 (főleg) és a HSV-1 (néha), míg ezek előfordulása és gyakorisága az elmúlt három évtizedben nőtt .

A CT fertőzés a bakteriális STD leggyakoribb oka a világon, különösen a fiatal nőknél . A fertőzés a legtöbb esetben tünetmentes, és hüvelyi, orális vagy anális szexuális érintkezés során terjedhet, és az anya által az újszülöttre is átadható .

A gonorrhoeát NG okozza, és bebizonyosodott, hogy ez a kórokozó képes rezisztenciát kifejleszteni a gyakran használt antimikrobiális szerekkel szemben, különösen a gyógyítatlan betegeknél. Ezek az esetek tovább terjedhetnek és elősegíthetik az antimikrobiális rezisztencia gyors kialakulását . A betegség előfordulási aránya magas, ezért mind a tüneti, mind a tünetmentes fertőzések diagnosztizálása nagy jelentőséggel bír .

Az utóbbi években a gyors kimutatási készleteket és a mérőlapokat a nemi betegségek szűrésének általános, kényelmes és gyors módszereként használják. Az új molekuláris módszerek, mint a PCR, a kvalitatív és kvantitatív valós idejű PCR és a DNS-hibridizáció azonban a szerológiai módszerekhez képest megbízhatóbb technikákként jelentek meg a legkülönbözőbb nemi betegségek diagnosztizálásában. Ezenkívül a kórokozó DNS-szintjének nyomon követése a testnedvekben feltárhatja a betegség állapotát, a gyógyszeres kezelésre adott válaszát és a rezisztenciamintákat .

Dubajban, az Egyesült Arab Emírségekben megváltozott az egyének életmódja. Ezenkívül sok vendégmunkást vagy befektetőt vonzott több mint 100 országból Ázsiából, Afrikából, Európából stb. ebbe a városba. Mivel Dubai a világ 8. leglátogatottabb turisták által látogatott városa, és 2015-ig több mint 15 millió turistát vonzott különböző országokból, ezért az STD-k feltörekvő közegészségügyi problémát jelenthetnek Dubaiban, az Egyesült Arab Emírségekben. A nemi betegségek szűrése a dubaji lakosság körében a közegészségügyi probléma kezelésének első és nagyon kritikus lépése lehet. A tanulmány célja az volt, hogy meghatározza a HSV-vel, CT-vel és NG-vel való méhnyakfertőzés prevalenciáját az Iráni Kórházba (Dubai, Egyesült Arab Emírségek) beutaló házas nők körében.

2. Tárgyak és módszerek

2.1. Vizsgálati populáció

A vizsgálatba 201 olyan 16-80 év közötti ( év) női beteget vontak be, akik 2010-ben a dubaji Iráni Kórház Szülészeti és Nőgyógyászati Osztályára utaltak olyan tünetekkel, mint a nemi szervek területén jelentkező viszketés, dyspareunia, dysuria vagy rendellenes hüvelyi váladékozás. A betegek különböző nemzetiségűek voltak (1. táblázat), és mindannyian házasok. A betegeket három korcsoportba sorolták: 15-30 évesek (I. csoport), 31-40 évesek (II. csoport) és ≥41 évesek (III. csoport). Minden betegtől steril tamponnal méhnyak-tamponmintát vettek, amelyet vírusszállító közegben továbbítottak az Alborzi professzor klinikai mikrobiológiai kutatóközpontjába, a Nemazee kórházba (Shiraz, Irán) további vizsgálat céljából. A vizsgálatot a dubai Iráni Kórház Oktatási és Kutatási Hivatala hagyta jóvá.

2.2. DNS extrakció

A DNS-t 200 μL vírusszállító közegben, Invisorb spin vírus DNS Mini Kit (Invitek, Berlin, Németország) segítségével extraháltuk a tamponmintákból a gyártó protokollja szerint. A CT kimutatásához a lízispuffer-készlethez a valós idejű PCR-készlethez mellékelt standardizált mennyiségű belső kontroll-DNS-t adtunk a kivonások hatékonyságának ellenőrzésére. Az extrakciós folyamatba negatív és pozitív kontrollokat vontunk be.

2.3. Valós idejű kvantitatív PCR a HSV és a CT kimutatására

A valós idejű kvantitatív PCR-t a HSV1 és HSV2 glikoprotein B (gB) régiójára specifikus oligonukleotid primerpárok és szondák segítségével végeztük, a korábban közöltek szerint . A felhasznált primerek a következők voltak: HSVFP (5′TCC CGG TAC GAA GAC CAG3′) és HSVRP (5′AGC AGG CCG CTG TCC TTG3′), a szonda pedig a HSVTCP (5′FAMTGG TCC TCC TCC AGC ATG GTG ATG TTG/C AGG TCGTAMRA3′). A reakciót a következő protokoll szerint hajtottuk végre: 2 perc inkubáció 50°C-on az AmpErase aktiválásához, 10 perc 95°C-on a polimeráz aktiválásához és 45 cikluson keresztül, 15 másodperc 94°C-on a denaturáláshoz és 60 másodperc 58°C-on a lágyításhoz, a hosszabbításhoz és az adatgyűjtéshez. Minden 50 μL PCR-keverék 10 μL tisztított DNS-t, 840 nM koncentrációjú primert és 100 nM szondát tartalmazott 1x TaqMan univerzális PCR master mixben (Applied Biosystems, Branchburg, New Jersey, USA).

A CT kimutatására valós idejű kvantitatív PCR-t végeztünk a CT genomra specifikus oligonukleotid primerpárokkal és szondával az Advanced Kit (PrimerDesign Ltd., Millbrook Technology Campus, South Hampton, UK) segítségével. Az amplifikációt TaqMan univerzális valós idejű PCR master mix reagensekkel (Roche, Branchburg, New Jersey, USA) végeztük. A következő négylépéses protokoll szerint történt: 2 perc inkubáció 50°C-on az AmpErase aktiválásához, 10 perc 95°C-on a polimeráz aktiválásához és 45 cikluson keresztül, 10 másodperc 95°C-on a denaturáláshoz és 60 másodperc 60°C-on a lágyításhoz, a hosszabbításhoz és az adatgyűjtéshez.

Minden amplifikációt Applied Biosystem Sequence Detector 7500 gépen (Applied Biosystems, USA) végeztünk. Minden 20 klinikai minta között negatív kontrollokat is bevontunk az extrakciós folyamatba. Minden negatív mintát kétszer teszteltünk.

2.4. Az NG

NG kimutatása PCR detektáló készlettel (CinnaGen Inc., Irán) történt a gyártó protokolljának megfelelően. A reakcióelegyet 3 percig 94°C-on melegítettük, majd 35 cikluson keresztül inkubáltuk: 94°C 45 másodpercig, 50°C 20 másodpercig és 72°C 30 másodpercig, majd 5 percig 72°C-on további hosszabbítás céljából. A PCR-termékeket 1%-os agaróz gélen elemeztük.

2.5. Statisztikai elemzés

A HSV, CT és NG prevalenciájának korcsoportok közötti különbségeit chi-négyzet teszttel elemeztük. Továbbá a HSV, CT és NG és a gombás-bakteriális méhnyakfertőzés előfordulása közötti összefüggést chi-négyzet teszttel elemeztük. Az összes adatot SPSS szoftverrel elemeztük (SPSS for Windows, 16-os verzió, SPSS Inc., Chicago, IL, USA). Minden értéket statisztikailag szignifikánsnak tekintettünk.

3. Eredmények

A Candida spp. és a Coccobacilli méhnyakfertőzést 45,3%-os prevalenciával gombás-bakteriális fertőzésnek, a nem gombás-bakteriális fertőzést pedig 54,7%-os prevalenciával gombás-bakteriális fertőzésnek tekintettük. A HSV és a CT 13 (6,5%), illetve 21 (10,4%) tamponmintában volt pozitív. A valós idejű PCR-próbával mért HSV-DNS-kópiaszám 3,11 × 103 és 7,18 × 105 kópia/ml között mozgott a vírusszállító közegben (medián 4 × 104 kópia/ml), a CT-DNS-kópiaszám pedig 3,48 × 103 és 7,11 × 106 kópia/ml között mozgott a vírusszállító közegben (medián 3,33 × 105 kópia/ml). NG-t 11 (5,5%) betegnél mutattak ki.

A 2. táblázat a betegségek prevalenciáját mutatja be a különböző korcsoportokban. Egyik betegnél sem volt vegyes fertőzés. A CT prevalenciájában nem volt szignifikáns különbség a különböző korcsoportok között (). Az NG és a HSV prevalenciája nem különbözött szignifikánsan az I. és II., illetve a II. és III. csoport között (); az I. és III. csoport között azonban szignifikáns különbségek voltak (). Ezenkívül a HSV-, CT- és NG-fertőzések prevalenciájának különbségei nem voltak statisztikailag szignifikánsak a gombás-bakteriális méhnyakfertőzéses csoport és a nem gombás-bakteriális csoport között (). A 3. táblázat összehasonlítja az Egyesült Arab Emírségekben, Dubaiban gyűjtött adatainkat a HSV, CT és NG prevalenciájára vonatkozóan a különböző tanulmányokkal.

4. Megbeszélés

A jelenlegi vizsgálatban 201 nőből 6,5%, 10,4% és 5,5% volt fertőzött HSV-vel, CT-vel, illetve NG-vel. A HSV-, CT- és NG-fertőzéssel kapcsolatos jelenlegi eredményeink összhangban vannak a nemi betegségek gyakoriságára vonatkozó korábbi felmérésekkel. Nemrégiben hasonló felmérés 509 nő 7%-ában találtak HSV-2 DNS-t az USA-ban . Egy korábbi törökországi vizsgálat kimutatta, hogy az alacsony kockázatú nők 12,7%-a volt CT-vel fertőzött . Gaydos és munkatársai arról számoltak be, hogy az általuk vizsgált női populáció 3,8%-a volt fertőzött NG-vel .

A korábbi irodalmak azt jelezték, hogy a HSV, CT és NG fertőzések többsége tünetmentes és hosszú távú lehet . Hasonlóképpen, a jelen vizsgálatban a nők egyike sem volt tudatában a fertőzésének a szűrővizsgálat előtt, azonban néhány klinikai tünet látható volt. A nemi úton terjedő betegségek előfordulása következetesen nagyobb volt a magas kockázatú populációkban, mint az alacsonyabb kockázatúnak tekintett populációkban. A nemi úton terjedő betegségekkel kapcsolatos, gyakran említett kockázati tényezők közé tartozik a nőtlen státusz és a több szexuális partner . A hollandiai Amszterdamban a HSV-1 vagy HSV-2 legmagasabb prevalenciáját a legfiatalabb korcsoportokban észlelték, míg a tinédzserek és a húszas éveikben járó felnőttek prevalenciája 5,26%, illetve 4,31% volt . Peruban a fertőzés előfordulási gyakorisága a CT-fertőzött nőknél 6-5%, a NG-fertőzötteknél pedig 0-1% volt . Dél-Koreában a CT általános kimutatási aránya 2,4%, a II. típusú HSV esetében pedig 0,8% volt . Tunéziai női szexmunkások körében a CT, NG és HSV-2 PCR a nők 72,9%-ánál, 11,2%-ánál, illetve 1,1%-ánál volt pozitív .

Noha korábbi tanulmányok kimutatták, hogy a fiatal életkor összefügg a CT pozitív eredményével, vannak olyan felmérések, amelyek nem jelentettek összefüggést az életkor és a betegség előfordulása között . Hasonlóképpen a mi eredményeink is azt mutatták, hogy a CT prevalenciájában nem volt jelentős különbség a különböző korcsoportok között.

Változatos tanulmányok azt mutatták, hogy a HSV prevalenciája a legtöbb földrajzi területen következetesen nőtt az életkorral . A várakozásoknak megfelelően a jelen vizsgálat eredményei azt mutatták, hogy a HSV prevalenciája szignifikánsan magasabb volt a III. csoportban az I. csoporthoz képest . Egy hasonló bangladesi vizsgálat kimutatta, hogy a HSV-2 antitestek prevalenciája alacsony volt a 20 évnél fiatalabb házas nők körében . Következésképpen ez a prevalencia az életkorral nőtt, ami összefügghet a nők szexuálisan aktív éveinek időtartamával.

Ezzel szemben a mi eredményeink azt mutatták, hogy a NG prevalenciája csökkent az életkorral, és jelentős különbség volt a fertőzés prevalenciájában az I. és a III. csoport között, és a fertőzés a fiatal nőknél gyakoribb volt. Ez az eredmény nincs összhangban egy másik vizsgálattal . Nigériában az NG-fertőzés gyakoribb volt a 25 éves nőknél .

Egy Kínában a női szexmunkások körében végzett vizsgálat kimutatta, hogy a vizsgált populáció 8%-a volt fertőzött NG-vel, ami közel állt a fiatal nők fertőzési arányához. Bár a jelen vizsgálatban részt vevő nők mindegyike házas volt, és nem voltak családon kívüli szexuális kapcsolataik, a nemi úton terjedő betegségek prevalenciája magas volt ezeknél a betegeknél. A partner szexuális kapcsolatát azonban értékelni kell. Egy korábbi franciaországi felmérés azt jelezte, hogy a terméketlen párok 111 tünetmentes férfi partnere között a PCR COBAS AMPLICOR és a szerológiai tesztek segítségével a betegek 6,3%-ánál, illetve 4,5%-ánál mutatták ki a CT-t . Ezért úgy tűnik, hogy a szexuális partnerek monitorozása elengedhetetlen a nemi betegségek megelőzésében.

Gombás-bakteriális méhnyakfertőzést találtak a vizsgált populáció 45,3%-ánál, de a HSV, CT és NG fertőzések prevalenciájában nem volt jelentős különbség a gombás-bakteriális méhnyakfertőzéses és a nem gombás-bakteriális csoport között. Kimutatták, hogy előfordulhatnak bakteriális vagy gombás vaginosis és STD-k vegyes fertőzései, például HSV, CT, NG és T. vaginalis . További vizsgálatokra van szükség a bakteriális és gombás méhnyakfertőzés szerepének átfogó értékeléséhez a HSV, CT, NG és más STD-k patogenezisében. A nemi úton terjedő betegségek előfordulásának és gyakoriságának nyomon követése a lakosság és különösen a fiatalok körében segítené a kormányzati hatóságokat a megelőző stratégiák és erőfeszítések végrehajtásában és értékelésében. A nemi betegségek életminőségre gyakorolt jelentős és hosszan tartó hatása, valamint a magas orvosi költségek miatt a nemi betegségek okozta gazdasági veszteségek miatt világszerte szükség van a nemi betegségek pontos értékelésére. Jerman és munkatársai arról számoltak be, hogy 2005-ben Kaliforniában 1,1 millió új nemi úton terjedő betegség fordult elő a fiatal betegek körében, amelynek közvetlen orvosi költsége 1,1 milliárd USD volt. Ráadásul a tünetekkel járó STD-k csupán a jéghegy csúcsát jelentik, és e betegségek többsége tünetmentes. A nemi betegségek szűrési programjai tehát minden országban fontosak, hogy megelőzzék a betegség terjedését, és segítsék a tudósokat az új kezelési protokollok megtervezésében. A nemi betegségek közegészségügyi jelentősége miatt szükségesnek tűnnek a megelőző intézkedések és a nők felvilágosítása.

Érdekütközés

A szerzők kijelentik, hogy nincs érdekellentét e cikk publikálásával kapcsolatban.

Köszönet

A szerzők köszönik az iráni kórházi együttműködést, különösen a patológiai és a szülészeti és nőgyógyászati osztályok együttműködését.