Abstract

Tragischerweise stellen Infektionen des Genitaltrakts in vielen Regionen immer noch ein großes Problem für die öffentliche Gesundheit dar. Diese Studie wurde durchgeführt, um die Prävalenz von Infektionen des Gebärmutterhalses mit Herpes-simplex-Viren (HSV), Chlamydia trachomatis (CT) und Neisseria gonorrhoeae (NG) bei verheirateten Frauen zu bestimmen, die sich an ein iranisches Krankenhaus in Dubai, VAE, wenden. In einer retrospektiven Querschnittserhebung wurden 201 Patientinnen im Alter von 16-80 Jahren erfasst, die im Jahr 2010 in die Abteilung für Geburtshilfe und Gynäkologie des Iranian Hospital, Dubai, VAE, überwiesen wurden. Die Patientinnen wurden in drei Altersgruppen eingeteilt: 15-30 (Gruppe I), 31-40 (Gruppe II) und 41 Jahre alt (Gruppe III). Von jeder Frau wurde ein Abstrich vom Gebärmutterhals entnommen, und die Prävalenz einer Infektion des Gebärmutterhalses mit HSV, CT und NG wurde mittels PCR-Methode bestimmt. HSV, CT und NG wurden in 6,5 %, 10,4 % bzw. 5,5 % der Abstrichproben nachgewiesen. Hinsichtlich des Alters wurde ein signifikanter Unterschied bei der Prävalenz von NG und HSV zwischen den Gruppen I und III festgestellt. Aufgrund der Bedeutung der sexuell übertragbaren Krankheiten für die öffentliche Gesundheit, ihrer lang anhaltenden Auswirkungen auf die Lebensqualität und ihrer wirtschaftlichen Belastung erscheinen Präventionsmaßnahmen und die Aufklärung von Frauen notwendig.

1. Einleitung

Tragischerweise stellen Infektionen des Genitaltrakts in vielen Regionen immer noch ein großes Problem für die öffentliche Gesundheit dar. Jährlich werden in den Vereinigten Staaten mehr als 15 Millionen neue Fälle von sexuell übertragbaren Krankheiten (STDs) gemeldet. Bei Frauen können einige von ihnen langfristig zu Beckenentzündungen, Unfruchtbarkeit, Eileiterschwangerschaften, Dyspareunie und Gebärmutterhalskrebs führen. Jedes Jahr treten mehr als die Hälfte aller neuen Fälle von Geschlechtskrankheiten bei jungen Menschen zwischen 15 und 24 Jahren auf. Darüber hinaus können sie bei jungen und heranwachsenden Frauen zu Depressionen, geringer sozialer Unterstützung und erheblichem Stress führen.

Die meisten Geschlechtskrankheiten wie das Herpes-simplex-Virus (HSV), Chlamydia trachomatis (CT) und Neisseria gonorrhoeae (NG) sind bei Frauen nachweislich asymptomatisch. Herpes genitalis gilt sowohl in den Industrieländern als auch in den Entwicklungsländern als eine häufige chronische Geschlechtskrankheit mit erheblicher Morbidität. Die Infektion wird durch zwei Virustypen verursacht, darunter HSV-2 (hauptsächlich) und HSV-1 (manchmal), wobei ihre Prävalenz und Inzidenz in den letzten drei Jahrzehnten zugenommen haben.

CT-Infektion ist die häufigste Ursache für bakterielle STD in der Welt, insbesondere bei jungen Frauen. Die Infektion ist in den meisten Fällen asymptomatisch und kann bei vaginalem, oralem oder analem Sexualkontakt übertragen werden und auch von der Mutter auf das Neugeborene übergehen.

Gonorrhoe wird durch NG verursacht, und es wurde nachgewiesen, dass dieser Erreger das Potenzial hat, eine Resistenz gegen häufig verwendete antimikrobielle Mittel zu entwickeln, insbesondere bei unbehandelten Patienten. Diese Fälle können weiter übertragen werden und die rasche Entstehung von Resistenzen gegen antimikrobielle Mittel fördern. Die Inzidenzrate der Krankheit ist hoch; daher ist die Diagnose sowohl symptomatischer als auch asymptomatischer Infektionen von großer Bedeutung.

In den letzten Jahren wurden Schnellnachweiskits und Dipsticks als gängige, bequeme und schnelle Methoden zum Screening auf Geschlechtskrankheiten verwendet. Neue molekulare Methoden wie PCR, qualitative und quantitative Echtzeit-PCR und DNA-Hybridisierung wurden jedoch als zuverlässigere Techniken zur Diagnose einer Vielzahl von STDs im Vergleich zu serologischen Methoden eingeführt. Außerdem kann die Überwachung des DNA-Gehalts eines Erregers in Körperflüssigkeiten Aufschluss über den Status der Krankheit, ihre Reaktion auf Medikamente und ihre Resistenzmuster geben.

In Dubai, VAE, hat sich der Lebensstil der Menschen verändert. Darüber hinaus wurden viele Wanderarbeiter und Investoren aus mehr als 100 Ländern aus Asien, Afrika, Europa usw. in diese Stadt gelockt. Da Dubai auf Platz 8 der von Touristen am häufigsten besuchten Städte der Welt liegt und bis 2015 mehr als 15 Millionen Touristen aus verschiedenen Ländern angezogen hat, können Geschlechtskrankheiten in Dubai ein neues Problem für die öffentliche Gesundheit darstellen. Das Screening von Geschlechtskrankheiten in der Bevölkerung Dubais kann der erste und entscheidende Schritt zur Bewältigung eines Problems der öffentlichen Gesundheit sein. Ziel dieser Studie war es, die Prävalenz von Gebärmutterhalsinfektionen mit HSV, CT und NG bei verheirateten Frauen zu bestimmen, die sich an ein iranisches Krankenhaus in Dubai, VAE, wenden.

2. Probanden und Methoden

2.1. Studienpopulation

Die Studie umfasste 201 Patientinnen im Alter von 16-80 Jahren, die sich 2010 mit Symptomen wie Juckreiz im Genitalbereich, Dyspareunie, Dysurie oder abnormalem Scheidenausfluss in die Abteilung für Geburtshilfe und Gynäkologie des Iranian Hospital, Dubai, einwiesen. Die Patientinnen stammten aus verschiedenen Ländern (Tabelle 1) und waren allesamt verheiratet. Die Patientinnen wurden in drei Altersgruppen eingeteilt: 15-30 (Gruppe I), 31-40 (Gruppe II) und ≥41 Jahre alt (Gruppe III). Von allen Patientinnen wurde ein steriler Abstrich vom Gebärmutterhals entnommen und in einem viralen Transportmedium zur weiteren Untersuchung an das Professor Alborzi Clinical Microbiology Research Center, Nemazee Hospital, Shiraz, Iran, geschickt. Die Studie wurde vom Amt für Bildung und Forschung des Iranischen Krankenhauses, Dubai, genehmigt.

2.2. DNA-Extraktion

DNA wurde aus Abstrichproben in 200 μl viralen Transportmediums mit dem Invisorb spin virus DNA Mini Kit (Invitek, Berlin, Deutschland) gemäß dem Protokoll des Herstellers extrahiert. Zum Nachweis von CT wurde eine standardisierte Menge interner Kontroll-DNA, die mit dem Real-Time-PCR-Kit geliefert wurde, dem Lysepuffer-Kit hinzugefügt, um die Effizienz der Extraktionen zu überwachen. Negative und positive Kontrollen wurden in den Extraktionsprozess einbezogen.

2.3. Quantitative Echtzeit-PCR zum Nachweis von HSV und CT

Die quantitative Echtzeit-PCR wurde unter Verwendung von Oligonukleotid-Primerpaaren und Sonden durchgeführt, die spezifisch für die Region des Glykoproteins B (gB) von HSV1 und HSV2 sind, wie bereits berichtet. Die verwendeten Primer waren HSVFP (5′TCC CGG TAC GAA GAC CAG3′) und HSVRP (5′AGC AGG CCG CTG TCC TTG3′), und die Sonde war HSVTCP (5′FAMTGG TCC TCC AGC ATG GTG ATG TTG/C AGG TCGTAMRA3′). Die Reaktion wurde nach folgendem Protokoll durchgeführt: 2 Minuten Inkubation bei 50 °C für die AmpErase-Aktivierung, 10 Minuten bei 95 °C für die Polymerase-Aktivierung und für 45 Zyklen, 15 Sekunden bei 94 °C für die Denaturierung und 60 Sekunden bei 58 °C für das Annealing, die Verlängerung und die Datenerfassung. Jede 50 μL PCR-Mischung enthielt 10 μL gereinigte DNA, 840 nM Konzentration jedes Primers und 100 nM Sonde in 1x TaqMan Universal PCR Master Mix (Applied Biosystems, Branchburg, New Jersey, USA).

Für den Nachweis von CT wurde eine quantitative Echtzeit-PCR mit für das CT-Genom spezifischen Oligonukleotid-Primerpaaren und Sonde mittels Advanced Kit (PrimerDesign Ltd., Millbrook Technology Campus, South Hampton, UK) durchgeführt. Die Amplifikation wurde mit TaqMan universal real time PCR master mix Reagenzien (Roche, Branchburg, New Jersey, USA) durchgeführt. Die Amplifikation erfolgte nach folgendem vierstufigen Protokoll: 2 Minuten Inkubation bei 50°C für die AmpErase-Aktivierung, 10 Minuten bei 95°C für die Polymerase-Aktivierung und 45 Zyklen, 10 Sekunden bei 95°C für die Denaturierung und 60 Sekunden bei 60°C für Annealing, Extension und Datenerfassung.

Alle Amplifikationen wurden in einem Applied Biosystem Sequence Detector 7500 Gerät (Applied Biosystems, USA) durchgeführt. Zwischen jeweils 20 klinischen Proben wurden Negativkontrollen in den Extraktionsprozess einbezogen. Alle negativen Proben wurden zweimal getestet.

2.4. Der Nachweis von NG

NG wurde mit einem PCR-Nachweiskit (CinnaGen Inc., Iran) gemäß dem Protokoll des Herstellers nachgewiesen. Die Reaktionsmischung wurde 3 Minuten lang auf 94°C erhitzt und dann für 35 Zyklen bei 94°C für 45 Sekunden, 50°C für 20 Sekunden und 72°C für 30 Sekunden und für 5 Minuten bei 72°C für eine zusätzliche Verlängerung inkubiert. Die PCR-Produkte wurden auf einem 1%igen Agarosegel analysiert.

2.5. Statistische Analyse

Die Unterschiede in der Prävalenz von HSV, CT und NG zwischen den Altersgruppen wurden mit dem Chi-Quadrat-Test analysiert. Außerdem wurde der Zusammenhang zwischen HSV, CT und NG und dem Auftreten einer pilzbakteriellen Zervixinfektion mit dem Chi-Quadrat-Test analysiert. Die gesamten Daten wurden mit der SPSS-Software (SPSS für Windows, Version 16, SPSS Inc., Chicago, IL, USA) ausgewertet. Alle Werte wurden als statistisch signifikant angesehen.

3. Ergebnisse

Candida spp. und Coccobacilli zervikale Infektion wurden als Pilz-Bakterien-Infektion mit einer Prävalenz von 45,3% und nicht-Pilz-Bakterien-Infektion mit einer Prävalenz von 54,7% betrachtet. HSV und CT waren in 13 (6,5 %) bzw. 21 (10,4 %) Abstrichproben positiv. Die mit dem Real-Time-PCR-Assay gemessene Kopienzahl der HSV-DNA reichte von 3,11 × 103 bis 7,18 × 105 Kopien/ml im viralen Transportmedium (Median 4 × 104 Kopien/ml) und die CT-DNA-Kopienzahl reichte von 3,48 × 103 bis 7,11 × 106 Kopien/ml im viralen Transportmedium (Median 3,33 × 105 Kopien/ml). NG wurde bei 11 (5,5 %) Patienten nachgewiesen.

Tabelle 2 zeigt die Prävalenz der Krankheiten in verschiedenen Altersgruppen. Keiner der Patienten hatte Mischinfektionen. Es gab keine signifikanten Unterschiede in der Prävalenz von CT zwischen den verschiedenen Altersgruppen (). Die Prävalenz von NG und HSV unterschied sich nicht signifikant zwischen den Gruppen I und II sowie II und III (); es gab jedoch signifikante Unterschiede zwischen den Gruppen I und III (). Darüber hinaus waren die Unterschiede in der Prävalenz von HSV-, CT- und NG-Infektionen zwischen der Gruppe mit Pilz- und Bakterieninfektionen am Gebärmutterhals und der Gruppe ohne Pilz- und Bakterieninfektionen statistisch nicht signifikant (). Tabelle 3 vergleicht unsere Daten in Dubai, VAE, zur Prävalenz von HSV, CT und NG mit verschiedenen Studien.

4. Diskussion

In der aktuellen Studie waren von 201 Frauen 6,5 %, 10,4 % und 5,5 % mit HSV, CT bzw. NG infiziert. Die vorliegenden Ergebnisse zu HSV-, CT- und NG-Infektionen stimmen mit früheren Erhebungen über die Prävalenz von Geschlechtskrankheiten überein. Erst kürzlich wurde in einer ähnlichen Untersuchung bei 7 % von 509 Frauen in den USA HSV-2-DNA nachgewiesen. Eine frühere Studie in der Türkei ergab, dass 12,7 % der Frauen mit niedrigem Risiko mit CT infiziert waren. Gaydos et al. berichteten, dass 3,8 % der von ihnen untersuchten Frauen mit NG infiziert waren.

Vorangegangene Veröffentlichungen wiesen darauf hin, dass die Mehrheit der HSV-, CT- und NG-Infektionen asymptomatisch und von langer Dauer sein können. Auch in der vorliegenden Studie war sich keine der Frauen ihrer Infektion bewusst, bevor sie sich dem Screening unterzog; einige klinische Symptome waren jedoch sichtbar. Die Prävalenz von Geschlechtskrankheiten war in Hochrisikopopulationen durchweg höher als in Bevölkerungsgruppen, die als weniger gefährdet gelten. Zu den häufig genannten Risikofaktoren im Zusammenhang mit Geschlechtskrankheiten gehören der Status als unverheiratete Frau und mehrere Sexualpartner. In Amsterdam, Niederlande, wurde die höchste Prävalenz von HSV-1 oder HSV-2 in den jüngsten Altersgruppen festgestellt, während Jugendliche und Erwachsene in den Zwanzigern eine Prävalenz von 5,26 % bzw. 4,31 % aufwiesen. In Peru lag die Prävalenz der Infektion bei Frauen mit CT-Infektion bei 6-5 % und mit NG-Infektion bei 0-1 %. In Südkorea lag die Gesamtnachweisrate für CT bei 2,4 % und für HSV Typ II bei 0,8 %. Bei tunesischen Sexarbeiterinnen waren CT, NG und HSV-2 PCR bei 72,9 %, 11,2 % bzw. 1,1 % der Frauen positiv.

Obwohl frühere Studien gezeigt haben, dass junges Alter mit positiven CT-Ergebnissen assoziiert ist, gibt es einige Erhebungen, die keine Korrelation zwischen dem Alter und der Prävalenz der Krankheit feststellen. In ähnlicher Weise zeigten unsere Ergebnisse, dass es keinen signifikanten Unterschied in der Prävalenz von CT zwischen verschiedenen Altersgruppen gab.

Verschiedene Studien zeigten, dass die HSV-Prävalenz in den meisten geografischen Gebieten mit dem Alter konsequent anstieg. Eine ähnliche Studie in Bangladesch ergab, dass die Prävalenz von HSV-2-Antikörpern bei verheirateten Frauen, die jünger als 20 Jahre alt waren, niedrig war. Folglich stieg die Prävalenz mit dem Alter an, was mit der Dauer der sexuell aktiven Jahre bei den Frauen zusammenhängen könnte.

Im Gegensatz dazu zeigten unsere Ergebnisse, dass die Prävalenz von NG mit dem Alter abnahm und es einen signifikanten Unterschied in der Prävalenz der Infektion zwischen den Gruppen I und III gab, wobei die Infektion bei jungen Frauen häufiger auftrat. Dieses Ergebnis steht im Widerspruch zu einer anderen Studie. In Nigeria war die NG-Infektion bei Frauen im Alter von 25 Jahren am häufigsten.

Eine Studie in China unter weiblichen Sexarbeitern zeigte, dass 8 % der untersuchten Populationen mit NG infiziert waren, was der Infektionsrate bei jungen Frauen nahe kam. Obwohl alle Frauen in der vorliegenden Studie verheiratet waren und keine sexuellen Beziehungen außerhalb der Familie hatten, war die Prävalenz von Geschlechtskrankheiten bei diesen Patienten hoch. Allerdings muss die sexuelle Beziehung des Partners bewertet werden. Eine frühere Untersuchung in Frankreich ergab, dass bei 111 asymptomatischen männlichen Partnern von unfruchtbaren Paaren bei 6,3 % der Patienten durch die PCR COBAS AMPLICOR und bei 4,5 % durch serologische Tests CT nachgewiesen wurde. Es scheint daher, dass die Überwachung der Sexualpartner für die Prävention von Geschlechtskrankheiten von wesentlicher Bedeutung ist.

Pilz-bakterielle Gebärmutterhalsinfektionen wurden bei 45,3 % der untersuchten Bevölkerung festgestellt, aber es gab keine signifikanten Unterschiede in der Prävalenz von HSV-, CT- und NG-Infektionen zwischen der Gruppe mit pilz-bakteriellen Gebärmutterhalsinfektionen und der Gruppe mit nicht pilz-bakteriellen Infektionen. Es wurde gezeigt, dass Mischinfektionen mit bakterieller oder pilzbedingter Vaginose und Geschlechtskrankheiten wie HSV, CT, NG und T. vaginalis vorkommen können. Weitere Untersuchungen sind erforderlich, um die Rolle bakterieller und pilzbedingter Gebärmutterhalsinfektionen bei der Entstehung von HSV, CT, NG und anderen STDs umfassend zu bewerten. Die Überwachung der Prävalenz und Inzidenz von Geschlechtskrankheiten in der Bevölkerung und insbesondere bei Jugendlichen würde den staatlichen Behörden helfen, Präventionsstrategien und -maßnahmen durchzuführen und zu bewerten. Aufgrund der beträchtlichen und lang anhaltenden Auswirkungen von Geschlechtskrankheiten auf die Lebensqualität und des wirtschaftlichen Verlusts durch hohe medizinische Kosten ist eine genaue Bewertung von Geschlechtskrankheiten in der ganzen Welt erforderlich. Jerman et al. berichteten, dass im Jahr 2005 in Kalifornien 1,1 Millionen neue Fälle von Geschlechtskrankheiten bei jungen Patienten auftraten, die direkte medizinische Kosten in Höhe von 1,1 Milliarden US-Dollar verursachten. Außerdem sind die symptomatischen STD nur die Spitze des Eisbergs, und die meisten dieser Krankheiten sind asymptomatisch. Daher sind Screening-Programme für Geschlechtskrankheiten in allen Ländern wichtig, um die Übertragung der Krankheit zu verhindern und den Wissenschaftlern zu helfen, neue Behandlungsprotokolle zu planen. Aufgrund der Bedeutung von Geschlechtskrankheiten für die öffentliche Gesundheit scheinen Präventionsmaßnahmen und die Aufklärung von Frauen notwendig zu sein.

Interessenkonflikt

Die Autoren erklären, dass es keinen Interessenkonflikt in Bezug auf die Veröffentlichung dieser Arbeit gibt.

Danksagung

Die Autoren bedanken sich für die Zusammenarbeit mit dem iranischen Krankenhaus, insbesondere mit den Abteilungen für Pathologie und Geburtshilfe und Gynäkologie.