Findings

Après une blessure aux nerfs périphériques, un modèle séquentiel de dégénérescence axonale et de dégradation de la myéline, suivi d’une régénération rapide, est initié . Le processus inflammatoire et ses médiateurs ont été impliqués dans la régulation des processus dégénératifs et régénératifs axonaux après une blessure . L’un des médiateurs inflammatoires qui pourrait jouer un rôle important au cours de ces processus est l’enzyme cyclooxygénase-2 (COX-2), responsable du métabolisme de l’acide arachidonique de la membrane cellulaire en prostaglandines, entre autres effets pro-inflammatoires.

La COX-2 est régulée à la hausse et la production de prostaglandines augmente dans les macrophages et les cellules de Schwann, après divers types de lésions nerveuses périphériques . Les études sur la régulation de la COX-2 pendant la régénération axonale se sont principalement concentrées sur sa participation à l’induction de la douleur neuropathique, plutôt que sur le processus de régénération lui-même. Cependant, le fait que la COX-2 soit si fortement régulée à la hausse après une lésion nerveuse, et également capable de moduler les médiateurs inflammatoires tels que les cytokines pro-inflammatoires, suggère un rôle important pour cette enzyme dans l’évolution de la régénération nerveuse également .

Le célécoxib (CLX) est un inhibiteur sélectif de la COX-2 avec de puissantes propriétés anti-inflammatoires et analgésiques . Le CLX a montré des propriétés neuroprotectrices dans des modèles d’ischémie cérébrale et de névrite inflammatoire expérimentale . L’utilisation du CLX s’est également avérée efficace pour réduire la douleur neuropathique après une lésion des nerfs périphériques chez le rat. Une étude récente a montré que l’acide acétylsalicylique, un inhibiteur non sélectif de la COX, pouvait accélérer la récupération fonctionnelle après une lésion par écrasement d’un nerf chez le rat, bien que l’on pense que d’autres mécanismes d’action soient impliqués . Cependant, les effets du CLX sur la récupération fonctionnelle après une lésion nerveuse périphérique n’ont, à notre connaissance, jamais été étudiés auparavant. Dans cette étude, nous avons étudié les effets du CLX sur la récupération fonctionnelle après une lésion du nerf périphérique en utilisant un modèle d’écrasement du nerf sciatique chez le rat.

Les procédures animales ont été effectuées conformément à l’utilisation et aux soins appropriés des animaux de laboratoire. Dans cette étude, 15 rats Wistar mâles (250-300 g) ont été utilisés. Les animaux ont été maintenus dans une pièce à température contrôlée, selon un cycle lumière/obscurité de 12 heures, avec un accès à la nourriture et à l’eau ad libitum.

Les animaux ont été répartis au hasard en 3 groupes différents : Expérimental (n = 5), Contrôle (n = 5) et groupe Sham (n = 5). Dans les groupes expérimental et témoin, l’écrasement unilatéral du nerf sciatique a été effectué comme suit : Après une anesthésie au pentobarbital (Anestesal, Pfizer Inc, Mexico) (50 mg/kg ip), une petite incision est pratiquée dans la partie supérieure de l’étui, et les muscles sont séparés afin d’exposer le nerf sciatique. Les nerfs sont ensuite écrasés à l’aide d’une pince hémostatique non dentelée de 1 mm de large, à une force normalisée, au niveau du demi-étroit, pendant 30 secondes. Dans le groupe fictif, le nerf sciatique est exposé mais n’est pas écrasé. Ensuite, le muscle et la peau sont suturés séparément, et l’animal est laissé en convalescence dans des cages individuelles. Cette blessure par écrasement peut être utilisée comme modèle d’axonotmèse pour étudier la récupération de la fonction nerveuse.

Les animaux du groupe expérimental ont reçu du CLX (Celebrex®, Pfizer Inc, Mexique) (10 mg/kg ip) immédiatement avant et quotidiennement pendant 7 jours après la blessure. Le groupe témoin a reçu une solution saline normale aux mêmes périodes.

L’évaluation de l’indice fonctionnel sciatique (SFI), une évaluation fiable de la récupération nerveuse , a été réalisée chez tous les animaux au jour 0 (avant la chirurgie) et aux jours 1, 7, 14 et 21 après la chirurgie. Les pieds postérieurs des rats ont été marqués à l’encre noire soluble dans l’eau, puis l’animal a été autorisé à marcher librement sur une allée confinée de 12 cm de large et de 50 cm de long en laissant ses empreintes sur un morceau de papier blanc recouvrant le sol de l’allée. La distance entre le talon et l’extrémité du troisième orteil ainsi que l’écartement des orteils et l’écartement intermédiaire des orteils, définis comme la distance entre le premier et le cinquième orteil et entre le deuxième et le quatrième orteil, respectivement, ont été mesurés à 0,5 mm près. Les membres normaux et les membres blessés ont été évalués. Nous avons mesuré 3 empreintes par membre et par animal, puis nous avons fait la moyenne des valeurs afin de calculer le SFI pour chaque animal, en utilisant une formule décrite ailleurs. Un SFI proche de 100 indique une déficience grave tandis qu’un SFI proche de 0 est considéré comme normal.

La récupération fonctionnelle a également été examinée en enregistrant le jour de l’apparition de la motricité et de la marche chez tous les animaux, comme décrit par Gold et al . Deux observateurs en aveugle examinent quotidiennement la récupération et enregistrent le nombre de jours nécessaires à chaque animal pour être capable de redresser le pied et de bouger les orteils (début de la motricité), et de marcher en utilisant le pied et les orteils du membre postérieur lésé (début de la marche). Les valeurs sont ensuite moyennées afin de calculer la moyenne pour chaque groupe, puis comparées.

Les changements de SFI au fil du temps ont été comparés entre les groupes en utilisant une analyse de variance (ANOVA) à mesures répétées à 2 voies. Lorsque l’ANOVA a montré une différence significative entre les groupes, nous avons appliqué un test post hoc de Tukey pour trouver la localisation de la différence. L’ANOVA à une voie a été utilisée pour comparer le début de la motricité et de la marche entre le groupe témoin et le groupe expérimental. Les données ont été analysées à l’aide du logiciel statistique SPSS 11.0 (SPSS Inc. Software, Chicago, Illinois, USA), et toutes les valeurs sont exprimées en moyenne +/- SD et P < 0,05 a été considéré comme statistiquement significatif.

Avant la chirurgie, tous les animaux avaient des valeurs SFI proches de 0 (normal), et immédiatement après l’écrasement du nerf des valeurs supérieures à 90 (sévèrement altéré), sans différence statistique entre les groupes. Par la suite, à partir du jour 1 et jusqu’au dernier jour de l’étude, les rats du groupe expérimental ont montré une récupération significativement plus rapide par rapport au groupe témoin (P = 0,02, ANOVA à mesures répétées entre les sujets), avec des tests post hoc montrant une différence significative au jour 7 (80.2 +/- 6,3 vs. 66 +/- 12,1 ; P = 0,04). Le début de la journée de motricité et de marche a été atteint plus tôt chez les rats du groupe expérimental par rapport au groupe témoin, n’étant statistiquement significatif que pour le début de la motricité (11,4 +/- 1,1 vs. 13,6 +/- 1,8). Le groupe Sham a présenté des valeurs normales de SFI tout au long de l’étude (tableau (tableau11).

Nos résultats montrent que le CLX peut accélérer la récupération fonctionnelle après écrasement du nerf sciatique chez le rat. Cependant, la petite taille de notre échantillon et l’écart-type important sont des faiblesses statistiques de notre étude, et l’absence de preuves histologiques ou électrophysiologiques nous empêche de conclure que le CLX a des effets similaires sur la régénération axonale. Il a été démontré que la COX-2 modulait la neuroinflammation dans divers troubles neurologiques et les cytokines pro-inflammatoires ont été impliquées dans l’orchestration du processus inflammatoire qui conduit à la dégénérescence et à la régénération après une lésion nerveuse. L’une de ces cytokines, le facteur de nécrose tumorale alpha (TNF-alpha), est connue pour induire l’activation du facteur nucléaire kappab (NF-kappab), un facteur de transcription qui favorise la production de cytokines pro-inflammatoires dans les cellules inflammatoires. Des preuves récentes ont montré que le CLX peut inhiber l’activation du NF-kappaB dépendante du TNF-alpha, ce qui entraîne une forte activité anti-inflammatoire. Les macrophages et les cellules de Schwann jouent également des rôles essentiels dans la dégénérescence et la régénération axonale dans les nerfs périphériques blessés et la COX-2 est régulée à la hausse dans ces deux cellules au cours de l’inflammation des nerfs périphériques. De plus, il a été démontré que l’inhibition de la COX-2 inhibe l’activité neurotoxique des macrophages et des cellules gliales dans les neurones in vitro. La question de savoir si l’un de ces effets est le mécanisme responsable des résultats de notre étude nécessite des investigations supplémentaires. Néanmoins, nos résultats suggèrent que le CLX peut modifier de manière bénéfique le cours de la récupération fonctionnelle après une lésion du nerf périphérique.