Milieux à gradient de densité et centrifugation pour l’isolement des cellules
La centrifugation à gradient de densité est couramment utilisée pour l’isolement de populations cellulaires spécifiques à partir du sang total. Cette technique tire parti des différences de densité entre les divers leucocytes et le milieu à gradient de densité. Par conséquent, les populations cellulaires particulières isolées dépendront de la densité du milieu utilisé.
Pour isoler des cellules mononucléaires (MNC) à partir de sang périphérique, de sang de cordon et de moelle osseuse, il est recommandé d’utiliser des milieux ayant une densité de 1,077 g/mL, tels que Lymphoprep™ ou Ficoll-Paque™. Pour cette application particulière, le sang dilué est superposé au milieu à gradient de densité et les échantillons sont centrifugés. Les granulocytes et les érythrocytes ont une densité plus élevée que les cellules mononucléaires et pendant la centrifugation, ils sédimentent à travers la couche de milieu de densité. Les cellules mononucléaires moins denses restent à l’interface plasma-milieu dense. Ce processus est grandement facilité par la réalisation de la centrifugation en gradient de densité dans un tube SepMate™. Pour plus de détails sur la réalisation de cette technique, regardez cette vidéo sur la façon d’isoler les MNC à partir du sang total en utilisant la centrifugation par gradient de densité.