Lipofectamine ou Lipofectamine 2000 est un réactif de transfection commun, produit et vendu par Invitrogen, utilisé en biologie moléculaire et cellulaire. Il est utilisé pour augmenter l’efficacité de transfection de l’ARN (y compris l’ARNm et l’ARNsi) ou de l’ADN plasmidique dans des cultures cellulaires in vitro par lipofection. La lipofectamine contient des sous-unités lipidiques qui peuvent former des liposomes dans un environnement aqueux, qui piègent la charge utile de transfection, par exemple des plasmides d’ADN.

La lipofectamine est constituée d’un mélange 3:1 de DOSPA (trifluoroacétate de 2,3-dioléoyloxy-N- -N,N-diméthyl-1-propaniminium) et de DOPE (1,2-Dioléoyl-sn-glycéro-3-phosphoéthanolamine), qui se complexe avec les molécules d’acide nucléique chargées négativement pour leur permettre de surmonter la répulsion électrostatique de la membrane cellulaire. Les molécules lipidiques cationiques de Lipofectamine sont formulées avec un co-lipide neutre (lipide auxiliaire). Les liposomes contenant de l’ADN (chargés positivement à leur surface) peuvent fusionner avec la membrane plasmique chargée négativement des cellules vivantes, grâce au co-lipide neutre médiant la fusion du liposome avec la membrane cellulaire, permettant aux molécules de cargaison d’acide nucléique de passer dans le cytoplasme pour la réplication ou l’expression.

Pour qu’une cellule exprime un transgène, l’acide nucléique doit atteindre le noyau de la cellule pour commencer la transcription. Cependant, le matériel génétique transfecté peut ne jamais atteindre le noyau en premier lieu, au lieu de cela, il est perturbé quelque part au cours du processus de livraison. Dans les cellules en division, le matériel peut atteindre le noyau en étant piégé dans l’enveloppe nucléaire qui se réassemble après la mitose. Mais également dans les cellules qui ne se divisent pas, la recherche a montré que la Lipofectamine améliore l’efficacité de la transfection, ce qui suggère qu’elle aide en plus le matériel génétique transfecté à pénétrer dans l’enveloppe nucléaire intacte.

Cette méthode de transfection a été inventée par le Dr Yongliang Chu.