Dangers

La solution de ninhydrine va réagir avec les protéines de la peau. Portez des gants ou vous vous retrouverez avec des mains violettes.

Produits chimiques et solutions

• Solution de ninhydrine (0.25% dans l’eau)
• Méthionine
• Hydroxyproline

Matériels

• Deux cylindres de 100 mL
• Deux agitateurs. barres
• Deux agitateurs magnétiques
• Deux spatules

Procédure

1. Remplir les deux cylindres à moitié avec une solution de ninhydrine.
2. Ajouter une barre d’agitation à chaque cylindre et commencer à agiter les solutions sur les agitateurs magnétiques.
3. A un cylindre, ajouter la méthionine et à l’autre l’hydroxyproline. Laissez les solutions s’agiter pendant environ 5 à 10 minutes.
4. Après environ 5 minutes, le cylindre contenant l’hydroxyproline montrera la formation d’une solution de couleur or.
5. Quelques minutes plus tard, le cylindre contenant la méthionine montrera la formation d’une solution de couleur violette. (Couleurs Husky).

Discussion

La ninhydrine est l’hydrate d’indane-1,2,3-trione. A l’exception de la proline et de l’hydroxy-proline, tous les acides alpha-aminés présents dans les protéines réagissent avec la ninhydrine pour donner le même anion violet intensément coloré (570 nm). L’anion pourpre est constitué de deux molécules de ninhydrine, chacune sans ses groupes hydroxy et liées ensemble par un azote central. L’azote est la seule portion de l’anion pourpre qui est dérivée de l’acide aminé.

La proline et l’hydroxy-proline ne réagissent pas avec la ninhydrine de la même manière que les autres acides aminés parce que leur groupe alpha-amino fait partie d’un cycle à cinq chaînons.