Clinlab Navigator
Gammes de référence
Les gammes de référence pour les mêmes méthodes ou instruments peuvent différer entre les laboratoires et les zones géographiques pour les raisons suivantes :
- Les conditions d’exploitation sont différentes.
- Les critères de sélection des sujets sains sont différents.
- Les populations de patients sont différentes.
- Les zones géographiques présentent des températures, des altitudes, des pressions barométriques, des humidités et des fuseaux horaires différents.
- La préparation des sujets et le prélèvement des échantillons peuvent différer.
En raison de ces différences, des plages de référence doivent être établies localement chaque fois qu’un nouveau test est introduit ou qu’une méthode existante est modifiée. Le NCCLS recommande de tester au moins 120 échantillons de patients pour l’établissement d’un intervalle de référence statistiquement significatif. D’autres experts recommandent un minimum de 200 échantillons pour garantir la stabilité des limites de référence inférieure et supérieure.
Il peut être nécessaire de subdiviser les plages de référence en groupes de partition. Par exemple, les plages de référence de l’hémoglobine doivent être établies en fonction du sexe et de l’âge, tandis que les plages de cortisol doivent être subdivisées en fonction de l’heure de la journée. Chaque groupe de partition devrait contenir 120 échantillons.
Les facteurs préanalytiques peuvent également devoir être contrôlés afin de s’assurer que des plages de référence précises sont dérivées. Certains facteurs à prendre en compte sont : le moment du prélèvement ; la consommation de nourriture, d’eau et d’alcool au cours des dernières 24 heures ; le site de ponction veineuse ; le temps de garrot ; et le type de tube de prélèvement. Les échantillons à utiliser pour la détermination de la gamme de référence doivent être collectés et traités de la même manière que les travaux de laboratoire de routine.
Deux approches, paramétrique et non paramétrique, peuvent être adoptées lors de l’analyse des données de la gamme de référence. L’approche paramétrique consiste à calculer la moyenne et l’écart-type pour déterminer l’intervalle des valeurs qui se situent dans l’intervalle de confiance de 95 %. Avant d’utiliser cette méthode, la distribution de la population doit être examinée pour s’assurer que la distribution est gaussienne (en forme de cloche). Si la distribution de la population est asymétrique, les statistiques paramétriques ne sont pas valables. La distribution de la population peut être visualisée en traçant un histogramme de fréquence dans un tableur, tel qu’Excel. Comme cet exercice prend beaucoup de temps, on choisit souvent l’approche non paramétrique.
L’approche non paramétrique consiste à établir les valeurs tombant aux percentiles 2,5 et 97,5 de la population comme limites de référence inférieure et supérieure. La première étape consiste à saisir les valeurs des analytes dans une feuille de calcul et à les trier par ordre croissant de magnitude. Le nombre de valeurs dans l’ensemble de données est ensuite multiplié par 0,025 et 0,975 pour obtenir les rangs centiles des limites de référence supérieure et inférieure, respectivement. Par exemple, si l’ensemble de données comprenait 120 spécimens, les rangs centiles 2,5 et 97,5 seraient calculés en multipliant;
120 x 0,025 = 3
120 x 0,975 = 117
La limite de référence inférieure serait le troisième nombre à partir du début (haut) de la liste triée et la limite de référence supérieure serait le troisième nombre à partir du bas (fin). L’intervalle de référence serait le 95% central des données, qui se situe entre les 3e et 117e valeurs.
Les valeurs aberrantes peuvent avoir un effet substantiel sur le calcul des intervalles de référence par cette méthode et doivent être éliminées. Les valeurs aberrantes sont des points de données qui se situent en dehors de la majeure partie de la population. Bien qu’il existe des programmes informatiques et des formules pour identifier les valeurs aberrantes, aucun n’est plus efficace que l’examen visuel des données. Les valeurs aberrantes sont des résultats qui diffèrent de la moyenne de plus de 3 ET ou qui diffèrent des autres résultats de plus de 30 %.
Intervalles de référence consensuels
Les intervalles de référence pour certains analytes sont déterminés par consensus d’experts médicaux sur la base des résultats d’études de résultats cliniques. Par exemple, l’American Diabetes Association a développé des valeurs de consensus pour le glucose et l’hémoglobine A1c. D’autres exemples d’intervalles de référence consensuels sont résumés dans le tableau suivant.
| Analyte | Intervalle de référence | Groupe de consensus |
| Glucose |
<100 mg/dL non diabétique 100-125 mg/dL pré-diabète ≥126 mg/dL diabète |
ADA |
| Cholestérol |
<200 mg/dL souhaitable 200-239 mg/dL risque modéré >240 mg/dL risque élevé |
AHA, NCEP |
| Triglycérides | <150 mg/dL | AHA, NCEP |
| PSA | <4 ng/dL | ACS |
| Hémoglobine A1c |
4-6% non diabétique <7.Objectif de 0% pour les diabétiques |
ADA, IFCC |
Lorsque des intervalles de référence consensuels sont disponibles, les laboratoires cliniques rapportent ces valeurs au lieu de déterminer leur propre intervalle de référence.
Vérification d’un intervalle de référence
La vérification d’un intervalle de référence est différente de l’établissement d’un intervalle de référence. Pour une méthode de test approuvée par la FDA, le laboratoire clinique peut adopter l’intervalle de référence indiqué par le fabricant si sa population de patients donne des résultats similaires à ceux publiés dans la notice du fabricant.
Un total de 40 échantillons, 20 provenant d’hommes et 20 de femmes en bonne santé, doivent être testés et les résultats comparés à la gamme de référence publiée. Les résultats doivent être répartis uniformément dans l’intervalle de référence publié et non regroupés à une extrémité. Si 95 % des résultats se situent dans la plage de référence publiée, son utilisation peut être acceptée. Si la gamme de référence du fabricant ne peut pas être validée, le laboratoire doit établir sa propre gamme de référence.
La vérification de la gamme de référence est également utile lorsqu’il est trop difficile de collecter un grand nombre d’échantillons pour établir une nouvelle gamme de référence. Dans cette situation, il est permis de déterminer si la gamme de référence indiquée par le fabricant, votre gamme de référence existante ou une gamme de référence établie par un autre laboratoire voisin utilisant le même instrument et les mêmes réactifs est applicable.
