Stability of a metabolizable ester bond in radioimmunoconjugates

joulu 11, 2021
admin

Esterisidoksia on käytetty metaboloituvina sidoksina vähentämään radioaktiivisuuspitoisuuksia muissa kuin kohdekudoksissa metallisilla radionuklideilla leimattujen vasta-aineiden antamisen jälkeen. Tässä radiokemiallisessa vasta-ainesuunnittelussa esterisidosten olisi pilkkoututtava nopeasti muissa kuin kohdekudoksissa, mutta samalla vaaditaan esterisidosten suurta stabiilisuutta plasmassa, jotta kohteen radioaktiivisuustasot säilyisivät. Esterisidoksen vakauttamista koskevien rakenteellisten vaatimusten arvioimiseksi kehitettiin uusi bentsyyli-EDTA:sta johdettu bifunktionaalinen kelatoiva aine, jossa on esterisidos, (1-bentsyyli]etyleenidiamiini-N,N,N,N’,N’,N’ -tetraetikkahappo; MESS-Bz-EDTA). MESS-Bz-EDTA yhdistettiin tioloituun monoklonaaliseen vasta-aineeseen (OST7, IgG1), joka valmistettiin pelkistämällä sen disulfidisidoksia, jotta esterisidos saatiin lähelle ja lähelle vasta-ainemolekyyliä. Vertailun vuoksi 1-etyleenidiamiini-N,N,N,N’,N’-tetraetikkahappo (EMCS-Bz-EDTA) ja meleimidoetyyli-3-jodohippuraatti (MIH) kytkettiin OST7:ään samalla kytkentäkemialla. Kun OST7-MESS-Bz-EDTA-111In inkuboitiin 50-prosenttisessa hiiren plasmassa tai neutraalin pH:n puskuroidussa liuoksessa, radioaktiivisuus vapautui nopeasti, ja yli 95 prosenttia alkuperäisestä radioaktiivisuudesta vapautui 24 tunnin inkuboinnin jälkeen molemmissa liuoksissa esterisidoksen pilkkoutumisen seurauksena. Toisaalta vain noin 20 % radioaktiivisuudesta vapautui OST7-MIH-131I:stä molemmissa liuoksissa saman inkubaatioajan kuluessa. Hiirten biodistribuutiotutkimuksissa OST7-MIH-131I:llä havaittiin hieman nopeampi radioaktiivisuuden poistuminen verestä ja pienempi radioaktiivisuuspitoisuus maksassa ja munuaisissa kuin OST7-EMCS-Bz-EDTA-111In:llä, kun taas OST7-MESS-Bz-EDTA-111In:llä havaittiin, että radioaktiivisuus poistui verestä paljon nopeammin ja lähes verrattavissa olevin määrin OST7-MIH-131I:n ja succinamidobenzyl-EDTA-111In:n poistumiseen verestä. Nämä havainnot sekä aiemmat havainnot radiomerkityistä vasta-aineista, joissa on esterisidoksia, viittasivat siihen, että vaikka esterisidoksen tuominen lähelle vasta-ainemolekyyliä vakauttaa esterisidoksen esteraasien pääsyä vastaan, esterisidoksiin kiinnittyneiden sidosten kemiallisilla rakenteilla ja radiomerkinnöillä on merkittävä rooli esterisidoksen kemiallisessa vakaudessa. Tämä saattaa selittää tähän mennessä raportoitujen radioimmunokonjugaattien esterisidosten erilaisen vakauden.

Vastaa

Sähköpostiosoitettasi ei julkaista.