• View inline
• View popup

BAALC:n ilmentymistasot 67:ssä normaalikaryotyyppisessä AML:ssä vaihtelivat 0,004:stä 67,2:een. Kaksikymmentäkolme 67 potilaasta (34,3 %) täytti ”matalan” BAALC-ekspression kriteerit, kun taas 44 potilasta (65,7 %) luokiteltiin ”korkeaksi” BAALC-ekspressioksi. Määritimme jälleen, korreloivatko BAALC:n mRNA-tasot veressä ja luuytimessä tietyn potilaan kohdalla. Kuva 3B osoittaa, että veren ja luuytimen BAALC-tasot korreloivat vahvasti (r = 0,9501) niiden 29 potilaan kohdalla, joilla sekä luuydin että veri olivat käytettävissä diagnoosin yhteydessä. Arvioimme myös, korreloiko blastien prosenttiosuus tietyssä näytteessä BAALC:n ilmentymistasojen kanssa. Blastien prosenttiosuuden ja BAALC-ekspression välillä ei kuitenkaan havaittu korrelaatiota (Pearsonin korrelaatio, r = 0,0907).

Mielenkiintoista oli, että potilaat, joilla oli korkea BAALC-ekspressio, eivät eronneet merkittävästi potilaista, joilla oli matala BAALC-ekspressio, leukosyyttien lukumäärän osalta diagnoosin toteamishetkellä ja LDH:n mediaaniarvon osalta diagnoosin toteamishetkellä (taulukko 1). Havaitsimme kuitenkin, että AML:n monoblastisilla alatyypeillä oli pääasiassa matala BAALC-ekspressio (80 %; 12 AML-M4 ja M5 15:stä), kuten aiemmin on raportoitu (24). Matalaa BAALC-ekspressiota havaittiin myeloblastisessa AML:ssa (M1 ja M2) vain 25,6 prosentilla (11 potilasta 43:sta). Sitä vastoin korkeaa BAALC-ekspressiota havaittiin pääasiassa AML:n myeloblastisissa alatyypeissä (32 potilasta 43:sta; 74,4 %) ja erilaistumattomassa AML:ssa (M0; 5 potilasta 5:stä). Kaikilla AML:n M6- ja M7-alatyypeillä (neljä potilasta) oli myös korkea BAALC-ekspressio.

Kiinnostavaa oli, että immunofenotyypissä havaittiin merkittäviä eroja BAALC:n erilaisen ekspression mukaan. Leukeemisilla soluilla, joilla oli matala BAALC-ekspressio, oli merkittävästi korkeampi CD11b-, CD15- ja myeloperoksidaasiantigeenien ekspressio. Lisäksi matala BAALC-ekspressio korreloi matalan CD34-ekspression kanssa (taulukko 4).

Induktiosytostaattihoidon jälkeen saavutettujen täydellisten remissioiden osuus ei eronnut toisistaan potilailla, joilla BAALC-ekspressio oli korkea verrattuna matalaan BAALC-ekspressioon (82 % vs. 91 %; P = 0,3008). DFS:n mediaani oli kuitenkin huomattavasti lyhyempi potilailla, joilla oli korkea BAALC-ekspressio (8,5 vs. 21 kuukautta; P = 0,0152). Myös potilaiden, joilla oli korkea BAALC-ekspressio, kokonaiselossaoloaika lyheni verrattuna potilaisiin, joilla oli matala BAALC-ekspressio (10 vs. 21 kuukautta; P = 0,0210). Yhteenvetona voidaan todeta, että korkea BAALC-ekspressio normaalikaryotyyppisessä AML:ssä näyttää liittyvän lyhentyneeseen DFS:ään ja OS:ään.

Kuvassa. 4 on esitetty BAALC:n ilmentymistasojen dot blot -esitykset kaikille potilaille yhdessä (vasen pylväs; n = 67), potilaille, joilla on vain FLT3-ITD (toinen pylväs; n = 19), potilaille, joilla on vain CEBPA-mutaatioita (keskimmäinen pylväs; n = 12), potilaille, joilla ei ole sen enempää FLT3-ITD- kuin CEBPA-mutaatioitakaan (neljäs pylväs; n = 36), ja lopuksi 12 terveestä vapaaehtoisesta koostuvalle kontrolliryhmälle. Havaitsimme, että FLT3-ITD:tä sairastavilla potilailla BAALC:n ilmentyminen vaihteli laajasti. Koska FLT3-ITD:tä sairastavat potilaat, joilla oli korkea ja matala BAALC-ekspressio, eivät eronneet toisistaan taudinkulussaan (tietoja ei ole esitetty), voimme päätellä, että FLT3-ITD:n esiintyminen on tärkeämpää kuin BAALC-ekspression merkitys. Mielenkiintoista on, että potilaat, joilla oli CEBPA-mutaatioita, kuuluivat pääasiassa ”korkean” BAALC-ekspression ryhmään. Vain kolme potilasta 12:sta, joilla oli CEBPA-mutaatioita, sai relapsin. Huomionarvoista on, että näillä kolmella potilaalla oli korkein BAALC-ekspressio 12 normaalikaryotyyppisen AML-potilaan ryhmässä, joilla oli CEBPA-mutaatioita.

Analysoimme myös korkean BAALC-ekspression ryhmässä, oliko DFS tai OS lyhyempi potilailla, joilla oli erittäin korkea ekspressio (ylin 50 %), kuin potilailla, joilla oli ”vain” korkea ekspressio (alempi 50 %). Potilaat, joilla oli erittäin korkea BAALC-ekspressio, eivät kuitenkaan eronneet DFS:n ja OS:n suhteen potilaista, joilla oli korkea BAALC-ekspressio (P = 0,497 ja P = 0,757.). Vastaavasti tutkimme alhaisen BAALC-ekspression ryhmässä, oliko kliininen lopputulos suotuisampi potilailla, joilla oli hyvin alhainen ekspressio, kuin potilailla, joilla oli ”vain” alhainen ekspressio. Havaitsimme jälleen, että potilaat, joilla oli hyvin alhainen BAALC-ekspressio, eivät eronneet DFS- ja OS-arvoissaan potilaista, joilla oli alhainen BAALC-ekspressio (P = 0,753 ja P = 0,746, vastaavasti). Nämä tulokset tukevat raja-arvomme käyttökelpoisuutta osoittaen, että tämä raja-arvo näyttää todellakin erottavan toisistaan ennusteellisesti suotuisten ja epäsuotuisten potilaiden ryhmät.

Matalan BAALC-ekspression esiintyminen normaalikaryotyyppisessä akuutissa myelooisessa leukemiassa, jossa ei ole CEBPA- eikä FLT3-ITD-mutaatioita, liittyy suotuisaan ennusteeseen. Oletimme, että BAALC-ekspression määrittäminen saattaisi olla erityisen hyödyllistä niiden AML-potilaiden osajoukossa, joilla ei ole FLT3-ITD- eikä CEBPA-mutaatioita (36 potilasta 67:stä). Tämän alaryhmän potilaiden BAALC-ekspression mediaani oli noin 10-kertainen kontrolliryhmämme arvoon verrattuna. Näistä 36 potilaasta 18:lla (50 %) oli matala BAALC-ekspressio ja 18:lla korkea BAALC-ekspressio.

Kiinnostavinta on, että näiden kahden alaryhmän kliininen kulku poikkesi dramaattisesti toisistaan sekä DFS:n (18,4 ja 7,4 kuukautta; P = 0,0001) että OS:n (22,8 ja 9.1 kk; P = 0,0001), kuten kuvissa 5A ja B on esitetty. Näin ollen voimme päätellä, että BAALC:n ilmentyminen lisää merkittävää ennustetietoa erityisesti niillä AML-potilailla, joilla on normaali karyotyyppi ja joilta tähän mennessä puuttuu muita merkkiaineita, kuten FLT3-ITD- tai CEBPA-mutaatioita.

Loppujen lopuksi teimme monimuuttuja-analyysin tutkiaksemme, ovatko CEBPA-mutaatiot, FLT3-ITD ja BAALC-ekspressio itsenäisiä ennustemerkkejä normaalikaryotyyppisessä AML:ssa. Tämän analyysin tulokset on koottu taulukkoon 6, joka osoittaa, että CEBPA-mutaatiot, FLT3-ITD ja BAALC-ekspressio näyttävät olevan vahvoja riippumattomia ennustetekijöitä normaalikaryotyyppisessä AML:ssä.