Lipofectamine

joulu 14, 2021
admin

Lipofectamine tai Lipofectamine 2000 on Invitrogenin valmistama ja myymä yleinen transfektioreagenssi, jota käytetään molekyyli- ja solubiologiassa. Sitä käytetään RNA:n (mukaan lukien mRNA ja siRNA) tai plasmidi-DNA:n transfektiotehokkuuden lisäämiseen in vitro -soluviljelmiin lipofektiolla. Lipofektamiini sisältää lipidialayksiköitä, jotka voivat muodostaa vesipitoisessa ympäristössä liposomeja, jotka vangitsevat transfektion hyötykuorman, esim. DNA-plasmidit.

Lipofektamiini koostuu DOSPA:n (2,3-dioleoyloxy-N- -N,N-dimetyyli-1-propaniminiumtrifluoroasetaatti) ja DOPE:n (1,2-dioleoyloyl-sn-glysero-3-fosfoetanoliamiini) 3:1 seoksesta, joka kompleksoituu negatiivisesti varautuneiden nukleiinihappomolekyylien kanssa, jotta ne voivat voittaa solukalvon elektrostaattisen hylkimisen. Lipofectamiinin kationiset lipidimolekyylit on muotoiltu neutraalin rinnakkaislipidin (apulipidin) kanssa. DNA:ta sisältävät (pinnaltaan positiivisesti varautuneet) liposomit voivat fuusioitua elävien solujen negatiivisesti varautuneen plasmakalvon kanssa, koska neutraali rinnakkaislipidin avulla liposomi fuusioituu solukalvon kanssa, jolloin nukleiinihappolastin molekyylit voivat siirtyä sytoplasmaan replikoitumista tai ilmentymistä varten.

Jotta solu voisi ilmentää siirtogeeniä, nukleiinihapon on päästävä solun tumaan transkriptiota varten. Transfektoitu perintöaines ei kuitenkaan välttämättä koskaan pääse tumaan, vaan se katkeaa jossain vaiheessa siirtoprosessia. Jakautuvissa soluissa materiaali voi päästä tumaan jäämällä mitoosin jälkeen uudelleen kasautuvaan ydinkuoreen. Mutta myös ei-jakautuvissa soluissa tutkimukset ovat osoittaneet, että Lipofektamiini parantaa transfektion tehokkuutta, mikä viittaa siihen, että se lisäksi auttaa transfektoitua geneettistä materiaalia tunkeutumaan ehjään ydinkuoreen.

Tämän transfektiomenetelmän keksi tohtori Yongliang Chu.

Vastaa

Sähköpostiosoitettasi ei julkaista.