Herpes simplex -viruksen, Chlamydia trachomatis -bakteerin ja Neisseria gonorrhoeae -bakteerin aiheuttama kohdunkaulan infektio oireilevien naisten keskuudessa Dubaissa, Arabiemiirikunnissa: A Molecular Approach
Abstract
Tragikoomisella tavalla sukuelinten infektiot ovat edelleen merkittävä kansanterveysongelma monilla alueilla. Tässä tutkimuksessa selvitettiin Herpes simplex -viruksen (HSV), Chlamydia trachomatis -viruksen (CT) ja Neisseria gonorrhoeae -viruksen (NG) aiheuttamien kohdunkaulainfektioiden esiintyvyyttä Iranin sairaalaan, Dubaihin, Yhdistyneisiin arabiemiirikuntiin, lähettävien naimisissa olevien naisten keskuudessa. Retrospektiiviseen poikkileikkaustutkimukseen otettiin mukaan 201 16-80-vuotiasta naispotilasta, jotka lähetettiin Iranin sairaalan synnytys- ja naistentautien osastolle Dubaissa, Yhdistyneissä arabiemiirikunnissa, vuonna 2010. Potilaat luokiteltiin kolmeen ikäryhmään: 15-30 (ryhmä I), 31-40 (ryhmä II) ja 41-vuotiaat (ryhmä III). Jokaiselta naiselta otettiin kohdunkaulan pyyhkäisynäyte, ja HSV:n, CT:n ja NG:n aiheuttaman kohdunkaulainfektion esiintyvyys määritettiin PCR-menetelmällä. HSV, CT ja NG havaittiin 6,5 %:ssa, 10,4 %:ssa ja 5,5 %:ssa näytteistä. Iän osalta havaittiin merkittävä ero NG:n ja HSV:n esiintyvyydessä ryhmien I ja III välillä. Sukupuolitautien kansanterveydellisen merkityksen, niiden pitkäaikaisen vaikutuksen elämänlaatuun ja taloudellisen taakan vuoksi ennaltaehkäisevät toimenpiteet ja naisten valistus vaikuttavat tarpeellisilta.
1. Johdanto
Tragisesti sukupuolielinten infektiot ovat edelleen merkittävä kansanterveysongelma monilla alueilla . Vuosittain Yhdysvalloissa raportoidaan yli 15 miljoonaa uutta sukupuolitautitapausta . Naisilla jotkut niistä voivat johtaa pitkäaikaisiin lantionpohjan tulehdussairauksiin, hedelmättömyyteen, kohdunulkoisiin raskauksiin, dyspareuniaan ja kohdunkaulan syöpään . Vuosittain yli puolet kaikista uusista sukupuolitautitapauksista esiintyy 15-24-vuotiailla nuorilla . Lisäksi nuorilla ja murrosikäisillä naisilla ne voivat johtaa masennukseen, vähäiseen sosiaaliseen tukeen ja näkyvään stressiin .
Sukupuolitautien, kuten Herpes simplex -viruksen (HSV), Chlamydia trachomatis -viruksen (CT) ja Neisseria gonorrhoeae -viruksen (NG), enemmistö sukupuolitaudeista on osoittautunut oireettomiksi naisilla . Sukuelinherpestä pidetään yleisesti yleisenä kroonisena sukupuolitautina sekä kehittyneissä että kehitysmaissa, ja siihen liittyy huomattava sairastuvuus . Infektion aiheuttaa kaksi virustyyppiä, mukaan lukien HSV-2 (pääasiassa) ja HSV-1 (joskus), ja niiden esiintyvyys ja ilmaantuvuus ovat lisääntyneet viimeisten kolmen vuosikymmenen aikana .
CT-infektio on yleisin bakteeriperäisten sukupuolitautien aiheuttaja maailmassa, erityisesti nuorilla naisilla . Infektio on useimmissa tapauksissa oireeton, ja se voi tarttua emättimen, suun tai peräaukon kautta tapahtuvassa seksuaalisessa kontaktissa, ja se voi siirtyä äidiltä myös vastasyntyneelle .
Gonorrhean aiheuttaa NG, ja tällä patogeenillä on osoitettu olevan mahdollisuus kehittää resistenssiä usein käytetyille mikrobilääkkeille, erityisesti hoitamattomilla potilailla. Nämä tapaukset voivat edelleen tarttua ja helpottaa mikrobilääkeresistenssin nopeaa kehittymistä . Taudin ilmaantuvuus on suuri, joten sekä oireisten että oireettomien infektioiden diagnosointi on erittäin tärkeää .
Viime vuosina pikatunnistuspakkauksia ja mittatikkuja on käytetty yleisinä, kätevinä ja nopeina sukupuolitautien seulontamenetelminä. Uudet molekyylimenetelmät, kuten PCR, kvalitatiivinen ja kvantitatiivinen reaaliaikainen PCR ja DNA-hybridisaatio, otettiin kuitenkin käyttöön luotettavampina tekniikoina monien eri sukupuolitautien diagnosoinnissa verrattuna serologisiin menetelmiin. Lisäksi taudinaiheuttajan DNA-tason seuranta kehon nesteissä voi paljastaa taudin tilan, sen vasteen lääkitykselle ja resistenssimallin .
Dubaissa, Arabiemiirikunnissa, yksilöiden elämäntapa on muuttunut. Lisäksi monet siirtotyöläiset tai sijoittajat ovat houkutelleet tähän kaupunkiin yli 100 maasta Aasiasta, Afrikasta, Euroopasta ja niin edelleen. Koska Dubai on maailman kahdeksanneksi suosituin matkailijakaupunki, ja sen on osoitettu houkuttelevan yli 15 miljoonaa turistia eri maista vuoteen 2015 mennessä, sukupuolitaudit voivat olla uusi kansanterveydellinen huolenaihe Dubaissa, Yhdistyneissä arabiemiirikunnissa. Sukupuolitautien seulonta Dubain väestössä voi olla ensimmäinen ja erittäin tärkeä askel kansanterveysongelman hallinnassa. Tämän tutkimuksen tavoitteena oli määrittää HSV:n, CT:n ja NG:n aiheuttaman kohdunkaulan infektion esiintyvyys Iranin sairaalaan, Dubaihin, Arabiemiirikuntiin, lähettävien naimisissa olevien naisten keskuudessa.
2. Aiheet ja menetelmät
2.1. Kohdehenkilöt ja menetelmät. Tutkimusjoukko
Tutkimukseen osallistui 201 naispuolista potilasta, jotka olivat iältään 16-80-vuotiaita ( vuotta) ja jotka viittasivat Iranin sairaalan synnytys- ja naistentautien osastolle Dubaissa vuonna 2010 oireiden, kuten genitaalialueen kutinan, dyspareunian, dysurian tai epänormaalien emätinvuotojen vuoksi. Potilaat olivat eri kansallisuuksia (taulukko 1), ja kaikki heistä olivat naimisissa. Potilaat luokiteltiin kolmeen ikäryhmään: 15-30 (ryhmä I), 31-40 (ryhmä II) ja ≥41-vuotiaat (ryhmä III). Kaikilta potilailta kerättiin kohdunkaulan pyyhkäisynäyte steriilillä pyyhkäisynäytteellä, ja se siirrettiin viruksen kuljetusalustassa professori Alborzin kliinisen mikrobiologian tutkimuskeskukseen, Nemazee-sairaalaan, Shiraziin, Iraniin, jatkotutkimuksia varten. Tutkimus hyväksyttiin Iranin sairaalan koulutus- ja tutkimustoimistossa Dubaissa.
|
||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||
2.2. DNA:n uuttaminen
DNA uutettiin pyyhkäisynäytteistä 200 μl:aan viruksen kuljetusalustaa Invisorb spin virus DNA Mini Kitillä (Invitek, Berliini, Saksa) valmistajan protokollan mukaisesti. CT:n havaitsemiseksi lyysipuskurisarjaan lisättiin vakioitu määrä sisäistä kontrolli-DNA:ta, joka toimitettiin reaaliaikaisen PCR-pakkauksen mukana, uuttojen tehokkuuden seuraamiseksi. Negatiiviset ja positiiviset kontrollit otettiin mukaan uuttamisprosessiin.
2.3. Uuttaminen. Reaaliaikainen kvantitatiivinen PCR HSV:n ja CT:n osoittamiseksi
Reaaliaikainen kvantitatiivinen PCR suoritettiin käyttämällä HSV1- ja HSV2-glykoproteiini B:n (gB) alueelle spesifisiä oligonukleotidialoitinpareja ja koettimia, kuten aiemmin on raportoitu . Käytetyt alukkeet olivat HSVFP (5′TCC CGG TAC GAA GAC CAG3′) ja HSVRP (5′AGC AGG CCG CTG TCC TTG3′), ja koetin oli HSVTCP (5′FAMTGG TCC TCC TCC AGC ATG GTG ATG TTG/C AGG TCGTAMRA3′). Reaktio suoritettiin seuraavalla protokollalla: 2 minuutin inkubaatio 50 °C:ssa AmpEraasin aktivoimiseksi, 10 minuutin inkubaatio 95 °C:ssa polymeraasin aktivoimiseksi ja 45 sykliä, 15 sekuntia 94 °C:ssa denaturointia varten ja 60 sekuntia 58 °C:ssa annealingia, pidennystä ja tiedonkeruuta varten. Kukin 50 μl PCR-seosta sisälsi 10 μl puhdistettua DNA:ta, 840 nM:n pitoisuuden kutakin aluketta ja 100 nM:n koettimen 1x TaqMan universal PCR master mix -seoksessa (Applied Biosystems, Branchburg, New Jersey, USA).
CT:n havaitsemiseksi tehtiin reaaliaikainen kvantitatiivinen PCR CT-genomille spesifisillä oligonukleotidialukepareilla ja koettimella Advanced Kitillä (PrimerDesign Ltd., Millbrook Technology Campus, South Hampton, UK). Amplifiointi suoritettiin käyttämällä TaqMan universal real time PCR master mix -reagensseja (Roche, Branchburg, New Jersey, Yhdysvallat). Se tehtiin seuraavalla nelivaiheisella protokollalla: 2 minuutin inkubaatio 50 °C:ssa AmpErase-aktivointia varten, 10 minuutin inkubaatio 95 °C:ssa polymeraasiaktivointia varten ja 45 sykliä, 10 sekuntia 95 °C:ssa denaturointia varten ja 60 sekuntia 60 °C:ssa annealingia, pidennystä ja datan keräämistä varten.
Kaikki amplifikaatiot tehtiin Applied Biosystem Sequence Detector 7500 -laitteessa (Applied Biosystems, USA). Negatiiviset kontrollit otettiin mukaan ekstensioprosessiin joka 20 kliinisen näytteen välissä. Kaikki negatiiviset näytteet testattiin kahteen kertaan.
2.4. NG
NG:n osoittaminen osoitettiin PCR-detektiosarjalla (CinnaGen Inc., Iran) valmistajan protokollan mukaisesti. Reaktioseosta kuumennettiin 94 °C:ssa 3 minuutin ajan ja inkuboitiin sitten 35 sykliä 94 °C:ssa 45 sekuntia, 50 °C:ssa 20 sekuntia ja 72 °C:ssa 30 sekuntia sekä 5 minuuttia 72 °C:ssa lisäpidennystä varten. PCR-tuotteet analysoitiin 1 % agaroosigeelillä.
2.5. Tilastollinen analyysi
Eroja HSV:n, CT:n ja NG:n esiintyvyydessä ikäryhmien välillä analysoitiin khiin neliö -testillä. Lisäksi HSV:n, CT:n ja NG:n ja sieni-bakteeriperäisen kohdunkaulainfektion esiintymisen välinen yhteys analysoitiin khiin neliö -testillä. Koko aineisto analysoitiin SPSS-ohjelmistolla (SPSS for Windows, versio 16, SPSS Inc., Chicago, IL, USA). Kaikkia arvoja pidettiin tilastollisesti merkitsevinä.
3. Tulokset
Candida spp. ja Coccobacilli kohdunkaulan infektiota pidettiin sieni-bakteeri-infektiona, jonka esiintyvyys oli 45,3 %, ja ei-sieni-bakteeri-infektiona, jonka esiintyvyys oli 54,7 %. HSV oli positiivinen 13 (6,5 %) ja CT positiivinen 21 (10,4 %) näytteessä. Reaaliaikaisella PCR-määrityksellä mitattu HSV-DNA:n kopioluku vaihteli välillä 3,11 × 103-7,18 × 105 kopiota/ml viruskuljetusalustassa (mediaani 4 × 104 kopiota/ml) ja CT-DNA:n kopioluku vaihteli välillä 3,48 × 103-7,11 × 106 kopiota/ml viruskuljetusalustassa (mediaani 3,33 × 105 kopiota/ml). NG todettiin 11 (5,5 %) potilaalla.
Taulukossa 2 esitetään tautien esiintyvyys eri ikäryhmissä. Yhdelläkään potilaalla ei ollut sekainfektioita. CT:n esiintyvyydessä ei ollut merkittäviä eroja eri ikäryhmien välillä (). NG:n ja HSV:n esiintyvyydessä ei ollut merkittäviä eroja ryhmien I ja II sekä II ja III välillä (); ryhmien I ja III välillä oli kuitenkin merkittäviä eroja (). Lisäksi HSV-, CT- ja NG-infektioiden esiintyvyyden erot eivät olleet tilastollisesti merkitseviä sieni-bakteeri-infektioryhmän ja ei-sieni-bakteeri-infektioryhmän välillä (). Taulukossa 3 verrataan Dubaissa, Yhdistyneissä arabiemiirikunnissa saamiamme tietoja HSV:n, CT:n ja NG:n esiintyvyydestä eri tutkimuksiin.
|
|||||||||||||||||||||||||||||||||||||||
|
|||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||
4. Keskustelu
Tässä tutkimuksessa 201 naisesta 6,5 %:lla, 10,4 %:lla ja 5,5 %:lla oli HSV-, CT- ja NG-infektio. Tämänhetkiset HSV-, CT- ja NG-infektioita koskevat havaintomme ovat yhdenmukaisia aikaisempien sukupuolitautien esiintyvyyttä koskevien tutkimusten kanssa. Hiljattain samankaltaisessa tutkimuksessa havaittiin HSV-2-DNA:ta 7 prosentilla 509 naisesta Yhdysvalloissa . Aikaisempi Turkissa tehty tutkimus osoitti, että 12,7 prosentilla matalan riskin naisista oli CT-tartunta . Gaydos et al. raportoivat, että 3,8 % heidän tutkimastaan naispopulaatiosta oli saanut NG-tartunnan .
Edelliset kirjallisuuslähteet osoittivat, että suurin osa HSV-, CT- ja NG-infektioista voi olla oireettomia ja pitkäkestoisia . Samoin tässä tutkimuksessa yksikään naisista ei ollut tietoinen infektiostaan ennen seulontaa; joitakin kliinisiä oireita oli kuitenkin näkyvissä. Sukupuolitautien esiintyvyys oli johdonmukaisesti suurempi korkean riskin väestöryhmissä verrattuna pienemmän riskin väestöryhmiin. Yleisesti mainittuja sukupuolitauteihin liittyviä riskitekijöitä ovat naimattomuus ja useat seksikumppanit . Amsterdamissa, Alankomaissa, HSV-1:n tai HSV-2:n suurin esiintyvyys havaittiin nuorimmissa ikäryhmissä, kun taas teini-ikäisten esiintyvyys oli 5,26 prosenttia ja parikymppisten aikuisten 4,31 prosenttia . Perussa infektion esiintyvyys naisilla, joilla oli CT-infektio, oli 6-5 % ja NG-infektio 0-1 % . Etelä-Koreassa CT:n yleinen toteamisaste oli 2,4 % ja HSV tyyppi II:n 0,8 % . Tunisialaisilla seksityöläisnaisilla CT-, NG- ja HSV-2 PCR-testit olivat positiivisia 72,9 %:lla, 11,2 %:lla ja 1,1 %:lla naisista .
Vaikka aiemmat tutkimukset ovat osoittaneet, että nuori ikä liittyy positiivisiin tuloksiin CT:n osalta, joissakin kyselytutkimuksissa ei raportoitu iän ja taudin esiintyvyyden välillä olevan yhteyttä . Samoin havaintomme osoittivat, että CT:n esiintyvyydessä ei ollut merkittävää eroa eri ikäryhmien välillä.
Vaihtelevat tutkimukset osoittivat, että HSV:n esiintyvyys lisääntyi johdonmukaisesti iän myötä useimmilla maantieteellisillä alueilla . Odotetusti tämän tutkimuksen tulokset osoittivat, että HSV:n esiintyvyys oli merkittävästi suurempi ryhmässä III verrattuna ryhmään I. Samankaltainen tutkimus Bangladeshissa osoitti, että HSV-2-vasta-aineiden esiintyvyys oli alhainen alle 20-vuotiaiden naimisissa olevien naisten keskuudessa . Näin ollen tämä esiintyvyys lisääntyi iän myötä, mikä saattaa liittyä naisten seksuaalisesti aktiivisten vuosien kestoon.
Havaintomme sen sijaan osoittivat, että NG:n esiintyvyys väheni iän myötä ja infektion esiintyvyydessä oli merkittävä ero ryhmien I ja III välillä, ja infektio oli yleisempi nuorilla naisilla. Tämä tulos on ristiriidassa toisen tutkimuksen kanssa . Nigeriassa NG-infektio oli yleisempi 25-vuotiailla naisilla .
Kiinassa naispuolisten seksityöntekijöiden keskuudessa tehdyssä tutkimuksessa osoitettiin, että 8 % tutkituista oli saanut NG-infektion, mikä oli lähellä nuorten naisten tartunta-astetta. Vaikka kaikki tämän tutkimuksen naiset olivat naimisissa eikä heillä ollut seksisuhteita perheen ulkopuolella, sukupuolitautien esiintyvyys näillä potilailla oli korkea. Kumppanin seksuaalisuhde on kuitenkin arvioitava. Aikaisempi Ranskassa tehty tutkimus osoitti, että 111 hedelmättömien parien oireettoman miespuolisen kumppanin joukossa CT havaittiin PCR COBAS AMPLICOR -testillä 6,3 prosentilla ja serologisilla testeillä 4,5 prosentilla potilaista . Siksi näyttää siltä, että seksikumppaneiden seuranta on olennaista sukupuolitautien ehkäisyssä.
Sieni-bakteeriperäinen kohdunkaulainfektio todettiin 45,3 %:lla tutkitusta väestöstä, mutta HSV-, CT- ja NG-infektioiden esiintyvyydessä ei ollut merkittäviä eroja sieni-bakteeriperäisen kohdunkaulainfektioryhmän ja ei-sieni-bakteeriperäisen ryhmän välillä. Osoittautui, että bakteeri- tai sienivaginoosin ja sukupuolitautien sekainfektioita voi esiintyä, kuten HSV, CT, NG ja T. vaginalis . Lisätutkimuksia tarvitaan, jotta voidaan arvioida kattavasti bakteeri- ja sieni-infektioiden merkitystä HSV:n, CT:n, NG:n ja muiden sukupuolitautien patogeneesissä. Sukupuolitautien esiintyvyyden ja ilmaantuvuuden seuranta väestön ja erityisesti nuorten keskuudessa auttaisi viranomaisia toteuttamaan ja arvioimaan ennaltaehkäiseviä strategioita ja toimia. Koska sukupuolitaudeilla on huomattava ja pitkäaikainen vaikutus elämänlaatuun ja koska sukupuolitaudit aiheuttavat taloudellisia menetyksiä korkeiden hoitokustannusten vuoksi, sukupuolitautien tarkka arviointi on tarpeen kaikkialla maailmassa. Jerman et al. raportoivat, että vuonna 2005 Kaliforniassa esiintyi 1,1 miljoonaa uutta sukupuolitautitapausta nuorilla potilailla, joiden välittömät lääketieteelliset kustannukset olivat 1,1 miljardia Yhdysvaltain dollaria. Lisäksi oireiset sukupuolitaudit ovat vain jäävuoren huippu, ja useimmat näistä taudeista ovat oireettomia. Sukupuolitautien seulontaohjelmat ovat siis tärkeitä kaikissa maissa, jotta voidaan estää taudin leviäminen ja auttaa tutkijoita suunnittelemaan uusia hoitoprotokollia. Sukupuolitautien kansanterveydellisen merkityksen vuoksi ennaltaehkäisevät toimenpiteet ja naisten valistus vaikuttavat tarpeellisilta.
Interressiristiriita
Tekijät ilmoittavat, ettei tämän artikkelin julkaisemiseen liittyen ole eturistiriitoja.
Kiitokset
Tekijät arvostavat Iranin sairaaloiden yhteistyötä erityisesti patologian ja synnytys- ja gynekologian osastojen kanssa.