Hallazgos

Tras la lesión de los nervios periféricos, se inicia un patrón secuencial de degeneración axonal y degradación de la mielina, seguido de una rápida regeneración . El proceso inflamatorio y sus mediadores han sido implicados en la regulación de los procesos degenerativos y regenerativos axonales tras la lesión . Uno de los mediadores inflamatorios que podría desempeñar un papel importante durante estos procesos es la enzima ciclooxigenasa-2 (COX-2), responsable de metabolizar el ácido araquidónico de la membrana celular en prostaglandinas, entre otros efectos proinflamatorios. Los estudios sobre la regulación de la COX-2 durante la regeneración axonal se han centrado principalmente en su participación en la inducción del dolor neuropático, en lugar de en el propio proceso de regeneración. Sin embargo, el hecho de que la COX-2 esté tan fuertemente regulada después de una lesión nerviosa, y también sea capaz de modular mediadores inflamatorios como las citoquinas proinflamatorias, sugiere un papel importante para esta enzima también en la evolución de la regeneración nerviosa.

Celecoxib (CLX) es un inhibidor selectivo de la COX-2 con potentes propiedades antiinflamatorias y analgésicas . El CLX ha mostrado propiedades neuroprotectoras en modelos de isquemia cerebral y neuritis inflamatoria experimental . El uso de CLX también ha demostrado ser eficaz para reducir el dolor neuropático tras una lesión nerviosa periférica en ratas. Un estudio reciente descubrió que el ácido acetil salicílico, un inhibidor no selectivo de la COX, podía acelerar la recuperación funcional tras una lesión por aplastamiento de un nervio en la rata, aunque se cree que hay otros mecanismos de acción implicados . Sin embargo, los efectos del CLX en la recuperación funcional tras una lesión de un nervio periférico, hasta donde sabemos, no se han estudiado antes. En este estudio investigamos los efectos de CLX en la recuperación funcional tras una lesión del nervio periférico utilizando un modelo de aplastamiento del nervio ciático en ratas.

Los procedimientos con animales se realizaron de acuerdo con el uso y cuidado adecuados de los animales de laboratorio. En este estudio se utilizaron 15 ratas Wistar macho (250-300 g). Los animales se mantuvieron en una sala con temperatura controlada, en un ciclo de luz/oscuridad de 12 horas, con acceso a comida y agua ad libitum.

Los animales se asignaron aleatoriamente en 3 grupos diferentes: Experimental (n = 5), Control (n = 5) y Grupo Sham (n = 5). En los grupos experimental y de control, el aplastamiento unilateral del nervio ciático se realizó de la siguiente manera: Después de la anestesia con pentobarbital (Anestesal, Pfizer Inc, México) (50 mg/kg ip), se hace una pequeña incisión en la parte superior de la pierna y se separan los músculos para exponer el nervio ciático. A continuación, se aplastan los nervios con una pinza hemostática no dentada de 1 mm de ancho a una fuerza normalizada a nivel de la parte media de la tensión durante 30 segundos. En el grupo simulado, el nervio ciático se expuso pero no se aplastó. Después se sutura el músculo y la piel por separado y se deja que el animal se recupere en jaulas individuales. Esta lesión por aplastamiento puede utilizarse como modelo de axonotmesis para estudiar la recuperación de la función nerviosa.

Los animales del grupo experimental recibieron CLX (Celebrex®, Pfizer Inc, México) (10 mg/kg ip) inmediatamente antes y diariamente durante 7 días después de la lesión. El grupo de control recibió solución salina normal en los mismos períodos de tiempo.

La evaluación del índice funcional ciático (SFI), una evaluación fiable de la recuperación del nervio , se llevó a cabo en todos los animales en los días 0 (antes de la cirugía) y en los días 1, 7, 14 y 21 después de la cirugía. Se marcaron las patas traseras de las ratas con tinta negra soluble en agua y, a continuación, se permitió al animal caminar libremente por una pasarela confinada de 12 cm de ancho y 50 cm de largo dejando sus huellas en un papel blanco que cubría el suelo de la pasarela. Se midió, con una precisión de 0,5 mm, la distancia entre el talón y la punta del tercer dedo, así como la extensión de los dedos y la extensión intermedia de los dedos, definida como la distancia entre el primero y el quinto, y entre el segundo y el cuarto dedo, respectivamente. Se evaluaron tanto las extremidades normales como las lesionadas. Se midieron 3 huellas por extremidad y por animal y luego se promediaron los valores para calcular el SFI de cada animal, utilizando una fórmula descrita en otro lugar. Un SFI cercano a 100 indica un deterioro severo, mientras que un SFI cercano a 0 se considera normal.

La recuperación funcional también se examinó registrando el día de inicio de la motricidad y la marcha en todos los animales, tal y como describen Gold et al . Dos observadores ciegos examinan diariamente la recuperación y registran el número de días que tarda cada animal en poder enderezar el pie y mover los dedos (inicio motor), y en caminar utilizando el pie y los dedos del miembro posterior lesionado (inicio de la marcha). Los valores se promedian para calcular la media de cada grupo y se comparan.

Los cambios en el SFI a lo largo del tiempo se compararon entre los grupos utilizando un análisis de varianza de medidas repetidas (ANOVA) de 2 vías. Cuando el ANOVA mostró una diferencia significativa entre los grupos, se aplicó una prueba post hoc de Tukey para encontrar la localización de la diferencia. Se utilizó un ANOVA de una vía para comparar el inicio motor y de la marcha entre el grupo de control y el experimental. Los datos se analizaron con el software estadístico SPSS 11.0 (SPSS Inc. Software, Chicago, Illinois, EE.UU.), y todos los valores se expresan como media +/- SD y P < 0,05 se consideró estadísticamente significativo.

Antes de la cirugía, todos los animales tenían valores de SFI cercanos a 0 (normal), e inmediatamente después del aplastamiento del nervio valores superiores a 90 (gravemente deteriorado), sin diferencia estadística entre los grupos. Posteriormente, a partir del día 1 y hasta el último día del estudio, las ratas del grupo experimental mostraron una recuperación significativamente más rápida en comparación con el grupo de control (P = 0,02, ANOVA de medidas repetidas entre sujetos), con pruebas post hoc que mostraron una diferencia significativa el día 7 (80.2 +/- 6,3 vs. 66 +/- 12,1; P = 0,04) El inicio del día motor y de la marcha se alcanzó antes en las ratas del grupo experimental en comparación con el grupo de control, siendo estadísticamente significativo sólo para el inicio motor (11,4 +/- 1,1 vs. 13,6 +/- 1,8). El grupo Sham tuvo valores normales de SFI durante todo el estudio (tabla (tabla11).