Era hija de un tal John Duff, y estaba casada con James Gilbert, herrero. Los Gilbert fueron colonos pioneros que desembarcaron en las orillas del río Yarra y acamparon el 30 de agosto de 1835. La goleta Enterprize, propiedad de John Pascoe Fawkner, los había traído a ellos y a otros colonos desde Launceston, Tasmania, donde se había casado con James a los dieciocho años.

El grupo inicial de desembarco incluía al capitán John Lancey, maestro marinero, líder del grupo de desembarco y representante de Fawkner; George Evans, constructor; los carpinteros William Jackson y Robert Hay Marr; el labrador Charles Wise; el herrero James Gilbert y su esposa embarazada, Mary; y Evan Evans, sirviente de George Evans.

El 29 de diciembre de 1835 Mary dio a luz a su hijo, James Melbourne Gilbert, el primer niño europeo nacido en el nuevo distrito. Se le concedieron 500 acres (200 ha) de tierra y una asignación de la ciudad. Un busto de tamaño natural de Mary Gilbert se encuentra en el Conservatorio, en los Jardines Fitzroy. La escultura fue creada por la artista de Melbourne, Ailsa O’Connor (1921-1980).

El 30 de abril de 1837, Mary dio a luz a un segundo hijo, Charles Phillip Gilbert, también engendrado por su marido, James. Según la transcripción de su muerte, otros dos hijos fueron John y William.

Aunque no se sabe que James (posiblemente conocido más tarde como John) Melbourne Gilbert tuviera descendencia, se sabe que su hermano menor Charles fue padre de al menos ocho hijos de su esposa Amelia tanto en Victoria como en Nueva Gales del Sur.

Murió quemada accidentalmente en un incendio de arbustos en South Talbingo, Tumut River, Nueva Gales del Sur, el 20 de febrero de 1878, y fue enterrada en Cumberland Range el 24 de febrero de ese año.