ARN
La calidad del ARN obtenido a partir de muestras biológicas o mezclas de reacción es de importancia crítica para el éxito de las aplicaciones posteriores, incluyendo la PCR cuantitativa en tiempo real, la PCR de transcripción inversa, los microarrays, el análisis de Northern blot, los ensayos de protección de nucleasas, el mapeo de ARN, la traducción in vitro, la construcción de bibliotecas de ADNc, etc.
Por lo tanto, es esencial que los métodos de extracción, purificación o aislamiento de ARN de diferentes tipos de células y tejidos produzcan ARN de suficiente rendimiento e integridad estructural. Con esto en mente, los científicos de Zymo Research han desarrollado una gama de kits de extracción, purificación y aislamiento de ARN diseñados para la recuperación eficiente de ARN de alta calidad de una diversidad de fuentes.
Limpieza de ARN &Concentración
La purificación de ARN a partir de diferentes tipos de células y tejidos ha sido difícil en el pasado, sin embargo el ARN de alta calidad es esencial para el éxito de las aplicaciones posteriores como los microarrays, la transfección de ARN, la electroforesis en gel desnaturalizante, el Northern blotting y la RT-PCR. Zymo Research Corporation ha utilizado su tecnología punta de columna ‘Fast-Spin’ para producir el kit RNA Clean & Concentrator. Este kit recupera un ARN altamente concentrado, al tiempo que garantiza la integridad estructural del producto.
Purificación de ARN total
Zymo Research ofrece un surtido de productos que permiten el aislamiento sencillo, rápido y eficaz de ARN total a partir de una variedad de fuentes biológicas, incluyendo tejidos frescos, congelados o incluidos en parafina, células cultivadas, células bucales, sangre completa, plasma, suero, orina, levadura o virus de ARN. Al igual que nuestros kits de limpieza de ARN, todos los kits de aislamiento de ARN cuentan con la tecnología de columna Fast-Spin para obtener un ARN altamente concentrado que es muy adecuado para aplicaciones como microarrays, electroforesis en gel desnaturalizante, Northern blotting y RT-PCR. La solución versátil para la purificación del ARN total, los kits Quick-RNA están disponibles en formato Micro-, Mini-, Midi- y 96 pocillos. Además, los kits ZR RNA MicroPrep™ y ZR RNA MiniPrep™ son capaces de aislar especies de ARN tan pequeñas como 17 nt. Cada kit ha sido optimizado para una aplicación particular con componentes especializados y libres de nucleasas que aseguran: 1) niveles máximos de solubilización de la membrana y disrupción celular, 2) inhibición total de la actividad de las nucleasas, 3) desproteinización completa de la muestra, 4) aislamiento y concentración eficientes del ARN, 5) estabilización y almacenamiento seguro del ARN.
Marcador de peso molecular de ARN
La electroforesis en gel de agarosa y poliacrilamida son dos técnicas comunes para determinar el tamaño, la pureza y la identidad de la secuencia (por ejemplo, procedimientos de Northern y Southern blotting) de ácidos nucleicos. Los ácidos nucleicos pueden visualizarse en los geles utilizando tintes fluorescentes (por ejemplo, bromuro de etidio) o mediante tinción de plata. Los marcadores de tamaño de ARN (o ladders) son necesarios para ayudar a identificar ácidos nucleicos desconocidos en los procedimientos basados en geles. El ZR small-RNA™ Ladder es ideal para identificar ARN pequeños (es decir, siRNAs y miRNAs) de 17 – 29 bases de tamaño.