Como especialistas en el campo de la recogida de muestras de saliva, entendemos que disponer de muestras de ADN de saliva optimizadas para garantizar los mejores resultados posibles es crucial para su estudio de investigación.

El alto rendimiento y la alta calidad del ADN de la saliva permite a nuestros clientes realizar más estudios y generar más datos, acelerando así su investigación. Además, disponer de opciones de recogida no invasivas como Oragene proporciona a los investigadores y a los participantes un método de recogida que realmente les gusta.

Pensamos que sería útil destacar los consejos y trucos probados para optimizar sus muestras. Sabemos lo que se necesita para obtener grandes resultados de las muestras de saliva y tenemos años de experiencia que lo respaldan.

Hemos recopilado nuestras 10 principales formas de optimizar las muestras de saliva de ADN que pueden contribuir a su éxito. Mientras lee, pregúntese si alguno de estos consejos podría ser útil en su laboratorio. Y si tiene consejos adicionales para compartir, háganoslo saber en Twitter, Linkedin o en nuestra página de Facebook.

Optimización basada en la recolección

1. Es importante seguir al pie de la letra las instrucciones de recolección. Asegúrese de que los sujetos entreguen la cantidad requerida de saliva y no coman/beban/fumen/mastiquen chicle durante 30 minutos antes de entregar la muestra. Si no se siguen estas recomendaciones, se puede reducir el rendimiento del ADN.
2. Al escupir, las burbujas no cuentan. Asegúrese de que la saliva líquida se encuentra en la línea de ‘Fill To’; cualquier burbuja presente debe estar por encima de la línea. Esto garantizará que se recoja la cantidad óptima de saliva. Si recoge menos saliva, la calidad no se verá afectada, pero el rendimiento de ADN se reducirá proporcionalmente.
3. El rendimiento de ADN variará entre los donantes. Es importante probar las muestras de diferentes donantes para obtener una imagen precisa de los rendimientos que puede esperar.
4. Para los donantes que tienen problemas para escupir 2 ml, a menudo se puede estimular el flujo de saliva frotando las mejillas, justo detrás de los dientes posteriores. También se puede estimular la producción de saliva con una pizca de azúcar en la lengua. Sólo se necesita una pequeña cantidad; la suficiente para que la persona pueda saborearla. Una gota de zumo de limón también funciona.
5. A veces puede ser difícil recoger de una persona incapaz de escupir a la orden, como un niño pequeño. El uso de un kit de recogida diseñado para personas que no escupen, como la recogida asistida de Oragene (OG-675) o ORAcollect para pediatría (OC-175), hará que la recogida de muestras sea más fácil tanto para usted como para el donante y garantizará que se recoja suficiente ADN.

Optimización basada en el procesamiento

1. El paso de incubación a 50°C debe realizarse en el tubo de muestra original, antes de extraer una alícuota para la extracción de ADN. La incubación sólo debe realizarse una vez; no es necesario repetir este paso cuando se extraiga el ADN de alícuotas posteriores.
2. A menos que se tomen medidas específicas para eliminar el ARN, el ARN se copurificará con el ADN. Recomendamos cuantificar el ADN mediante fluorescencia (por ejemplo, Picogreen), ya que la absorbencia UV puede sobreestimar la cantidad de ADN.
3. Si su aplicación posterior requiere altas concentraciones de ADN, puede aumentar la concentración reduciendo la cantidad de tampón utilizada para disolver el pellet de ADN de 100 µl a 50 µl. Siempre es más fácil diluir el ADN después que tener que concentrarlo.
4. Las muestras de orígen/saliva son estables a temperatura ambiente durante años. Si no puede extraerlas de inmediato, no es necesario refrigerarlas o congelarlas; simplemente déjelas en el banco.
5. Asegúrese de que haya tiempo suficiente para que el ADN se disuelva después de la extracción. El ADN extraído de las muestras de orina/saliva mediante el método prepIT-L2P tiene un peso molecular extremadamente alto y, por lo tanto, tardará en disolverse completamente. Después de la extracción, recomendamos dejar la muestra a temperatura ambiente durante toda la noche para permitir que el ADN se disuelva completamente. Si el ADN no se disuelve por completo puede afectar a la precisión de la cuantificación.

Estas son nuestras 10 formas principales de optimizar las muestras de ADN. ¿Tiene algo que añadir a la lista? Por favor, deje un comentario y háganoslo saber.

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