Stereotaktisk injektion i hjernen
Abstract
Hjernen er en præcist organiseret og kompakt struktur, der styrer størstedelen af kroppens funktioner. Præcis identifikation af funktionsrelaterede strukturer er yderst vigtig inden for neurovidenskabelig forskning. Opnåelse af dette mål ville ikke have været muligt uden det stereotaxiske leveringssystem. Dette kapitel omhandler historien om det stereotaksiske instrument og udviklingen af systemets anvendelsesmuligheder. Desuden bruger vi rottekoordinatlaset og det stereotaksiske instrument som et eksempel og introducerer praktiske procedurer for anvendelse af dette system i følgende rækkefølge: (1) Hvordan man aflæser et rottehjerneatlas med stereotaksiske koordinater og bestemmer koordinater for en målrettet hjernestruktur. Referencepunkterne bregma, lambda og den interaurale linje fortolkes i dette afsnit. Identificer, hvilke parametre i atlasset der henviser til sagittale, medial-laterale og anterior-posterior-koordinater. Beregn desuden en vinklet leveringskoordinat for at undgå at beskadige eventuelle store blodkar i hjernen. (2) Hvordan man korrekt monterer en rotte på instrumentet og placerer en elektrode eller en afgivelsespipette på grundlag af koordinater, der er opnået eller beregnet fra atlasset. I denne procedure skal rottehovedet først monteres pålideligt på hovedholderen; derefter kræves de faktiske koordinater for et referencepunkt (bregma, lambda eller interaural linje). Teoretisk set burde alle være “0”, men det er de faktisk ikke. De faktiske parametre for et referencepunkt er det tal, der vises på instrumentstængerne, når nålens spids er rettet mod referencepunktet. (3) Injektionsmetoderne omfatter trykinjektion, ionophorese og tørkrystaltilførsel. Det vigtigste punkt for trykinjektion er at udføre den ret langsomt og holde mikropipetten eller nålen på stedet i et godt stykke tid efter injektionen. På samme måde må elektroden ikke trækkes ud af stedet umiddelbart efter injektionen ved ionophoreseindgift. I afsnittet om indgivelse af tørre krystaller præsenteres en ny anordning til stereotaktisk indgivelse af krystaller til dybe strukturer i hjernen. Online-indekset har imidlertid ikke vist nogen kommerciel tilgængelighed af denne type anordning.