Kvaliteten af RNA fra biologiske prøver eller reaktionsblandinger er af afgørende betydning for succesen af downstream-applikationer, herunder kvantitativ PCR i realtid, PCR med omvendt transskription, mikroarrays, Northern Blot-analyse, nuclease protection assays, RNA-mapping, in vitro-oversættelse, konstruktion af cDNA-biblioteker osv.

Det er derfor vigtigt, at metoderne til ekstraktion, rensning eller isolering af RNA fra forskellige typer celler og væv giver RNA med et tilstrækkeligt udbytte og en tilstrækkelig strukturel integritet. Med dette for øje har forskerne hos Zymo Research udviklet en række kits til ekstraktion, rensning og isolering af RNA, der er designet til effektiv genindvinding af RNA af høj kvalitet fra en lang række kilder.

RNA-oprensning & Koncentration

Rensning af RNA fra forskellige typer celler og væv har tidligere været vanskelig, men RNA af høj kvalitet er afgørende for succesen af downstream-applikationer såsom mikroarrays, RNA-transfektion, denaturerings-gelelektroforese, Northern blotting og RT-PCR. Zymo Research Corporation har brugt sin avancerede “Fast-Spin”-kolonne-teknologi til at fremstille RNA Clean & Concentrator-sættet. Dette kit genvinder et højt koncentreret RNA, samtidig med at det stadig sikrer produktets strukturelle integritet.

Total RNA Purification

Zymo Research tilbyder et sortiment af produkter, der gør det muligt at isolere total RNA enkelt, hurtigt og effektivt fra en række biologiske kilder, herunder friske, frosne eller paraffinindlejrede væv, dyrkede celler, bukkale celler, fuldblod, plasma, serum, urin, gær eller RNA-virus. Ligesom vores RNA-oprensningssæt er alle RNA-isoleringssættene udstyret med Fast-Spin-kolonne-teknologi til højt koncentreret RNA, der er velegnet til anvendelser som mikroarrays, denatureringsgelelektroforese, Northern Blotting og RT-PCR. Quick-RNA-sættene, som er den alsidige løsning til total RNA-oprensning, fås i mikro-, mini-, midi- og 96-well-format. Desuden er ZR RNA MicroPrep™- og ZR RNA MiniPrep™-sættene i stand til at isolere RNA-arter så små som 17 nt. Hvert kit er optimeret til en bestemt anvendelse med specialiserede, nukleasefrie komponenter, der sikrer: 1) maksimal membranopløsning og celleopløsning, 2) total hæmning af nukleaseaktivitet, 3) fuldstændig deproteinisering af prøven, 4) effektiv isolering og koncentration af RNA, 5) stabilisering og sikker opbevaring af RNA’et.

RNA-molekylvægtmarkør

Agarose- og polyacrylamidgelelektroforese er to almindelige teknikker til bestemmelse af størrelse, renhed og sekvensidentitet (f.eks, Northern og Southern blotting-procedurer) af nukleinsyrer. Nukleinsyrer kan visualiseres i geler ved hjælp af fluorescerende farvestoffer (f.eks. ethidiumbromid) eller ved sølvfarvning. RNA-størrelsesmarkører (eller ladders) er nødvendige for at hjælpe med at identificere ukendte nukleinsyrer i gelbaserede procedurer. ZR small-RNA™ Ladder er ideel til identifikation af små RNA’er (dvs. siRNA’er og miRNA’er) fra 17 – 29 baser i størrelse.