Hun var datter af en John Duff og blev gift med James Gilbert, smed. Gilbert-familien var pionerbosættere, der gik i land på bredden af Yarra-floden og slog lejr den 30. august 1835. Skonnerten Enterprize, der var ejet af John Pascoe Fawkner, havde bragt dem og andre nybyggere fra Launceston, Tasmanien, hvor hun havde giftet sig med James som attenårig.

Den første landgangsgruppe bestod af kaptajn John Lancey, skibsfører, landgangsgruppens leder og Fawkners repræsentant; George Evans, bygmester; tømrerne William Jackson og Robert Hay Marr; plovmand Charles Wise; smed James Gilbert og hans gravide kone, Mary; og Evan Evans, George Evans’ tjener.

Den 29. december 1835 fødte Mary sin søn, James Melbourne Gilbert, det første europæiske barn, der blev født i det nye distrikt. Hun fik 500 acres (200 ha) jord og en bytildeling. En buste af Mary Gilbert i naturlig størrelse kan findes i Conservatory i Fitzroy Gardens. Skulpturen er skabt af Melbourne-kunstneren Ailsa O’Connor (1921-1980).

Den 30. april 1837 fødte Mary en anden søn, Charles Phillip Gilbert, som også hendes mand James var far til. Ifølge transskriptionen af hendes død var to andre sønner John og William.

Men selvom James (muligvis senere kendt som John) Melbourne Gilbert ikke var kendt for at have noget afkom, var hans yngre bror Charles kendt for at have avlet mindst otte børn til sin hustru Amelia i både Victoria og New South Wales.

Hun blev ved et uheld brændt ihjel i en buskbrand i South Talbingo, Tumut River, New South Wales, den 20. februar 1878, og blev begravet på Cumberland Range den 24. februar samme år.