Spektroskopi er studiet af vekselvirkningen mellem stof og udstrålet energi (elektromagnetiske bølger). Dette kan fortolkes som videnskaben om at studere vekselvirkningerne mellem stof og stråling. For at forstå spektroskopi skal man først forstå det elektromagnetiske spektrum, der strækker sig fra mikrobølger, radiobølger, infrarøde og ultraviolette stråler, røntgenstråler og gammastråler . Energien af disse bølger afhænger af bølgelængden eller frekvensen af bølgen. Bølger med høj frekvens har en høj mængde energi, og bølger med lav frekvens har en lav mængde energi.

Hvis man ser på NIST’s definition af spektrofotometri står der, at
:
” Spektrofotometri er den kvantitative måling af et materiales refleksions- eller transmissionsegenskaber som en funktion af bølgelængden. Selv om det er relativt simpelt i konceptet, kræver bestemmelse af refleksionsevne eller transmittans en omhyggelig overvejelse af de geometriske og spektrale betingelser for målingen .”

Et spektrofotometer består af to instrumenter, nemlig et spektrometer til produktion af lys af en hvilken som helst valgt farve (bølgelængde) og et fotometer til måling af lysets intensitet. Instrumenterne er anbragt således, at væske i en kuvette kan anbringes mellem spektrometerstrålen og fotometeret. Den lysmængde, der passerer gennem røret, måles af fotometeret. Fotometeret afgiver et spændingssignal til en visningsanordning, normalt et galvanometer. Signalet ændrer sig i takt med, at den mængde lys, der absorberes af væsken, ændrer sig.