Department of Chemistry
Farer
Ninhydrinopløsningen vil reagere med hudens proteiner. Brug handsker, ellers ender du med lilla hænder.
Kemikalier og opløsninger
- Ninhydrinopløsning (0.25% i vand)
- Methionin
- Hydroxyprolin
Materialer
- To 100 mL cylindere
- To omrøringsflasker stænger
- To magnetomrørere
- To spatler
Fremgangsmåde
- Fyld de to cylindre halvt op med ninhydrinopløsning.
- Føj en omrøringsstang til hver cylinder, og begynd at omrøre opløsningerne på magnetomrørerne.
- Til den ene cylinder tilsættes methionin og til den anden cylinder hydroxyprolin. Lad opløsningerne omrøres i ca. 5-10 minutter.
- Efter ca. 5 minutter vil cylinderen med hydroxyprolin vise dannelsen af en guldfarvet opløsning.
- Et par minutter senere vil cylinderen med methionin vise dannelsen af en violetfarvet opløsning. (Husky Colors).
Diskussion
Ninhydrin er hydratet af indan-1,2,3-trion. Med undtagelse af prolin og hydroxyprolin reagerer alle alfa-aminosyrer, der findes i proteiner, med ninhydrin og giver den samme intenst farvede purpurfarvede anion (570 nm). Den lilla anion består af to ninhydrinmolekyler, der hver især er uden deres hydroxygrupper og bundet sammen af et centralt nitrogen. Nitrogenet er den eneste del af den lilla anion, der stammer fra aminosyren.
Prolin og hydroxyprolin reagerer ikke med ninhydrin på samme måde som de andre aminosyrer, fordi deres alfa-aminogruppe er en del af en femleddet ring.