Mutace C/EBPA u pacientů s AML s normálním karyotypem

Hladiny exprese BAALC u 67 pacientů s AML s normálním karyotypem se pohybovaly v rozmezí od 0,004 do 67,2 %. Dvacet tři z 67 pacientů (34,3 %) splňovalo kritéria pro „nízkou“ expresi BAALC, zatímco 44 pacientů (65,7 %) bylo klasifikováno jako „vysoká“ exprese BAALC. Opět jsme zjišťovali, zda hladiny mRNA BAALC v krvi a kostní dřeni u daného pacienta korelují. Obr. 3B skutečně ukazuje silnou korelaci (r = 0,9501) mezi hladinami BAALC v krvi a kostní dřeni u 29 pacientů, u nichž byla v době diagnózy k dispozici kostní dřeň i krev. Hodnotili jsme také, zda procento blastů v daném vzorku koreluje s hladinami exprese BAALC. Nebyla však zjištěna žádná korelace mezi procentem blastů a expresí BAALC (Pearsonova korelace, r = 0,0907).

Zajímavé je, že pacienti s vysokou expresí BAALC se významně nelišili od pacientů s nízkou expresí BAALC z hlediska počtu leukocytů v době diagnózy a mediánu hodnoty LDH v době diagnózy (tabulka 1). Pozorovali jsme však, že monoblastické podtypy AML měly převážně nízkou expresi BAALC (80 %; 12 z 15 AML-M4 a M5), jak bylo uvedeno dříve (24). U myeloblastické AML (M1 a M2) byla nízká exprese BAALC pozorována pouze v 25,6 % (11 ze 43 pacientů). Naopak vysoká exprese BAALC byla pozorována převážně u myeloblastických podtypů AML (32 ze 43; 74,4 %) a nediferencované AML (M0; 5 z 5). U všech AML s podtypy M6 a M7 (4 pacienti) byla rovněž zjištěna vysoká exprese BAALC.

Zajímavé je, že byly zjištěny významné rozdíly v imunofenotypu v závislosti na různé expresi BAALC. Leukemické buňky s nízkou expresí BAALC měly významně vyšší expresi antigenů CD11b, CD15 a myeloperoxidázy. Nízká exprese BAALC navíc korelovala s nízkou expresí CD34 (tabulka 4).

Míra kompletní remise dosažená po indukční chemoterapii se nelišila u pacientů s vysokou versus nízkou expresí BAALC (82 % versus 91 %; P = 0,3008). Medián DFS u pacientů s vysokou expresí BAALC byl však významně kratší (8,5 versus 21 měsíců; P = 0,0152). Také celkové přežití pacientů s vysokou expresí BAALC bylo kratší ve srovnání s pacienty s nízkou expresí BAALC (10 versus 21 měsíců; P = 0,0210). Souhrnně lze říci, že vysoká exprese BAALC u AML s normálním karyotypem se zdá být spojena se zkráceným DFS a OS.

Na obr. 4 je znázorněno bodové znázornění hladin exprese BAALC pro všechny pacienty dohromady (levý sloupec; n = 67), pro pacienty pouze s FLT3-ITD (druhý sloupec; n = 19), pro pacienty pouze s mutacemi CEBPA (prostřední sloupec; n = 12), pro pacienty nemající ani FLT3-ITD, ani mutace CEBPA (čtvrtý sloupec; n = 36) a konečně pro kontrolní skupinu 12 zdravých dobrovolníků. Zjistili jsme, že pacienti s FLT3-ITD měli široký rozsah exprese BAALC. Vzhledem k tomu, že pacienti s vysokou a nízkou expresí BAALC s FLT3-ITD se ve svém průběhu nelišili (údaje nejsou uvedeny), dospěli jsme k závěru, že přítomnost FLT3-ITD převažuje nad významem exprese BAALC. Zajímavé je, že pacienti s mutacemi CEBPA se vyskytovali převážně ve skupině s „vysokou“ expresí BAALC. Pouze tři z 12 pacientů s mutacemi CEBPA relabovali. Pozoruhodné je, že tito tři pacienti vykazovali nejvyšší expresi BAALC ze skupiny 12 pacientů s AML s normálním karyotypem a mutacemi CEBPA.

V rámci skupiny s vysokou expresí BAALC jsme také analyzovali, zda DFS nebo OS u pacientů s velmi vysokou expresí (horních 50 %) bylo kratší než u pacientů „pouze“ s vysokou expresí (dolních 50 %). U pacientů s velmi vysokou expresí BAALC se však DFS a OS nelišily od pacientů s vysokou expresí BAALC (P = 0,497, resp. P = 0,757.). Podobně jsme v rámci skupiny s nízkou expresí BAALC zkoumali, zda je klinický výsledek u pacientů s velmi nízkou expresí příznivější než u pacientů s „pouze“ nízkou expresí. Opět jsme pozorovali, že pacienti s velmi nízkou expresí BAALC se v DFS a OS nelišili od pacientů s nízkou expresí BAALC (P = 0,753, resp. P = 0,746). Tyto výsledky podporují užitečnost naší hranice naznačující, že tato hranice skutečně zřejmě odděluje skupiny prognosticky příznivých a nepříznivých pacientů.

Nízká exprese BAALC u akutní myeloidní leukemie s normálním karyotypem bez mutací CEBPA ani FLT3-ITD je spojena s příznivou prognózou. Předpokládali jsme, že stanovení exprese BAALC může být užitečné zejména u podskupiny pacientů s AML bez mutací FLT3-ITD ani CEBPA (36 z 67). Medián exprese BAALC u pacientů v této podskupině byl přibližně 10krát vyšší než hodnota u naší kontrolní skupiny. Osmnáct z těchto 36 pacientů (50 %) mělo nízkou expresi BAALC a 18 mělo vysokou expresi BAALC.

Nejzajímavější je, že klinický průběh těchto dvou podskupin se dramaticky lišil jak pro DFS (18,4 a 7,4 měsíce; P = 0,0001), tak pro OS (22,8 a 9 měsíců).1 měsíc; P = 0,0001), jak je znázorněno na obr. 5A a B. Došli jsme tedy k závěru, že exprese BAALC dodává významnou prognostickou informaci zejména u těch pacientů s AML s normálním karyotypem, kde dosud chyběly jiné markery, jako je FLT3-ITD nebo mutace CEBPA.

Nakonec jsme provedli multivariabilní analýzu, abychom zjistili, zda mutace CEBPA, FLT3-ITD a exprese BAALC představují nezávislé prognostické markery u AML s normálním karyotypem. Výsledky této analýzy jsou shrnuty v tabulce 6, která ukazuje, že mutace CEBPA, FLT3-ITD a exprese BAALC se zdají být silnými nezávislými prediktory výsledku u AML s normálním karyotypem.

.